ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ
ağırlığa göre birey başına düşen protein oranı ise birey başına düşen protein
miktarının 100 ile çarpımının yaş ağırlığa bölünmesiyle elde edildi.
3.2.3. Glikojen Miktarının Tayini
Glikojen miktarının tayininde Van Handel’in (1985) geliştirmiş olduğu yöntem
kullanıldı.
Kullanılan Çözeltiler:
Antron Çözeltisi: 750 mg antron tartıldı, 150 ml bidistile saf su ve 380 ml konsantre
H2SO4 içerisinde çözüldü.
%2’lik Sodyum Sülfat (Na2SO4) çözeltisi: 2 gr Na2SO4 tartıldı ve son hacim 100 ml
olacak şekilde bidistile saf su ile çözüldü.
Kloroform/metanol Karışımı (1/2): 10 ml kloroform ve 20 ml metanol erlenmayer
içerisinde karıştırıldı ağzı sıkıca kapatılarak saklandı.
Çizelge 3.3. Van Handel (1985) glikojen miktarı ölçüm prosedürü
Kör Standart Numune
Saf su (ml) 0.2 - -
Standart (ml) - 0.2 -
Örnek (ml) - - 0.2
Antron (ml) 1 1 1
90 o C de 15 dk bekletilir ve buzdolabında soğutulur
Glikojen miktarının tayininden önce mililitresi 0.1 g saf glikojen (Sigma G-
8751) içeren bir stok çözelti hazırlandı ve bundan seyreltme yöntemi ile 0.005,
0.010, 0.025, 0.050, ve 0.075 mg/ml glikojen standart çözeltileri elde edildi. Bu
glikojen standardı serisine Van Handel (1985) metodu uygulanarak örneklerin ışık
42