ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

More documents

Recommendations

Info

3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ 3.2. Metod 3.2.1. Böceklerin Homojenizasyonu Böcekler 1/20 oranında fosfat tamponu (pH 7.4) içerisinde 24000 devir/dk da homojenize edildi. Homojenat 10000 devir/dk da 30 dakika santrifüj edildikten sonra elde edilen supernatant enzim aktivitesi tayininde ve protein miktarının belirlenmesinde, dipteki pellet ve yaklaşık 0.2 ml süpernatant ise glikojen miktarının belirlenmesinde kullanıldı. 3.2.2. Protein Miktarının Tayini Protein miktarının tayininde Lowry ve arkadaşları (1951) tarafından gösterilen yöntem kullanılmıştır. Prensip Proteinlerin alkali CuSO4 ilavesiyle fosfotungustik asit ile mavi renkli kompleks oluşturması ilkesine dayanır. Kullanılan Çözeltiler Çözelti A: [% 2 Na2CO3 (0.1 N NaOH içinde)] : 2 g Na2CO3 tartıldı ve 0.1 N NaOH içinde toplam hacim 100 ml olacak şekilde çözüldü. Çözelti B1: (%1 CuSO4.5H2O): 1 g CuSO4.5H2O tartıldı ve çözelti bidistile saf su ile toplam hacim 100 ml olacak şekilde çözüldü. Çözelti B2: (%2 Na-K-tartarat): 2 g Na-K-tartarat tartıldı ve çözelti bidistile saf su ile toplam hacim 100 ml olacak şekilde çözüldü. Çözelti C: 50 hacim çözelti A, 1 hacim 1/1 oranındaki çözelti B1 ve B2 karışımı ile karıştırıldı. Folin-ciocalteu çözeltisi: Kullanılmadan önce 1/1.5 oranında bidistile saf su ile seyreltildi. 40
3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ Çizelge 3.2. Lowry ve ark. (1951) protein miktarı ölçüm prosedürü Kör Standart Numune Saf su (ml) 0.3 - - Standart (ml) - 0.3 - Örnek (ml) - - 0.3 Çözelti C (ml) 3 3 3 Karıştırılır ve oda sıcaklığında 15 dakika bekletilir Folin-ciocalteu (ml) 0.3 0.3 0.3 Protein miktarlarının ölçümünden önce 100 ml si 1 gr albümin (Sigma; A- 2153) içeren bir stok çözelti hazırlandı ve bu çözeltiden seyreltme yöntemi ile 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7 ve 0.8 mg/ml albümin içeren standart çözeltiler elde edildi. Her bir standart çözeltiye Lowry ve ark.,(1951) protein tayini metodu kullanılarak spektrofotometrede (Cecil 5000) 750 nm de ışık absorbsiyon değerleri okundu ve verilerden aşağıdaki regresyon denklemi elde edildi. y = 0,0857x + 0,0719 (R 2 =0,9894) (3.1) Örneklerin protein miktarları okunan absorbansların bu regresyon denkleminde yerine konulmasıyla hesaplandı. Protein miktarlarının belirlenmesi için kör tüpüne 0.3 ml bidistile saf su üzerine 3 ml çözelti C eklendi ve 15 dakika oda sıcaklığında bekletildikten sonra 0.3 ml Folin-ciocalteu ilave edildi. 30 dakika bekletildikten sonra 750 nm de okuma yapıldı. Örneklerin okunması için 0.3 ml örnek üzerine 3 ml çözelti C eklenerek oda sıcaklığında 15 dk bekletildi ve üzerine 0.3 ml Folin-ciocalteu ilave edilerek 30 dakika bekletildi. Daha sonra 750 nm de köre karşı absorbans değerleri okundu. Elde edilen ışık absorbsiyon değeri regresyon doğrusu denkleminde yerine konularak bir deney serisinin bir tekrarındaki böceklerin toplam protein miktarı elde edildi. Bu değer böcek sayısına bölünerek birey başına düşen protein miktarı saptandı. Yaş 41
Page 1 and 2:
Tamer KAYIŞ ÇUKUROVA ÜNİVERSİT
Page 3:
ÖZ DOKTORA TEZİ DİAZİNON’UN S
Page 7: TEŞEKKÜR Öncelikle bana bu araş
Page 10 and 11: 1.2.1.1.(1). Cu/Zn SOD ............
Page 12 and 13: ÇİZELGELER DİZİNİ SAYFA Çizel
Page 14 and 15: SİMGELER ve KISALTMALAR ACh : Aset
Page 16 and 17: XIV
Page 18 and 19: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ hedefi ase
Page 20 and 21: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ Pestisitle
Page 22 and 23: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ 3. Normal
Page 24 and 25: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ elektron d
Page 26 and 27: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ proteinler
Page 28 and 29: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ 1.1.3.2.
Page 30 and 31: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ 1.1.4.3. K
Page 32 and 33: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ enzimatik
Page 34: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ inhibitör
Page 37 and 38: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ AH2 + H2O2
Page 39 and 40: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ 1.2.1.3.(1
Page 41 and 42: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ sonlandır
Page 43 and 44: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ 1.2.2.7. A
Page 45 and 46: 1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ etkilerini
Page 47 and 48: 2. ÖNCEKİ ÇALIŞMALAR Tamer KAYI
Page 49 and 50: 2. ÖNCEKİ ÇALIŞMALAR Tamer KAYI
Page 51 and 52: 3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ 3
Page 53 and 54: 3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ
Page 55: 3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ 3
Page 59 and 60: 3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ a
Page 61 and 62: 3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ
Page 63 and 64: 3. MATERYAL ve METOD Tamer KAYIŞ H
Page 65 and 66: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ 4. BULGULA
Page 67 and 68: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ SOD Aktivi
Page 69 and 70: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ 53
Page 71 and 72: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Katalaz Ak
Page 73 and 74: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Protein (%
Page 77 and 78: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Besindeki
Page 81 and 82: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Ergin Çı
Page 83 and 84: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Dişi Çı
Page 85 and 86: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Farklı di
Page 87 and 88: 4. BULGULAR Tamer KAYIŞ Erkek Çı
Page 89 and 90: 5. TARTIŞMA Tamer KAYIŞ 5. TARTI
Page 91 and 92: 5. TARTIŞMA Tamer KAYIŞ 1993; Fel
Page 93 and 94: 5. TARTIŞMA Tamer KAYIŞ bireyler
Page 95 and 96: 6. SONUÇ ve ÖNERİLER Tamer KAYI
Page 97 and 98: KAYNAKLAR ADAMSKI, Z., ZIEMNICKI, K
Page 99 and 100: BLOKHINA, O., VIROLAINEN, E. and FA
Page 101 and 102: CROSS, C. E., HALLIWELL, B., BORISH
Page 103 and 104: FANTEL, A.G., 1996. Reactive Oxygen
Page 105 and 106: GUTTERIDGE, J.M. and HALLIWELL, B.,
Page 107 and 108:
IDRIS, A. B. and GRAFIUS, E., 1997.
Page 109 and 110:
MATES, J.M., PEREZ-GOMEZ, C. and NU
Page 111 and 112:
NETTO, L.E.S., KOWALTOWSKI, A.J., C
Page 113 and 114:
SAK, O. and UÇKAN, F., 2009. Cyper
Page 115 and 116:
UKEDA, H., MAEDA, S., ISHII, T. and
Page 117 and 118:
ÖZGEÇMİŞ 22/09/1980 yılında A
show all

ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?