ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...
ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...
ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
1. GİRİŞ Tamer KAYIŞ<br />
Se-GSH-Px ler, H2O2’de dahil çeşitli hidroperoksitlerin yıkımını, GSH’ın<br />
oksidasyonu yoluyla katalizler. Okside glutatyon (GSSG) ise GSH-Rd enzimi<br />
yardımıyla tekrar GSH’a indirgenir (Halliwell ve Gutteridge, 1999; Aydın ve ark.<br />
2001) (Reaksiyon 1.15, 1.16).<br />
H2O2 (ROOH) + 2GSH ← ⎯→ GSSG + 2H2O(ROH) (1.15)<br />
GSSG + NADPH + H + ← ⎯→ 2GSH + NADP + (1.16)<br />
Selenyuma bağımlı peroksidazların bir diğer formuda fosfolipid hidroperoksit<br />
glutatyon peroksidaz (PL-GSH-Px) dir. Molekül ağırlığı yaklaşık olarak 20 kDa olan<br />
enzim bir selenyum atomu içerir ve fosfolipid hidroperoksitleri alkollere<br />
indirgeyerek membran bağımlı en önemli antioksidan olan E vitamini eksikliğinde<br />
membranı peroksidasyona karşı korur (Halliwell ve Gutteridge, 1999) (Reaksiyon<br />
1.17).<br />
ROOH + 2GSH ← ⎯→ ROH + H2O + GSSG (1.17)<br />
Selenyuma bağımlı olmayan GSH-Px’ler glutatyon ile konjugasyon<br />
reaksiyonlarında glutatyon transferaz olarak aktivite gösterirler (Lawrence ve Burk,<br />
1976).<br />
GSH-Px enzim aktivitesinin tayininde en fazla tercih edilen yöntemlerin esası<br />
substrat olarak H2O2, kümen hidroperoksit ve tersiyer butil hidroperoksitin<br />
kullanıldığı ortamda GSH’un oksidasyonu sonucu oluşan GSSG’un glutatyon<br />
reduktaz ve NADPH’ın varlığında indirgenmiş forma dönüşmesine ve bu dönüşüm<br />
esnasında NADPH’ın oksidasyonunun spektrofotometrik ve flourometrik ölçümüne<br />
dayanır. Enzim aktivitesi dakikada okside olan NADPH üzerinden hesaplanır. Ayrıca<br />
reaksiyon esnasında hidroperoksitlerin ve GSH’un tüketimi esas alınarak yapılan<br />
tayinlerde mevcuttur ( Lawrence ve Burk, 1976; Paglia ve Valentine, 1967; Flohe ve<br />
Gunzler, 1984)<br />
22