â¹Ã§indekiler - Anadolu Ãniversitesi
â¹Ã§indekiler - Anadolu Ãniversitesi â¹Ã§indekiler - Anadolu Ãniversitesi
180 Bitki Kimyas› ve Analiz Yöntemlerifiekil 9.3Sütunkromatografisitekni¤i ile ayr›m.fiekil 9.4Yüksek Bas›nçl› S›v› Kromatografisi (YBSK)Oldukça h›zl› bir sütun kromatografisi tekni¤idir. Bu teknikte, dört mekanizma dagörülmesine ra¤men kar›fl›mdaki maddelerin ayr›m› a¤›rl›kl› olarak partisyon mekanizmas›nagöre olur. Maddelerin YBSK ile analiz edilebilmeleri için herhangi birçözücüde çözünmeleri yeterlidir.YBSK sistemi bafll›ca flu k›s›mlardan oluflur (fiekil 9.4);• Hareketli faz›n içinde bulundu¤u bir çözücü kab›,• Çözücünün sabit bir h›z ya da bas›nçta kolona verilebilmesi için bir pompa,• Ayr›m›n gerçekleflti¤i kolon,• Ayr›m› yap›lacak kar›fl›m›n kolona verildi¤i enjeksiyon portu k›sm›,• Kolonun içinde bulundu¤u bir f›r›n,• Kolondan ç›kan maddelerin dedekte edildi¤i bir dedektör sistemi,• Ayr›lan maddelerin pik olarak kaydedildi¤i bir kay›t cihaz›.Yüksek bas›nçl› s›v›kromatografisisistemininbölümleri.pompaenjektörkolondedektörkaydediciçözücü kayna¤›f›r›nHareketsiz faz, cam veya paslanmaz çelik kolon içine porlu inert madde üzerineadsorbsiyon yoluyla veya kimyasal ba¤larla film fleklinde kaplanm›flt›r. Ayr›m›yap›lacak kar›fl›m hareketli fazda çözünmüfl halde kolonun bafl›ndan enjekte edilir.
9.Ünite- Kromatografik Yöntemler181Partisyona u¤rayarak ilerleyen ve birbirinden ayr›lan maddeler kolonu terkedip dedektör taraf›ndan dedekte edilirler. Kolonun içinde bulundu¤u f›r›n›n s›-cakl›¤› 50°C’yi geçmez.YBSK sistemlerinde en yayg›n kullan›lan dedektörler flunlard›r;• Ultraviyole (UV) dedektör,• Refraktometre (k›r›lma indeksi dedektörü),• Kondüktometre (iletkenlik dedektörü),• Floresans dedektör.Orta Bas›nçl› S›v› Kromatografisi (OBSK)Preparatif amaçla kullan›lan bir s›v› kromatografisi sistemidir. YBSK sistemlerindekullan›lan kolonlardan daha uzun ve daha genifl kolonlar kullan›l›r. Bu sayedebüyük miktarda madde izolasyonu gerçeklefltirilebilir. OBSK kolonlar› kullan›c› taraf›ndanuygun adsorban madde ile sütun kromatografisinde oldu¤u gibi doldurulabilir.Kolon dolgu materyalinin özelliklerine ba¤l› olarak ayr›mda dört mekanizmada görülür. OBSK ayr›m gücü ve maddelerin ayr›lmas› aç›s›ndan SK ve YBSKaras›nda bir teknik olarak düflünülebilir. Bu sistemde, YBSK sisteminde kullan›landedektörler kullan›labilir.‹yon De¤iflimi Kromatografisi‹yon de¤iflimi, ayn› yükteki iyonlar›n geri döndürülebilir bir flekilde yer de¤ifltirmesiolay›d›r. Hareketsiz faz iyon de¤ifltirici bir reçinedir. Bu reçine suda fliflirildiktensonra bir cam sütuna doldurulur. Ayr›m› yap›lacak kar›fl›m uygun bir çözücüde çözüldüktensonra sütuna ilave edilir. Çözeltide iyonize hale geçen kar›fl›mdaki maddelerreçine yüzeyindeki iyonize olabilen gruplarla iyon de¤iflimi yaparak ba¤lan›r.Daha sonra uygun tampon çözeltiler ile elüsyon yap›larak kar›fl›mdaki maddelerinayr› ayr› elde edilmesi sa¤lan›r. ‹yon de¤ifltirici reçineler sütundaki tümmaddeler elüe olduktan sonra asit ya da bazlarla y›kanarak eski durumlar›na getirilir.Bu flekilde tekrar tekrar kullan›lmalar› söz konusu olabilmektedir.‹yon de¤iflimi kromatografisinin mekanizmas›n› daha iyi kavrayabilmek için birörnekle aç›klarsak: Elimizde Na + formunda bir katyon de¤ifltirici reçine oldu¤unuvarsayal›m. Reçine birkaç saat suda bekletilerek fliflirilir ve sütuna doldurulur. Dahasonra sütundan Hidroklorik asit (HCl) geçirilir. Bu flekilde asitin H + iyonlar› ilereçinedeki Na + iyonlar› yer de¤ifltirir. HCl geçirme ifllemi reçinedeki tüm Na + iyonlar›n›nH + iyonlar› ile yer de¤ifltirmesine kadar devam eder. Bu durumun gerçekleflipgerçekleflmedi¤i sütundan ç›kan elüat’›n PH ka¤›d›yla asit reaksiyon vermesiile anlafl›l›r. Sonras›nda elüat asit reaksiyon vermeyinceye kadar sütundan NaCl çözeltisigeçirilir. Bu fleklide tüm iyonlar›n Na + iyonlar›yla yer de¤ifltirdi¤i anlafl›l›r vereçine kullan›ma haz›r hale gelmifltir.Ay›rmak istedi¤imiz kar›fl›mda iki aminoasit oldu¤unu varsayal›m. Kar›fl›mdanbelli bir miktar sütuna ilave edilir ve sitrat tampon çözeltisi (pH 1-3) ile elüsyonabafllan›r. Tampon çözeltinin pH’› hafifçe artt›r›larak elüsyona devam edilir. BupH’da iyon de¤ifltirici reçine için daha fazla afiniteye sahip olan aminoasit Na + ileyer de¤ifltirir. Reçineye daha az afinitesi olan di¤er aminoasit ise sütunda tutunmaks›z›nilerler. Daha yüksek pH’a sahip tampon çözelti ile elüsyon sonucu kar›-fl›mdaki di¤er aminoasitin sütundan elüe olmas› sa¤lan›r.Preparatif: Kar›fl›mdakimaddelerin izolasyonu birbaflka deyiflle bilefliklerinsaf halde elde edilmesineyönelik çal›flmalar.Tampon çözeltiler: Zay›fasit veya baz›n kendi tuzuylaoluflturdu¤u çözeltilerdir.Asit veya baz ilave edildi¤izaman çözeltinin pH’s›ndafazla de¤iflme olmaz.
- Page 136 and 137: 130 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 138 and 139: 132 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 140 and 141: TELEV‹ZYONTELEV‹ZYON134 Bitki K
- Page 142 and 143: 136 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 144 and 145: 138 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 146: 140 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 149 and 150: Sabit Ya¤lar ÜzerindeSIRA S‹ZDE
- Page 151 and 152: 7. Ünite - Sabit Ya¤lar Üzerinde
- Page 153 and 154: 7. Ünite - Sabit Ya¤lar Üzerinde
- Page 155 and 156: 7. Ünite - Sabit Ya¤lar Üzerinde
- Page 157 and 158: 7. Ünite - Sabit Ya¤lar Üzerinde
- Page 159 and 160: 7. Ünite - Sabit Ya¤lar Üzerinde
- Page 162 and 163: 8B‹TK‹ K‹MYASI VE ANAL‹Z Y
- Page 164 and 165: 158 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 166 and 167: 160 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 168 and 169: 162 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 170 and 171: 164 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 172 and 173: 166 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 174 and 175: 168 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 176 and 177: 170 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 178 and 179: 172 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 180 and 181: 9B‹TK‹ K‹MYASI VE ANAL‹Z Y
- Page 182 and 183: 176 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 184 and 185: 178 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 188 and 189: 182 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 190 and 191: 184 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 192 and 193: 186 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 194 and 195: 188 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 196: 190 Bitki Kimyas› ve Analiz Yönt
- Page 199 and 200: Spektroskopik YöntemlerG‹R‹fiE
- Page 201 and 202: 10. Ünite - Spektroskopik Yönteml
- Page 203 and 204: 10. Ünite - Spektroskopik Yönteml
- Page 205 and 206: 10. Ünite - Spektroskopik Yönteml
- Page 207 and 208: 10. Ünite - Spektroskopik Yönteml
- Page 209 and 210: 10. Ünite - Spektroskopik Yönteml
- Page 211 and 212: 10. Ünite - Spektroskopik Yönteml
- Page 213 and 214: Sözlük207SözlükAAfinite: ‹lgi
- Page 215: Sözlük209Prokaryotik hücre: Bakt
180 Bitki Kimyas› ve Analiz Yöntemlerifiekil 9.3Sütunkromatografisitekni¤i ile ayr›m.fiekil 9.4Yüksek Bas›nçl› S›v› Kromatografisi (YBSK)Oldukça h›zl› bir sütun kromatografisi tekni¤idir. Bu teknikte, dört mekanizma dagörülmesine ra¤men kar›fl›mdaki maddelerin ayr›m› a¤›rl›kl› olarak partisyon mekanizmas›nagöre olur. Maddelerin YBSK ile analiz edilebilmeleri için herhangi birçözücüde çözünmeleri yeterlidir.YBSK sistemi bafll›ca flu k›s›mlardan oluflur (fiekil 9.4);• Hareketli faz›n içinde bulundu¤u bir çözücü kab›,• Çözücünün sabit bir h›z ya da bas›nçta kolona verilebilmesi için bir pompa,• Ayr›m›n gerçekleflti¤i kolon,• Ayr›m› yap›lacak kar›fl›m›n kolona verildi¤i enjeksiyon portu k›sm›,• Kolonun içinde bulundu¤u bir f›r›n,• Kolondan ç›kan maddelerin dedekte edildi¤i bir dedektör sistemi,• Ayr›lan maddelerin pik olarak kaydedildi¤i bir kay›t cihaz›.Yüksek bas›nçl› s›v›kromatografisisistemininbölümleri.pompaenjektörkolondedektörkaydediciçözücü kayna¤›f›r›nHareketsiz faz, cam veya paslanmaz çelik kolon içine porlu inert madde üzerineadsorbsiyon yoluyla veya kimyasal ba¤larla film fleklinde kaplanm›flt›r. Ayr›m›yap›lacak kar›fl›m hareketli fazda çözünmüfl halde kolonun bafl›ndan enjekte edilir.
Change language