İSHAK ÖZEL TEKİN 9 NİSAN SALON A 8-930.pptx - Frame

P.O. Number Terms Rep Ship Via F.O.B. ProjectQuantity Item Code Description Price Each AmountGelenekten Geleceğe:İmmünoloji LaboratuvarınınTeknoloji ile İmtihanıDr. İshak Özel TEKİNZKÜ Tıp Fakültesiİmmünoloji Anabilim DalıTotal

İmmünolog lamba cini

• Gelenek , bir toplumda çok eskilerdenkalmış olmaları dolayısıyla saygın tutulupkuşaktan kuşağa iletilen, yaptırım gücüolan kültürel kalıntılar, alışkanlıklar,bilgi, töre ve davranışlar.Wikipedia

Gelenek nasıl ele alınabilir?1. Geçmiş yaşam biçimlerinin içindeyaşanılan ana taşıdıkları maddi ve manevideğerler bütünü2. Geleneğin zengin ve kutsal değerleriçeren köklü yanı3. Postmodernist yaklaşımlarla elealınmasından kaynaklanan aletsel,işlevsel, yani kullanıma açık madde yönü

Arthur Stanley Eddington (1882-1944). W. Dyson, A. S. Eddington, and C.Davidson, "A Determination of theDeflection of Light by the Sun'sGravitational Field, from ObservationsMade at the Total Eclipse of May 29,1919" Philosophical Transactions of theRoyal Society of London. Series A,Containing Papers of a Mathematical orPhysical Character (1920): 291-333, on332.

Teknoloji =τέχνη (sanat)+ λογία (bilmek)

Technology Acceptance Model (TAM)AlgılananKullanışlılıkDışDeğişkenlerKullanımaKarşıTutumKullanımNiyetiGerçeksistemkullanımıAlgılananKullanımKolaylığıDavis, F. D., Bagozzi, R. P., and Warshaw,P. R. "User Acceptance of ComputerTechnology: A Comparison of TwoTheoretical Models," ManagementScience, 35, 1989, 982-1003.

TAM2Venkatesh, V. and Davis, F.D. "ATheoretical Extension of the TechnologyAcceptance Model: Four LongitudinalField Studies," Management Science, 46,2000, 186-204.

TAM 3Venkatesh, V., Morris, M.G., Davis, F.D.,and Davis, G.B. “User Acceptance ofInformation Technology: Toward aUnified View,” MIS Quarterly, 27, 2003,425-478.

PerformansbeklentisiEforbeklentisiSosyaletkiUnified Theory ofAcceptance and Use ofTechnology (UTAUT)KullanımniyetiKullanımdavranışıKolaylaştırılmışŞartlarCinsiyet Yaş DeneyimGönüllükullanımVenkatesh, V., Morris, M.G., Davis, F.D., and Davis,G.B. “User Acceptance of Information Technology:Toward a Unified View,” MIS Quarterly, 27, 2003,425-478

Ölçülebilir olanıölç,ölçülemeyeniölçülebilir halegetir.Galileo Galilei

Antoni van Leeuwenhoek(1632-1723) 1723)Delft, Hollanda

Dr. George Friou

IgG1IgG2IgG3IgG4Arch Dermatol Res (2007) 299:1–8Cassian Sitaru · Sidonia Mihai · Detlef Zillikens

Enzyme-linked immunosorbentspot (ELISPOT) Cecil Czerkinsky1983

1) Sitokin özgül Antikorlar 96 çukurELISPOT plağına bağlanır2) Hücreler özgül uyaran varlığı veyokluğunda eklenir.3) İnkübasyon sırasında uyarımlaaktivasyon olur ve salgılanan sitokinlereantikor bağlanır4) Hücreler kaldırılır ve enzim ya dabiotinli konjugat eklenir5) Biotin kullanılmışsa Streptavidin –enzim konjugat eklenir6) Son olarak substrat ve renklendiriciile spotlar görüntülenir.7) Uyarılmış kültürlerdeki spotlar ,uyarılmamış kontrolle karşılaştırılır.

B hücre Elispotassay, IgG

IFNγ, IL-2

• Genomics• Proteomics• Glucomics

ÇOKLU ANALİZ SİSTEMLERİ(Minyatür Proteomics Sistemler)

ÇOKLU ANALİZ SİSTEMLERİ(Minyatür Proteomics Sistemler)

Yöntemler

İMMUNOARRAY• Birçok biyobelirteç ve hücre içi sinyal sistemininçoklu saptanması avantajı• Antijen ya da antikorlar ELISA daki gibi bir zeminesabitlenirse ‘’planar array’’,mikrokürelere sabitlenirse ‘’Süspansiyon ya da beadarray’’olarak adlandırılırlar.Planar ArrayBead Array

Array• Dizi• Nesnelerin sistematik düzenlenmesi• Genellikle satır ve sütünlar kullanılır

Planar Array• Avantaj:Kompleks setler oluşturabilmek• Problem:-Antijen üç boyutlu yapısının bozulabilmesi-Sterik engellenme

Bead Array• Avantaj:Esneklik (Cihaz,taşıyıcı küre…)Sterik engellenme sorunu yok• Problem:?

• Adreslendirilen Mikroküreler( LabMAP, xMAP):Yaygın kullanım• Adreslendirilen nanopartiküller(Nanobarkod: metal nanostrip): Dahafazla değişkene bakabilme

• Mikrofluidics yaklaşımlar(Elektrokinetik, elektro-osmotik,elektroforetik…):Antijen antikor bağlanma kinetiklerikonusunda ek bilgi

xMAPx= değişkeninizMAP= MultipleAnalyte ProfileFCMIA: FluorescentCovalentMicrosphereImmunoassayLabMAP: LaboratoryMulti Analyte Profile

Multipleks KitlerinAvantajları• Tek örnekte 20’den fazlaanalitin eş zamanlı ölçümü• Aynı anda 20’den fazlaanalitin bireyselkarşılaştırılması• Sadece 25 µl örnekhacmiyle 20’den fazlaanalit ölçümü• Geniş standart aralığı• 96-çukurlu plak ya datüplerde kolay uygulama• Flow cytometry ve özelLuminex cihazlarda ortakkullanım

100 farklı tonda boya

100 Çoklu Analit Bölgesi

1. Antikor kaplı küre2.Antikor analiti tutar3.Floresan işaretli raportörantikora bağlanan analitebağlanırLaserA4.Küre ve raportör laser ışıklasayılırLaserB

Kırmızı lazerküreyi okurYeşil lazer hedefmiktarını belirler

Yazılım analizianındagerçekleştirir1 saatten az sürede10000 adet sonuçanalizlenir.

ASCAbeta-2 MicroglobulinCentromere BChromatinDNAGliadin AGliadin GHistoneHistone H1Histone H2AHistone H2BHistone H3Histone H4HSP-27 pS82 GeneralHSP-27 Total GeneralHSP-32HSP-65HSP-71HSP-90 aHSP-90 bOtoimmüniteJo-1PCNAPR3PR3 (cANCA)RFRibosomal PRNPRNP-ARNP-CSCFScl-70Serum Amyloid PSm GeneralSmithSSASSBStreptolysin OTGTPOTransglutaminase ATransglutaminase GENA ProfileSSASSBSmRNPScl-70Jo-1SLE ProfileSSASSBSmRNPScl-70Jo-1Ribosome-Pchromatin)

Teknolojik DeğişimSerolojide teknolojiye paralel ilerlemeler:– Multipleks ve paralel analizlerTest tüpleriMikrokuyucuklar Mikroaray Mikroküre temellixMap

©J.Paul Robinson

Ön açı saçılımı PMTIşık kaynağıFloresan PMTGeniş açı saçılımı PMTÖrnek girişiFloresan PMTFloresan PMTEmisyonFiltreblokEmisyonFiltreblokOynar AynaMikroskopobjektifiMikroskopobjektifiUyarım filtrebloğuOynar Ayna3OkülerOküler

Side Scatter (SSC)90° sapma~ Hücre yapılarıLaserYForward Scatter(FSC)< 10° sapma~ hücre büyüklüğüFloresan ve antijenyoğunluğu

• Aynı anda kaç parametre çalışabilirsiniz?

• 60 parametreye ne dersiniz?• Florokromlar ve ilişkili sorunlar daolmasa

Dr. Olga OrnatskyDr. Scott D. TannerCyTOF

MassCytometry

CyTOF• Inductively Coupled Plasma Time-of-FlightMass Spectrometer (ICP-TOF MS)-Kompleks matrikslerden stabil izotoplarınkantitatif ölçümü

• (MALDI) Matrix-assisted laserdesorption/ionization• (TOF)Time-of-Flight• MALDI-TOF

CyTOFkütle sitometri şematik gösterimiAnalytical Chemistry, Vol. 81, No. 16, August15, 2009

Antikora metal içeren polimer takılmasıO. Ornatsky et al. / Journal ofImmunological Methods 361 (2010) 1–20

KG1a (A) and Ramos (B) hücre serilerininMass Cytometry analizi (Flow-jo yazılımı ile)O. Ornatsky et al. / Journal ofImmunological Methods 361 (2010) 1–20

Monoblastik AML M5(A)Monositik AML M5 (B)Polar diyagramlarda medyan intensitedeğerleri kullanılmış(Mass Cytometry,Flow-Jo)

İNOVASYON

Konjugat kullanmadan özgül antikorvarlığını nasıl gösteririz?

Antoni van Leeuwenhoek(1632-1723) 1723)Delft, Hollanda

AFMAtomik KuvvetMikroskopu

Nanostructure and nanomechanicsanalysis of lymphocyte using AFM: Fromresting, activated to apoptosisM. Hu et al. / Journal of Biomechanics 42 (2009) 1513–1519

CD69-FITC (FL-2)CD3-PE (FL-1)Balb-c LNCM. Hu et al. / Journal of Biomechanics42 (2009) 1513–1519

PI (FL2)Annexin V-FITC (FL1)Balb-c LNC

RestingAktiveApoptozis

Contact Mode AFM

Merak edenler için ev ödevi

Immune synapse formation determines interactionforces between T cells and antigen-presenting cellsmeasured by atomic force microscopyBabak H. Hosseinia et al.PNAS October20, 2009 vol. 106 no. 42, 17852–17857

‘’If at first the idea is notabsurd, then there is no hope forit."A. Einstein

Ağı nereye atacağınızı bilmeniz dileğiyle

TEŞEKKÜRLER