CD19 eksikliği - Frame

P.O. Number Terms Rep Ship Via F.O.B. Project 

Quantity Item Code Description Price Each Amount 

B LENFOSİT KORESEPTÖR 

EKSİKLİKLERİ 

Dr. İsmail Reisli 

Selçuk Üniversitesi Meram Tıp Fakültesi 

Çocuk İmmünoloji ve Allerji Bilim Dalı 

Total

B LENFOSİT KORESEPTÖRLERİ 

CD19 

CD21 

CD81 (TAPA-1) 

CD225 (Leu-13) 

B lenfosit yanıtının 

şiddetini düzenler 

B lenfosit koreseptörlerinden birinin eksikliği 

bir immün yetmezliğe neden olur mu

OLGU SUNUMU 

Ş. K. 10 yaşında kız 

Mart 2002’de son 7 ayda aralıklı olarak idrarından kan 

gelmesi yakınması ile başvuru 

1 yaşından sonra sık aralıklarla ASYE 

7 yaşında orta kulak iltihabı + yüz felci 

8 yaşında menenjit

Aile Hikayesi 

Kardeşler 

13 yaşında sağlıklı kız 

5 yaş sağlıklı kız 

2 aylık ikiz düşük, biri kız biri erkek 

Anne 36 yaşında sağlıklı 

Baba 38 yaşında sağlıklı

AİLENİN KAYNAR SOY FAMILY AĞACI 

IV 

III 

II 

Anne Zadife 

2.derece 

yeğen evliliği 

Mustafa 

Baba 

I 

OLGU 

Sefika 

Kardeş Rukiye 

Kardeş Halime

Fizik Muayene 

Boy: 140 cm (%50) 

VA: 27 kg (%10-25) 

Tonsiller hipoplazik 

İnguinal mikroLAP, servikal 1x1 cm LAP 

Sağ akciğer bazalinde ronküs

Tam kan sayımı ve Kan Biokimyası normal 

Laboratuvar Tetkikleri 

Total protein: 6,8 mg/dl, alb: 3,9 g/dl 

Hematüri için yapılan tetkiklerinde; 

C3:99 mg/dl 

C4: 29 mg/dl 

ANA (-) 

Ca/Cre: 0,2 

USG: Normal 

PPD: 12 mm (2 BCG) 

İdrar ve balgamda ARB(-) 

İdrar kültürü: üreme yok 

Tbc-kültür: üreme yok 

Böbrek biyopsisi: 

Post infeksiyoz glomerülonefritle uyumlu

Klinik Öykü 

• Kız 

• Tanı yaşı: 10 yıl 

• Tekrarlayan akciğer enfeksiyonları 

• Akraba evliliği 

OLGU 

• Serum Ig düzeyleri: 

10 yaş +6 gün +43 gün 

IgM (54-392 mg/dl) 25 39 30 

IgA (62-390 mg/dl) 292 459 267 

IgG (842-1943 mg/dl) 325 494 460 

IgE (0-100 IU/ml) 37 23 17

B hücrelerinin CD19/CD20 ekspresyonları 

Sağlıklı 

kontrol 

CD20 

CD20 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD19 APC 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD19 PE 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD19 FITC 

CD19 (SJ25C1) CD19 (4G7) CD19 (HIB19) 

Olgu 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD19 APC 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD19 PE 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD19 FITC 

CD19 (SJ25C1) CD19 (4G7) CD19 (HIB19)

B-HÜCRE FARKLILAŞMASI 

Kemik İliği 

Periferik kan 

Pro-B Pre-B-I Pre-B-II Immatur B Mature B 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 

TdT 

TdT 

ψL 

TdT 

ψL 

ψL 

Igµ 

Igµ 

PreBCR+ PreBCR- sIgM SIgM/IgD 

CD22 CD22 CD22 CD22 CD22 CD22 CD22 CD22 CD22 

CyCD79a CyCD79a CyCD79a CyCD79a CyCD79a CyCD79a CyCD79a CyCD79a 

CD19 CD19 CD19 CD19 CD19 CD19 

CD34 CD34 CD34 CD34 CD34 

CD10bright CD10 CD10 CD10 CD10 

CD20 CD20 CD20

CD19 MOLEKÜLÜ 

Ig1 

Ig2 

TM 

Sitoplazmik 

domain 

y 

y 

y 

y 

y 

y y y y 

Gen: 16p11.2 = 7.5 kb 

15 exon 

Protein: 556 aa 

Van Noesel CJ et al. (1993) Immunol Today 14:8-11 

TedderTF et al (1989). J Immunol 143:712-7

y 

y 

y 

y 

y 

y y 

y y 


Van Noesel CJ et al. (1993) Immunol Today 14:8-11

Antigen 

C3d 


CD21 

CD81 

CD225 (Leu-13) 

y 

y 

y 

y 

y 

y y y y 

B-hücre 

Reseptörü 

CD19-kompleksi 


Olgunun CD19 geninde saptanan mutasyon 

1 6 

15 

Ig1 Ig2 TM Sitoplazmik domain 

~ 1 kb 

L V L R R K R K R M T D P T R 

..ctggtcctgaggaggaaaagaaagcgaatgactgaccccaccagg... 

..ctggtcctgaggaggaaaagaaaagcgaatgactgaccccaccagg.. 

L V L R R K R K A N D * 

320 328 

Normal 

Olgu 

N- -C 

y 

y 

y 

y 

y 

y y 

y 

y

Ailenin mutasyon analizi 

• Baba 40 y; Taşıyıcı 

• Anne 37 y; Taşıyıcı 

• 1.Kardeş 13 y; Kız, Sağlıklı 

• Olgu 11 y; Olgu 

• 2.Kardeş 6y; Kız, Taşıyıcı

Aile ağacı 

IV 

III 

II 

I 

Anne 

Baba 

Kardeş 

Olgu 

Kardeş

Olgunun Kemik iliğinde öncül B-hücre farklılaşması normaldi 

Patient 

(10y11m) 

Healthy children 

(4y11m-15y9m) 

n=5 

0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% 

Pro-B 

Pre-B-I 

Pre-B-II 

Immature 

(CD22+; CD19-; CD10-) 

(CD19+; CD10+; cyIgM-) 

(cyIgM+) 

(smIgM+) 

Dept. of Immunology, Erasmus MC, Rotterdam

CD19 kompleksinin ekspresyonu: 

CD21 EKSPRESYONU DÜŞÜK BULUNDU 

CD20 + 

lenfositler 

CD19 (SJ25C1) 

Isotype control 

Patient 

Sibling 1 

Sibling 2 

CD21 (LB21) 

Isotype control 

Patient 

Mother 

Unrelated Control 

CD81 ve CD225 ekspresyonu değişmiyor 


Olgunun Bellek B-hücreleri azalmıştı 

Patient 

S.Kaynar/LWPB/150503.006 

91 3 

Sibling 2 

67 8 

4 2 

10 15 

CD20 + lenfositler kapısında 

• CD27 + hücreler 

• IgD + hücreler 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD27 FITC 

CD27 FITC 

Sibling 1 

R.Kaynar/LWPB/150503.006 

82 9 

4 5 

Healthy donor 

HD7/PB/21103.003 

75 13 

3 9 

IgD 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD27 FITC 

CD27 (LT27) 

10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 

CD27 FITC 


Periferik kanda Poliklonal B-hücre populasyonu normaldi 

IGH gen yeniden düzenlenmesi normaldi 

V H 3-J H cons 

Patient PB-MNC 

V D J 

Control PB-MNC 

Tonsil MNC 


BCR bağımlı Ca 2+ akımı yetersizdi 

Akan hücre ölçerde CD20 + lenfosit kapısında ölçüm 

700 

Ratio: FL5-A/FL4-A 

500 

300 

IgM 

Ionomycin 

Olgu 

Ca 2+ oranı 

Ratio: FL5-A/FL4-A 

100 

0 200 400 600 800 

700 

500 

300 

Ionomycin 

IgM 

Sağlıklı kontrol 

100 

0 200 400 600 800 1000 

Time 

Zaman (s) 


Uyarıya yetersiz proliferasyon yanıtı 

Relative profileration 

500 30 30 

450 

Sac 

(S. aureus Cowan I) 

25 

400 

350 

20 

300 

250 

15 

200 

10 

150 

100 

5 

50 

anti-IgM 

F(Ab’) 2 

48hr 

72hr 

0 

0 

S FM Z Co Pat 

S MF 

MZ HD-6 

Co 

Pat M HD-6 


Human CD19 Deficiency Leads to Dysgammaglobulinemia 

• Menno C. van Zelm, I. Reisli, B.H. Barendregt, S. de Bruin-Versteeg, 

J.J.M. van Dongen, and M. van der Burg 

• Dutch Society for Immunology WinterMeeting 2003 

A family with three CD19-deficient members was reported in an abstract 

by Castano et al. 

Clin Immunol 2005. 115:S29

CD19 EKSİKLİĞİ SAPTANAN 

4 OLGUNUN ÖZELLİKLERİ 

van Zelm M, Reisli I. et al. N Engl J Med 2006;354:1901-1912

CD19 EKSİKLİĞİ SAPTANAN 4 OLGUNUN 

GEN MUTASYONLARI

İki ailenin Homozigot CD19 mutasyonu 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 – 12 13 14 15 

Ig1 

Ig2 

TM 

Cytoplasmic domains 

~ 1 kb 

R K R K R M T D 

E S Y E N E D 

wild-type 

..aggaaaagaaagcgaatgactgac.. 

..gagtcttatga gaacgaggatga. 

..aggaaaagaaa agcgaatgactgac. 

..gagtcttatgaacgaggatga... 

patient 

R K R K A N D * 

E S Y E R G * 

320 325 

325 328 

460 465 

CD19 mutation in family A: 972ins(a) CD19 mutation in family B: 1384del(ga) 

van ZelmM.C. M, Reisli van I. Zelm et al. N et Engl al., J manuscript Med 2006;354:1901-1912 submitted.

CD19 EKSİKLİĞİ 

SAPTANAN 

4 OLGUNUN B HÜCRE 

BELİRTEÇLERİ 

CD5+ hücreler: % 8-12 ↓ 

Sağlıklı kontrol: % 19-41 

CD27+ hücreler: %1-6 ↓ 

Sağlıklı kontrol: %17-28 

van Zelm M, Reisli I. et al. 

N Engl J Med 2006;354:1901-1912

CD 19 GEN DEFEKTİ SAPTANAN OLGULARIN 

CD21 EKSPRESYONLARI DÜŞÜKTÜ 

Family A 

Family B 

counts 

control 

carrier 

patient 

isotype 

control 

carrier 

patient 

isotype 


Family A 

Family B 

carrier 

control 

control 

carrier 

patient 

isotype 

CD21 

patient 

isotype 

M.C. van Zelm et al., manuscript submitted. 

van Zelm M, Reisli I. et al. N Engl J Med 2006;354:1901-1912

OLGULARIN GERMİNAL MERKEZLERİ 

patient A1 

patient B1 

H&E 

staining 

H&E (4x) 

CD79a 

CD79a 

CD21 

BCL-2 

BCL-2 

BCL-6 

Ki-67 

Ki-67 

M.C. van Zelm et al., manuscript submitted. 

van Zelm M, ReisliI. et al. N Engl J Med 2006;354:1901-1912

CD19 EKSİKLİĞİNDE yetersiz Calcium akımı 

control 

anti-IgM 

initial Ca 2+ influx 

ionomycin 

0 200 400 600 800 

patient A1 

Ca 2+ Ratio 

anti-IgM 

absence of 

initial Ca 2+ influx 

ionomycin 

0 200 400 600 800 

patient B3 

delayed initial 

Ca 2+ influx 

ionomycin 

anti-IgM 

0 200 400 600 800 

Time (seconds) 

van Zelm M.C. M, van Reisli Zelm I. et al. et N al., Engl manuscript J Med 2006;354:1901-1912 

submitted.

CD19 EKSİKLİĞİNDE Rabies AŞISINA YETERSİZ YANIT 

IU/ml 

100 

10 

1 

0.1 

0.01 

0 1 2 4 13 14 17 

Avidity Index (M NaSCN) 

1.50 

1.25 

1 

0.75 

0.5 

012 4 1314 17 

weeks following immunization 

weeks following immunization 

van Zelm M, Reisli I. et al. N Engl J Med 2006;354:1901-1912 

M. van Zelm et al., manuscript submitted.

CD19 molekül eksikliğinin sonuçları nelerdir 

• Kemik iliğinde normal B-hücre farklılaşması 

• Periferik kanda normal sayıda B hücreleri 

• Periferik kanda normal BCR repertuarı 

• BCR aracılı uyarının yetersizliği 

• Antijen uyarısına yetersiz proliferasyon yanıtı 

• Periferik kanda azalmış bellek B hücre kompartmanı 

Hipogammaglobulinemi 

Antijen spesifik antikor yanıtının yetersizliği

B hücre gelişiminde bir defekt: CD19 eksikliği 

Kemik iliği Periferik kan 

IgM 

Ag 

IgG 

CD19 – 

CD19 + 

cyIgµ + IgM IgD IgM 

IgA 

Pro-B Pre-B-I Pre-B-II immature mature 

IgE 

CD19 eksikliği 

immünglobulin sınıf dönüşümü 

Ig gen yeniden düzenlenmesi 

SHM 


Antikor eksikliklerinde tanımlanmış gen bozuklukları 

Antikor eksikliği 

Agammaglobulinemi 

(Periferik kanda B hücre 

yokluğu) 

Hyper-IgM 

(Periferik kanda normal 

sayıda B hücreleri) 

Ortak 

Yaygın değişken İmmün Yetmezlik 

Gen mutasyonu 

BTK 

IGHM 

CD79A 

CD179B (L14.1) 

BLNK (SLP-65) 

CD40L 

AID 

CD40 

UNG 

TACI 

ICOS 

BAFF-R 

CD19

OLGU 

• 8 yaşında erkek olgu 

• Akraba evliliği yok, ailede immün yetmezlik öyküsü yok 

• 5 yaşında pyelonefrit, bronşit, gastrit ile başvuru 

• Hipogammaglobulinemi 

• IgG: 249 mg/dl 

• IgA: 10 mg/dl Yaygın değişken 

• IgM: 18mg/dl immün yetmezlik 

• IgE: 9 IU/ml 

Kızamık‚ kızamıkçık,tetanoz, boğmaca antikorları: negatif 

Trombositopeni

Kontrol Hasta Anne 

CD19

Hastanın sınıf dönüşümlü bellek B lenfositleri 

(IgD-CD27+) normalden düşük bulundu

Hastanın V H 5-Cm transkriptleri somatik 

hipermutasyonların oluştuğunu gösteriyordu 

Somatik hipermutasyon sıklığı: 

%0.94 

Normal: %1.8±0.4 

Kordon hanı: %0.07±0.01 

Antijen spesifik BCR 

Repertuarı NORMAL

Anne taşıyıcı 

Baba taşıyıcı değil 

Hipotezler: 

1.De novo 

2.Büyük delesyon

KONTROL 

HASTA 


Kromozom 16 

spesifik D16Z3 prob 

ATP2A1 

CD19, ATP2A1 

ve NFATC2IP 

spesifik problar 

NFATC2IP


Bildirilen 4 olgu ile: 

• Hayatın ilk yıllarında semptomların başlaması 

• Hipogammaglobulinemi 

• Aşılamaya yetersiz antikor yanıtı 

• Normal sayıda periferik B lenfositleri 

• Bellek B lenfositlerinde azalma 

Beşinci CD19 eksikliği olgusu: 

van Zelm M, Reisli I. et al. N Engl J Med 2006;354:1901-1912 

•Compound heterozigot iki mutasyonun CD19 eksikliğine yol açtığının 

gösterilmesi 

•Otoimmün hastalık gelişimi 

Kanegane G et al. Genes and Immunity 2007

EYLÜL-2007 

R.K. 12 yaş E 

ŞİKAYET: Nefes darlığı‚ öksürük, balgam 

• 6 aylıktan sonra tekrarlayan ASYE 

• Anne ve baba akraba‚ 3. çocuk 

• Vücut ağırlığı: 30 kg (

OLGU 

Klinik Öykü 

• Erkek 


• Tekrarlayan akciğer enfeksiyonları‚ kronik otit 


12 yaş +10 gün 

IgM (54-392 mg/dl) 59 54 

IgA (62-390 mg/dl) 1 6 

IgG (842-1943 mg/dl) 91 156 

IgE (0-100 IU/ml) 1 19

Periferik kan B lenfosit yüzey belirteçleri 

(CD19, CD21, CD22 ve CD23)

Olgu-2’nin CD19 geninde saptanan mutasyon 

1 6 

15 

Ig1 Ig2 TM Sitoplazmik domain 

~ 1 kb 

L V L R R K R K R M T D P T R 

..ctggtcctgaggaggaaaagaaagcgaatgactgaccccaccagg... 

..ctggtcctgaggaggaaaagaaaagcgaatgactgaccccaccagg.. 

L V L R R K R K A N D * 

320 328 

Normal 

Olgu 

N- -C 

y 

y 

y 

y 

y 

y y 

y 

y

CD19 EKSİKLİĞİ

OLGU-2 nin Kİ B hücre farklılaşmasında hafif bir blok saptandı 

Composition of bone marrow precursor B-cell compartment 

(corrected for blood contamination) 

Average 10-20y (n=14) 

İlk olgu 

Average 10-20y (n=14) 

2.olgu 

ID558 

0% 20% 40% 60% 80% 100% 

Pro-B cell (stage 1) CD22+/CD79- Pro-B cell (stage 2) CD22+/CD79+ Pro-B cell (stage 3) CD79+/TdT+ Pre-B-I cell (stage 4) CyIgM-/CD10++ 

Pre-B-I cell (stage 5) CyIgM-/CD10+ Pre-B-II cell (stage 6) CyIgM+/VpreB+ Pre-B-II cell (stage 7) CyIgM+/VpreB- Immature B cell (stage 8) SmIgM+/SmIgD-


B-hücre farklılaşması 

• Kemik iliğinde normal (olgu-1) 

veya hafif blok olabilir (olgu-2) 

B hücreleri 

• Periferik kanda normal (olgu-1) 

veya düşük (olgu-2)

AYNI KÖYDEN 2 CD19 EKSİKLİĞİ OLGUSU 

• Başka CD19 eksikliği olguları olabilir mi 

• Taşıyıcılar saptanabilir mi 

• Taşıyıcıların özellikleri daha ayrıntılı belirlenebilir 

mi 

• Köy taraması yapılabilir mi

CD19 EKSİKLİĞİ SAPTANAN OLGULARIN KÖYÜ 

150 HANEDE 900 KİŞİ YAŞIYOR 

400 ÇOCUK MEVCUT

Heterozigot taşıyıcılarda CD19 MFI değeri < 60 

Taramada 20 olguda (15 çocuk ve 5 yetişkin) CD19 MFI değeri < 60 

Bu 20 olgunun CD21 MFI değeri de diğer akrabalardan düşük bulundu

AKIMSİTOMETRİK ÖN DEĞERLENDİRMEDE 

TAŞIYICI OLABİLECEK EN AZ 20 BİREY VAR 

• Başka taşıyıcılar olabilir 

• Taşıyıcılar kesin olarak belirlenmeli 

• Mutasyon analizi, B lenfosit sayısal ve fonksiyonel 

çalışmaları yapılmalı 

• Genetik danışım verilmeli

KAN ÖRNEĞİ ALINACAK AİLE BİREYLERİ 

BELİRLENDİ 

• 96 kan örneği 

• 47 çocuk ve 49 yetişkin 

• 30 taşıyıcı 

• Heterozigot taşıyıcılık: %31 

• 15 çocuk ve 15 yetişkin 

• Yaş ve cinsiyet farkı saptanmadı

CD19 TAŞIYICILIĞI SAPTANAN BİREYLER 

• Tam kan sayımları, T, B ve NK hücre oranları normal

HETEROZİGOT CD19 TAŞIYICILIĞI 

-Klinik olarak immün yetmezlik yapmıyor 

-CD19 ve CD21 ekspresyonları 1.3 kat azalıyor 

-CD5+ B lenfositler ve transisyonel B lenfositler azalıyor (p>0.05) 

-Bellek B lenfositleri, serum immünglobulin düzeyleri, somatik 

hipermutasyonlar ve spesifik antikor yanıtları normal 

-Otoimmünite bulguları olmuyor



CD21 

CD81 (TAPA-1) 

CD225 (Leu-13) 




bir immün yetmezliğe neden olur

• 6 yaşında kız hasta (Fas) 

• Tekrarlayan solunum yolu enfeksiyonları (2 yaşına kadar) 

• 3,5 yaşında glomerülonefrit (proteinüri ve hematüri) ve HSP 

• Steroid, siklofosfamid, mikofenolat mofetil, azotiopürin 

• Renal transplantasyon gerektirecek böbrek yetmezliği (4 yıl içinde) 

• Tekrarlayan trombositopeni atakları (antitrombosit antikor)

OLGU 

Kız, Fas kökenli, Belçika’da yaşıyor 


• Tekrarlayan akciğer enfeksiyonları, Böbrek yetmezliği ile sonlanan HSP 

• Trombositopeni atakları 

• Akraba evliliği 


6 yaş 

IgM (54-392 mg/dl) 90 

IgA (62-390 mg/dl) 170 

IgG (842-1943 mg/dl) 240 

IgE (0-100 IU/ml) 37 

• Aşılamaya tetanoz ve pnömokok antikor yanıtı: negatif 

• Anti-B titresi: 1/4

Olgunun bellek B lenfositleri düşük

CD19 ekspresyonu izlenmiyor 

CD19 gen defekti de saptanamıyor


CD21 

CD81 

Leu-13 

y 

y 

y 

y 

y 

y y y y 



CD81 ekspresyonu izlenmiyor

CD81 molekül eksikliğinin sonuçları nelerdir 

• Kemik iliğinde normal B-hücre farklılaşması 

• Periferik kanda normal sayıda B hücreleri 

• Periferik kanda normal BCR repertuarı 

• BCR aracılı uyarının yetersizliği 

• Antijen uyarısına yetersiz proliferasyon yanıtı 

• Periferik kanda azalmış bellek B hücre kompartmanı 


Antijen spesifik antikor yanıtının yetersizliği

Dual antigen tanıma 


CD21 

CD81 

Leu-13 

y 

y 

y 

y 

y 

y y y y 



CD21 EKSİKLİĞİ 

28 yaşında erkek 

Akraba evliliği yok 

Tekrarlayan ÜSYE 

Myalji - Diyare 


IgG: 360 mg/dl (700-1600) 

IgA: 54 mg/dl (70-400) 

IgM: 70 mg/dl (40-230) 

Mature B hücreleri var 

B hücrelerinde CD21 ekspresyonu yok 

Bellek B hücreleri azalmış 

Aşı yanıtları normal 

Rump JA. XII Meeting of the ESID. 4-7 October 2006



CD21 

CD81 (TAPA-1) 

CD225 (Leu-13) 




bir immün yetmezliğe neden olmaktadır

Teşekkür 

• Dept. of Immunology, Erasmus MC 

• Menno van Zelm 

• Barbara H. Barendregt 

• Sandra de Bruin 

• Dr. Mirjam van der Burg 

• Prof. Jacques J.M. van Dongen 

• Dept. Of Pediatrics, Leiden University 

• Maarten J.D. Van Tol 

• Dept.of Pathology,Amsterdam 

• Carel J.M.van Noesel 

• University of Freiburg 

• Bodo Grimbacher 

• Cristina Woellner

CD19 eksikliği - Frame

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?