kırkağaç araştırmaları sempozyumu bildirileri - Kırkağaç Kaymakamlığı

ml’ye tamamlandı ve filtre edildi ve titrasyon yapılmıştır. Vitamin C içeriği, mg vitC /kg taze
kavun hesaplanmıştır.
2.3.7.Meyve Kısmında Beta Karoten Analizi
Beta karoten analizi [27,28]’e göre modifiye edilerek belirlenmiştir. 20 g kavun meyve kısmı,
5 ml aseton ile ve 5 ml sonra acetone–petroleum ether (20:80;v/v), muamele
edilmiştir.Filtrasyon sonrası (Whatman 42), 35 °C’de rotary evaporasyon gerçekleştirilmiştir.
Kalıntı solvent, N2 atmosferinde uçurulmuştur, ve 2 ml petrol eteri ile muamele edilmiştir.
Beta Karoten (Sigma) ANA stok ve and standard çalışma çözeltileri ile numune çözeltileri
450 nm’de spektrofotometrik olarak ölçümlenmiştir. Beta karoten içeriği, mg β-karoten /kg
taze kavun hesaplanmıştır.
2.3.8.Çekirdeklerde Toplam Lipid (Yağ) Miktarı Tayini ve Yağ Asitleri Analizi
Lipid tayini [22,24]’e göre yapıldı. Kurutulmuş ve N 2 (azot) verilmiş kavun çekirdekleri,
çelik blenderde (Warrington) homojenize edildi ve 5 g numune ayrımlandı, 15 mL’lik test
tüpüne alınarak metanol/ kloroform[4/2 (v/v)] ilavesiyle 10 dk süresince vortekslendi.
Çözeltiye 2/1 (v/v) oranında metanol/ kloroform eklendi, 25 ° C de 10 dk süreyle ultrasonik
banyoda bekletildi. Tüpler, tekrar 2 dk vortekslenip ve 4000 devir/dak.’da 15 dak süresince
santrifüj edildi. Metanol içeren üst faz, pastör pipeti ile uzaklaştırıldı, kloroform+ekstrakte
lipidleri oluşturan alt fazlar birleştirildi. Ardıl eluatlar toplanıp kantitatif miktarı belirlendikten
sonra son filtrat, döner vakumlu buharlaştırıcıda (rotary evaporatör) (Heidolp,
EssLab,Essex,UK) 40 ° C’de konsantre edilerek kuruluğa değin N 2 atmosferinde çözgeni
buharlaştırıldı. Elde edilen toplam yağ, gravimetrik olarak (balon+dara) tartımlandı [22].
Metod validasyonu gerçekleştirildi [y= 2,82 x + 4,73 (R²=0.9988)].
Çekirdeklerde, yağ asitleri metal esterleri (YAME) analizi, ekstrakte lipidlerin %14
Bortriflorür ile muamelesi ile BF3-metanol kompleksi oluşturularak [29]’a göre
gerçekleştirilmiştir. Yağ asidi metal esterleri 100m (0.20 µm film kalınlıklı) 0.25 mm WCOT
fused*silica SP-2560 kapiler GC kolonu kullanımı ile FID (Alev iyonlaşma dedektörü)
kullanılarak, Gaz Kromatografında (GC) (HP-5890 GC) analizlenmiştir. Operasyon koşulları
olarak, 170 ° C başlangıç sıcaklığı, dk.da 1 ° C’lik artışlarla 210 ° C’ye ulaşan sıcaklık programı
uygulanmıştır.Enjektör ve dedektör sıcaklığı 250’şer ° C olarak adapte edilmiştir.Taşıyıcı gaz
hidrojen olarak kullanılmış olup akış hızı 1.5 ml/dk olarak set edilmiştir ve split oranı 33:1
olarak ayarlanmıştır. Kavun çekirdeği yağ asitleri metil esterleri numunesi 2 mikrolitre olarak
enjekte edilmiştir ve üç tekrarlı çalışma yapılmıştır. Alıkonma zamanları (R.T.), YAME saf
standard karışımımızla (Sigma) karşılaştırılarak ve çekirdek yağı içeriğindeki bireysel yağ
asitlerinin yüzdesel düzeyleri belirlenmiştir.Yağ asidleri standardları lineer kalibrasyon
vermiştir (R 2 =0.9998)
2.3.9.Çekirdeklerde Protein Tayini Kurutulmuş ve N
2
(azot) verilmiş kavun
çekirdekleri, çelik blenderde (Warrington) homojenize edildi ve 5 g numune ayrımlandı.
AOCS [22]’ye göre numunedeki % protein miktarı, Kjeldahl yöntemine göre tayin edilmiştir.
“Gerhardt” yakma aparatı,“Gerhardt Vapodest 20” distilasyon aparatı ile işlem sonrası,
protein miktarı % azot olarak belirlenmiştir ve ×6,25 ile çarpılarak protein yüzdeleri
belirlenmiştir [22].
2.3.10.Meyve Kısmında ve Çekirdeklerde Toplam Fenolik Madde Analizi
Toplam fenolik madde miktarı, Folin-Ciocalteu çözeltisi kullanımı ile Folin-Ciocalteu
metoduna göre [25] belirlendi. 20 g kavun meyve kısmı (5 g çekirdek numunesi) üzerine %1
HCl içeren % 80’lik metanol çözeltisinden 5 ml ilave edildi, 4 ± 1
° C sıcaklıkta (buz
banyosunda) 2 saat boyunca karıştırıldı. 4000×g’de 15 dakika süreyle santrifüj edildi. Berrak
kısım fenolik bilesiklerin belirlenmesi için ayrıldı. Folin-Ciocalteu kimyasalı ve distile su ile
0.5/ 0.5 /10 (h/h/h) oranlarında karıştırılarak bekletildi. Çözelti karışımına %7’lik
sodyumkarbonat (Na 2 CO 3 ) ilave edildi. 2 sa inkübe edildi ve oluşan mavimsi-mor renkli
10