24.09.2013 Views

Deneysel Hayvan Araştırmalarının Planlamasında ... - jcam.com.tr

Deneysel Hayvan Araştırmalarının Planlamasında ... - jcam.com.tr

Deneysel Hayvan Araştırmalarının Planlamasında ... - jcam.com.tr

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Journal of Clinical and Analytical Medicine ·<br />

Araştırma, az bilineni ya da bilinmeyeni tam bilinen yapma<br />

çabasıdır. Sağlık alanındaki araştırmalarda amaç; sağlıklı<br />

organizmayı ve hastalığı anlayabilmek, korumak veya tedavi<br />

için güvenli ve etkili yollar üretebilmektir. Bu amaçla sağlık<br />

alanında, çeşitli araştırma yöntemleri veya deneysel çalışmalar<br />

yapılmaktadır: Hücre kültürleri (in vi<strong>tr</strong>o), hayvan deneyleri<br />

(in vivo) ve klinik araştırmalar bu kategoride sayılabilir.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> araştırmalar; bir varsayımın doğruluk durumunu<br />

denemek ya da kanıtlamak için, kon<strong>tr</strong>ol edilebilir şartlar altında,<br />

özgül yöntemler kullanılarak ölçme işlemlerinin yapılmasına<br />

dayanan, geçerli ve güvenilir verilerin üretildiği bilimsel<br />

araştırma yöntemleridir. <s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> hayvan araştırmaları<br />

ise, bilimsel bilgi elde etmek amacı ile omurgalı veya<br />

omurgasız hayvanlar üzerinde yapılan/yapılacak çalışmaları<br />

ifade etmektedir. Deney hayvanları çok çeşitli alanlarda kullanılmakla<br />

birlikte en fazla; sağlık bilimleri alanında, aşılar,<br />

ilaçlar ve tıbbi malzemelerle ilgili çok sayıda biyolojik testlerde<br />

kullanılmaktadır.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> hayvan araştırmalarının planlamasında şu hususlara<br />

dikkat edilmelidir:<br />

1. Araştırma Konusunun Belirlenmesi:<br />

Araştırma konusu belirlenirken; kurumun olanakları, hedefleri<br />

ve araştırmacının ilgisi belirleyici olmaktadır. İlk önce<br />

araştırmaya dayanak teşkil edecek problem belirlenmeli ve<br />

hedefler tanımlanmalıdır. Bunun için araştırma ile ilgili bilgiler<br />

toplanır, yayınlanmış veriler incelenir ve hala tamamen<br />

çözülmeyen/anlaşılmayan problemler esas alınır. Daha sonra<br />

bu bilgilere dayanarak varsayım/lar geliştirilir.<br />

Belirlenmiş veya geliştirilmiş bilimsel problemin yeniden ifade<br />

edilmesi, sorunun nedenini/etkisini açık ve anlaşılabilir<br />

şekilde ifade edilmesini sağlayacaktır. Bunun için;<br />

…………’nin üzerine………..’nin etkisi nedir? gibi bir kalıp cümle<br />

ile problem tanımlanabilir.<br />

İlk önce bu problemi basit bir cümle içinde ifade etmek gerekir.<br />

Problem ifade edildikten sonra değiştirebileceğimiz faktör<br />

(neden) ve etkilenebilecek faktörler (etkiler) tanımlanır.<br />

Daha sonra yukarıdaki örnekteki boşluklara; birincisine etkileri<br />

ve ikincisine nedeni koyunuz. Böylelikle araştırmada<br />

problem tanımlanmış olacaktır. Örneğin;<br />

• Problem: Kafes tasarımı laboratuvar sıçanının fizyolojik<br />

fonksiyonlarını etkilediğini göstermektedir.<br />

• Problemin yeniden ifadesi: Sıçanların vital fonksiyonları<br />

üzerine saydam kafesin etkisi nedir?<br />

• Bağımsız değişken (değiştirebileceğimiz faktör, etken): • •<br />

1 | Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

Ensari Güneli, Mehmet Ateş, Mukaddes Gümüştekin<br />

Saydam kafes.<br />

• Bağımlı değişken (etkilenecek faktör/faktörler, sonuç): Vital<br />

fonksiyonlar.<br />

Yukarıda ifade edildiği gibi problem tanımlandıktan sonra,<br />

araştırmacı araştırma planını yazmaya hazır olmalıdır. Bu<br />

planlama bilimsel projedeki sorunu yanıtlamak için ne yapmamız<br />

ya da denememizi gösterecek şekilde tasarlanmalıdır.<br />

Bunun için desteğe ihtiyacınız olabilir. Bu amaçla danışabileceğiniz<br />

kişiler planlamanızı açık ve dikkatli bir şekilde<br />

yazmanıza yardımcı olabilir.<br />

2. Araştırma Protokolünün Hazırlanması:<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> hayvan araştırmaları maksimum düzeyde bilgi<br />

sağlayacak şekilde tasarlanmalıdır. İyi planlanmış bir deney<br />

en iyi sonuçları verecektir. Araştırmalarda sonuçların geçerliği<br />

ve güvenirliği birçok değişkene bağlı olarak değiştiği için,<br />

planlamanın iyi hesaplanmış ve kon<strong>tr</strong>ol edilmiş olması gerekir.<br />

Bu nedenle deneylerin planlanması esnasında biraz daha<br />

zaman ayırmak gerekir.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> bir araştırmanın hazırlanmasında çeşitli adımlar/<br />

aşamalar vardır. Bu adımlar şu bilgileri içermelidir:<br />

Açıklama: Sıralama ve içerikler proje başvuru biçimlerine<br />

göre değişebilir; bilgiler kısaca açıklanmıştır.<br />

• Problem: Bağımsız ve bağımlı değişkenlerle (neden ve etkilerle)<br />

problemin ifade edilmesidir.<br />

• Bağımsız değişken: Sonucu etkileyen ve etken (neden) olduğu<br />

düşünülen faktörlere denir.<br />

• Bağımlı değişken: Etkenlerden etkilendiği düşünülen ve sonuç<br />

olan değişkenlere denir. Diğer bir deyişle deneyde bizim<br />

değiştirdiğimiz değişkene (bağımsız değişkene) bağlı olarak<br />

değişen değişkendir.<br />

• Kon<strong>tr</strong>ol: Deneyde değişmeyeceğinden emin olduğumuz faktördür.<br />

• Nicel ölçümler: Sonuçların kaydında kullanabileceğimiz<br />

standart ölçüm birimleridir. Daha iyi, daha yüksek gibi ifadelerin<br />

kullanılması bilimsel değildir.<br />

• <s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> ve kon<strong>tr</strong>ol grupları: Bunlar deneydeki gruplardır.<br />

Kon<strong>tr</strong>ol grubunda tüm faktörler sabit tutulur, herhangi bir<br />

değişken yoktur. <s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> grupta değişken vardır. Deneylerde<br />

genellikle sadece bir kon<strong>tr</strong>ol grubu vardır, ancak bazı<br />

durumlarda deneysel gruptan daha fazla olabilir. <s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong><br />

gruptaki veriler kon<strong>tr</strong>ol grubundaki verilerle karşılaştırılır. Bu<br />

gruplardaki hayvan sayısının belirlenmesinde ve deneysel<br />

planlamada istatistiksel yardım almak oldukça fayda sağlayacaktır.<br />

• Gereçler: Deneyde kullanma ihtiyacı duyduğumuz araçgereçleri<br />

ve nerede kullanmamız gerekeceğini düşündüğünüz<br />

malzemelerin listesidir.<br />

• Yöntem (Prosedür): Deneyin akışı ayrıntılı ve adım-adım<br />

sistematik bir yöntemle, basit ve açık bir şekilde belirtilmeli-<br />

Sorumlu Yazar: Ensari Güneli, Dokuz Eylül Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Laboratuar <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ları Bilimi AD, 35340 Balçova, İzmir, Türkiye. T.: +90 2324124652 F.: +90 2322770739 E-Mail: ensari.guneli@deu.edu.<strong>tr</strong><br />

Journal of Clinical and Analytical Medicine 5


<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

dir. Örneğin, deneyde bir hayvan kullanılacaksa; hayvanın kökesaca açıklamak gerekirse;<br />

ni, türü-soyu, genetik ve mikrobiyolojik özellikleri (nomenklatür), Reduction: <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> sayısının azaltılmasıdır. Bu da araştırmalar-<br />

yaş, cinsiyet, vücut ağırlığı, barındırılması, beslenme şekli, madda en az sayıda hayvan kullanarak, en iyi sonuca varma ilkesini<br />

de uygulama yöntemi ve zamanı, biyolojik örneklerin alınma şek- ifade eder. Ancak çok az sayıda hayvanın kullanılması da uygun<br />

li ve zamanı, işlemden geçirilmesi, saklanması, model uygulan- değildir. Bundan dolayı hayvan sayısını belirlemekte kullanılan<br />

mışsa tekniği, anestezi, cerrahi ve ötenazi yöntemleri gibi konu- istatistiksel yöntemler için bu alanda uzmana danışmak gerelar<br />

eksiksiz belirtilmelidir. İstatistiksel yöntemler açıklanmalıdır. kir. Ön çalışma yapmak da hayvan sayısının belirlenmesine kat-<br />

• Hipotez: Beklenen sonuçların öngörülmesi, ifade edilmesidir. kı sağlayacaktır.<br />

Diğer bir şekilde, deneyinizle ne olacağını düşünüyorsunuz? Hi- Refinement: Araştırmada kullanılacak hayvanların yaşamlarıpotez<br />

istatistiksel olarak test edilebilir olmalıdır.<br />

nı uygun koşullarda sürdürmelerine izin verilmesidir. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>la-<br />

• Açıklama: Bu bölümde hipotez ile ne düşünüldüğü açıklanmarın doğumlarından, deneylerde kullanımlarının sonlandırılmasılıdır.na<br />

kadar geçen süreçte gönençlerini artırmak ve sağlamaktır.<br />

Tüm bölümler, konu dışından bir yabancı tarafından okunduğu İnsanlarda ağrıya neden olan işlemlerin, diğer omurgalılarda da<br />

zaman dahi anlaşılabilir olmalıdır.<br />

ağrıya neden olabileceği araştırmacılar tarafından bilinmeli ve<br />

unutulmamalıdır. Bundan dolayı hayvanlarda minimum düzeyde<br />

ağrı duyumsaması sağlanmalıdır.<br />

Replacement: Yerine başka bir şey koyma anlamına gelir. Mümkünse<br />

omurgalı hayvanlar yerine başka şeylerin kullanılması tercih<br />

edilmelidir (bkz, alternatif modeller). Araştırmalar planlanırken<br />

filogenetik sınıflandırmada daha yüksekte yer alan hayvanlar<br />

yerine daha aşağıdaki hayvanlar seçilmelidir.<br />

Responsibility: Bu ilke kısaca kişisel sorumluluğunun arttırılmasını<br />

öngörmektedir.<br />

3. Yeterlilik:<br />

Deney hayvanları ile araştırma yapacak sorumlu kişilerin bu<br />

alanda yeterli teorik ve uygulamalı eğitim almış olmaları gerekir.<br />

Bu kişiler; yasalar, etik, ilgili hayvanlarının bakım ve biyolojisini,<br />

gönençlerini (refah) ve fizyolojik ihtiyaçlarını, tutma yöntemlerini,<br />

temel uygulamalar ve ötenazi, hastalık, s<strong>tr</strong>es ve diğer<br />

olumsuz durumları bilme, anestezi, analjezi, temel cerrahi prensipler<br />

ve deney güvenliği gibi temel bilgi ve becerilere sahip olmalıdır.<br />

Birçok ülkede hayvan kullanımı ile ilgili yasal düzenlemeler,<br />

hükümetin kon<strong>tr</strong>olü altında yetkili kurumları tarafından yürürlüğe<br />

konup uygulanmaktadır.<br />

4. Alternatif yöntemler:<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> araştırma planlanırken ilk önce canlı hayvan kullanmak<br />

gerekliliği dikkatlice düşünülmelidir. Bir hayvan kullanılacaksa,<br />

mümkünse omurgalı hayvanlar yerine alternatif yöntemler tercih<br />

edilmelidir. Eğer canlı hayvan kullanılacaksa amacı bilimsel<br />

gerekçelerle açıklanmalıdır. Örneğin;<br />

• İncelenen süreçlerin karmaşıklığı nedeniyle daha basit sistemlerde<br />

oluşturulması ve model kurulmasının olanaksızlığı,<br />

• İncelenecek sistemin, canlı olmayan modellerde taklit edilebilmesi<br />

için yeterli bilgi birikiminin olmadığı,<br />

• Preklinik çalışmalarda, insan üzerinde denenmeden önce canlı<br />

hayvan üzerinde deney yapmanın zorunluluğu,<br />

• Ve diğer sebepler gibi açıklamalar yapılmalıdır.<br />

Alternatif yöntemleri kısaca ifade etmek gerekirse; hayvan deneylerinin<br />

yerine geçen, kullanılacak hayvan sayısını azaltan,<br />

hayvanların acısını azaltacak veya hayvanların gönencini artıracak<br />

uygulamalar olarak ifade edilmektedir. Örneğin; doku ve<br />

organ kültürleri, omurgasız hayvanların kullanılması, embriyonlu<br />

yumurtanın kullanılması, bir hücrelilerin kullanılması, bilgisayar<br />

ve veri bankalarının kullanılması, matematiksel yöntemler, gönüllü<br />

insan kullanımı ve epidemiyolojik çalışmalar, eğitimde yapay<br />

modellerin ve filmlerin kullanılması gibi.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> araştırmalarda hayvanlara alternatiflerin aranmasında<br />

Russell ve Burch tarafından tanımlanan 3R kuralı önemli katkı<br />

sağlamıştır. Bu üç ilkenin yanı sıra The International Foundation<br />

for Ethical Research (IFER) 1985 yılında hem hayvanlarda<br />

hem de insanlarda yapılacak araştırmalarda “Sorumluluk” ilkesini<br />

oluşturarak ilkeleri 4R biçiminde geliştirmiştir. Böylelikle<br />

bir araştırmacı deneysel araştırmasını planlarken 4R kuralına<br />

uymalıdır.<br />

‘‘4R’’ kuralı: İngilizce kelimeler olan; reduction, refinement, replacement<br />

ve responsibility kelimelerinin baş harfleridir. Bu kurallar<br />

hem hayvanların sağlığının korunması hem de bilimsel çalışmaların<br />

kalitesinin yükseltilmesini amaçlamaktadır. Sırasıyla kı-<br />

6 Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

2 | Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

5.<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> seçimi<br />

Deney materyalleri, araştırılacak konunun veya problemin en<br />

basit şekilde çözülebilmesine olanak verecek şekilde seçilmeli,<br />

yasal ve etik yönleri incelenmelidir. Günümüzde basit omurgalı<br />

hayvanlardan gelişmiş memeli hayvanlara kadar birçok hayvan<br />

türü deney materyali (denek) olarak kullanılmaktadır. Ancak,<br />

omurgasızların kullanımı oldukça sınırlı düzeylerde kalmaktadır.<br />

Son yıllarda bazı ilkel omurgalıların kullanımında artışlar olsa da,<br />

anatomik ve biyolojik fonksiyonları insana benzerliklerinden dolayı<br />

halen en fazla tercih edilenler memeli türleridir. Kullanımda<br />

üst grupları oluşturanları sınıflandırırsak, Dünya genelinde en<br />

fazla kullanılan deney hayvanlarının; sıçan, fare, balık ve tavşan,<br />

orta düzeyde kullanılanların ise domuz, kobay, hamster ve maymun<br />

olduğunu görürüz. Özellikle sıçan ve fare gibi küçük hayvanlar;<br />

yaşam sürelerinin kısalığı, kolay manipüle edilmeleri ve üretim<br />

kolaylığı gibi avantajlarından dolayı sık tercih edilirler. Bir<br />

dönem bazı alanlarda çok kullanılan kedi ve köpeklerin, yasalar<br />

gereği deneysel amaçlı kullanımı sınırlanmıştır. Bu hayvanlar, bu<br />

amaçla üretilmiş merkezlerde olmaları koşuluyla, deneye alınmalarına<br />

izin verilmektedir.<br />

Seçilecek hayvan hakkında bir karar verebilmek için aşağıdaki<br />

noktaları göz önünde bulundurmak gerekmektedir:<br />

a) Uygun bir hayvan seçmek için araştırmacı ilk önce ihtiyaç duyulan<br />

hayvan modelini belirlemelidir.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> Modeli; normal biyoloji ya da davranışların çalışılabileceği,<br />

kendiliğinden ya da indüklenmiş bir patolojik durumun<br />

araştırılabileceği ve biyolojik işlev yönünden insan ya da diğer<br />

hayvan türlerine benzerlik gösteren hayvanların kullanıldığı model<br />

olarak tanımlanır. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> modelleri her zaman gerçek durumu<br />

(hastalık, biyolojik gibi) tam olarak yansıtmaz, sadece yaklaşık<br />

bir sonuç-fikir verir. Diğer bir deyişle geniş anlamda, deneysel<br />

bilim yaklaşık bilgi edinme çalışmalarıdır.<br />

Bu modeller şunlardır:<br />

• İndüklenmiş model: Cerrahi ya da çeşitli ajanlarla hayvanlarda,<br />

hedef organizmada görülenlere benzer hastalık veya bozukluk<br />

oluşturulmasıdır. En fazla kullanılan modeldir. Örneğin, <strong>tr</strong>ansgenik<br />

fare üretimi, karbon te<strong>tr</strong>aklorür (CCl4) ile karaciğer yetmez-


<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

liği, s<strong>tr</strong>eptozotosin ile diyabetik sıçan oluşturmak gibi. Etiyolojisi<br />

bilinen hastalıklarda faydalı olmakla birlikte, hastalık birçok<br />

nedene ya da bilinmeyen faktörlere bağlı ise hayvanlarda bu tür<br />

hastalıkları taklit etmek zor olabilmektedir.<br />

• Spontan model: Genetik olarak kendiliğinden oluşan ve insanlardaki<br />

hastalığa benzer mekanizmalar gelişen modeldir. Örneğin,<br />

spontan diabetik kemirgen modellerindeki patoloji ve belirtiler<br />

insanlara benzer.<br />

• Negatif model: Belirli bir hastalığın kesinlikle gelişmediği hayvan<br />

türü, ırkı veya soylarıdır. Örneğin, tavşanda gonokok infeksiyonu<br />

gelişmez.<br />

• Olası modeller (Orphan modeller); Bazı hastalıklar öncelikle<br />

hayvanlarda tanımlanmış, daha sonra insanlarda benzeri tanımlanabilir<br />

amacı ile çalışılan modellerdir. Örneğin, marek ve deli<br />

dana hastalığı gibi. Eğer benzer bir hastalık insanlarda görülürse<br />

model adapte edilir.<br />

Araştırmanın planlamasında hangi modelin mümkün ve gerçekçi<br />

olduğu belirlenmelidir. Spesifik araştırma modellerini inceleyen<br />

çok sayıda kitap ve geniş bir hayvan modeli listesi vardır.<br />

Uygun bir model bulunmadığı zaman yeni bir modelin geliştirilmesi<br />

gerekebilir; ancak, yeni bir model geliştirmek oldukça zaman<br />

alıcı bir süreçtir.<br />

b) <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> türünün belirlenmesi için daha önce benzeri yapılan<br />

çalışmalar incelenmeli, literatür araştırması yapılmalıdır.<br />

Birçok araştırmacı hayvan seçimini daha önce yapılan benzer<br />

araştırmalarda kullanılmış hayvan türüne göre yapar. Daha önce<br />

elde edilen verilerle karşılaştırma yapmayı olanaklı kılan geniş<br />

veritabanları bulunması hayvan türünün belirlenmesinde avantaj<br />

sağlayacaktır. Özellikle fare ve sıçan gibi sık ve çok kullanılan<br />

laboratuvar hayvanları bu açıdan kolaylık sağlamaktadır. Ancak<br />

araştırmalarda kullanılan hayvan türü mevcut koşullarda bulunmayabilir<br />

veya temin edilse bile laboratuvar koşulları uygun<br />

olmayabilir. Bundan dolayı benzer hayvan modelinin diğer hayvan<br />

türlerinde uygun olup olmayacağı araştırılmalıdır. Çalışmalar<br />

için en uygun hayvanın seçiminin önemi ile ilgili en iyi örnek<br />

vasküler restenoz (damarın tekrar daralması) çalışmalarıdır. Domuz<br />

ve maymunda anjiyoplasti sonrası “restenoz” ile ilgili sonuçlar,<br />

küçük hayvanlardan elde edilen verilere kıyasla insandakine<br />

daha yakındır.<br />

c) Çalışmada kullanılacak gereçler için lojistik desteğin listesi<br />

hazırlanmalıdır.<br />

– <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> barınakları<br />

Barındırma; hayvanın gönencini, araştırma sonuçlarının kalitesini,<br />

personelin güvenliğini ve sağlığını etkiler. Günümüzde laboratuvar<br />

hayvanı üretimi yapan birçok kuruluşta, bazı hususlara<br />

gereksinim duyulmayabilir, ancak araştırmacının mevcut barınma<br />

ve bakım koşullarını bilmesi fayda sağlayacaktır. Unutulmamalıdır<br />

ki, hayvan üretim tesisleri optimum kalitenin altında olsa<br />

dahi, iyi eğitilmiş ve motive personelin hayvanların yaşam koşullarında<br />

yüksek kalite sağladığı bilinmektedir.<br />

Kafesler; hayvanların kaçmasına engel olacak şekilde muhafazalı<br />

ve boyutları türe uygun olmalıdır. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ın türüne ve yaşına<br />

göre rahat edeceği kafes alanı ve yüksekliği sağlamak zorunluluktur.<br />

Kafes içi değişiklikler hayvanların fizyolojik, metabolik işlevlerini<br />

değiştirebilir, hastalıklara duyarlılaştırabilir. Dolaysıyla,<br />

araştırmacı hayvanlarını kafeslerken; tür, suş, yavrulama, bireysel<br />

özellikler (cinsiyet, yaş, davranış, sağlık.), sosyal formu (tek<br />

veya grup şeklinde barındırma), barınacak alanın zenginliği gibi<br />

faktörlere dikkat etmelidir.<br />

Farklı bir merkezden veya kaynağı bilinmeyen bir üretim yerinden<br />

getirilen hayvanların, hastalık taşıyıp taşımadığı incelenmelidir.<br />

Bu amaçla araştırma yapılacak alanda hayvanların gözet-<br />

3<br />

| Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

lenmesine olanak sağlayacak karantina alanı bulunmalıdır.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ın bulunduğu ortamda hijyenik koşullar, havalandırma,<br />

ısı, nisbî nem, gürültü, ışık gibi barınma faktörleri türlere özgüleştirilmiş<br />

olmalıdır. Bu koşullara uygun davranılmadığı takdirde<br />

hem hayvanların sağlığı bozulacak, hem de deney sonuçları farklı<br />

olacaktır. Örneğin, havalandırma ve ısıtma sorunları ile hayvanlarda<br />

ciddi akciğer problemleri ortaya çıkabilir. Ayrıca farklı<br />

yerlerde yapılan benzer çalışma sonuçları da farklı olacaktır.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ların genellikle 30ºC ‘nin yukarısında ve 5 ºC nin altındaki<br />

sıcaklığa koruyucu mekanizmalar olmaksızın maruz kalması<br />

klinik etkiler yapabilir ve hayatı tehdit edebilir. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>lar davranışsal,<br />

fizyolojik ve morfolojik mekanizmalarla bu sapmalara<br />

uyum sağlayabilir. Fakat böyle adaptasyonlar zaman alır ve performansı<br />

etkileyebildiği gibi sonucu da değiştirebilir. Sıcaklık değişimleri<br />

hayvanların; ilaca yanıtını, infeksiyonlara olan duyarlılıklarını,<br />

üremesini, yem ve su tüketimini, büyümesini, hematolojik<br />

parame<strong>tr</strong>elerini,..değiştirir.<br />

Laboratuvar hayvanlarının çoğu albino oldukları için, aşırı ışık<br />

katarakt ve s<strong>tr</strong>es gelişmesine neden olabilir. Bu nedenle, albino<br />

hayvanların bulunduğu odaların ışıkları çok parlak olmamalıdır.<br />

Dikkat edilmesi gereken önemli koşullardan biri de hayvanların<br />

bulunduğu odalarda gürültü 85 dB’den düşük olmalıdır. Özellikle<br />

gebe ve yeni doğurmuş hayvanlar, gürültüden rahatsız olup yavrularına<br />

zarar verebilirler. Ayrıca gürültünün oluşturacağı s<strong>tr</strong>es<br />

faktörleri de deney sonuçlarını olumsuz etkileyebilir. Örneğin,<br />

sürekli s<strong>tr</strong>es altında kalan sıçanlarda böbreküstü bezi hiperplazisi<br />

saptanmıştır.<br />

İnsan, diğer türler, kafes içindeki türdeşler, koku, zemindeki materyaller<br />

gibi faktörler hayvanın durumunu etkiler. Bundan dolayı<br />

çevresel faktörler standart hale getirilmeli ve sabit tutulmalıdır.<br />

– Teknisyenler<br />

Teknisyenler deneysel bölümün konforlu, etkin gerçekleşmesinde<br />

önemli rol oynayan personellerdir. Bu kişilerin görevleri; hayvanlara<br />

karşı iyi davranma, kuralına uygun tutma, operasyona<br />

hazırlama, ilaç uygulama, vücut sıvılarını toplama, davranışlarını<br />

inceleme, anestezi uygulama, aseptik bir operasyona yardımcı<br />

olma gibi tanımlanmıştır. Örneğin, bir teknisyen herhangi bir<br />

ilaç uygulamadan önce; hayvanın ve ilacın doğruluğunu, ilacın<br />

dozunu, uygulama yolu ve zamanının doğruluğunu ve ilacın son<br />

kullanma tarihini kon<strong>tr</strong>ol etmelidir. Bunlardan kaynaklanacak bir<br />

hata hayvana zarar verebilir, yanlış sonuca neden olabilir. Eğer<br />

araştırmacı bu uygulamaları kendi yapacaksa kon<strong>tr</strong>olleri benzer<br />

şekilde yapmalıdır.<br />

– Maliyet<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ın boyutları küçüldükçe bakım ve satın alma maliyeti az<br />

olmaktadır. Operasyondan sonra hayvan uzun süre yaşatılacaksa<br />

bakım masrafları da yüksek olacaktır. Projeler hazırlanırken<br />

bu unsurlar göz önünde tutularak, maliyet hesaplamaları yapılmalıdır.<br />

– Beslenme<br />

Deney hayvanı seçerken; beslenme özellikleri iyi bilinen ve dengeli<br />

beslenmeleri için ticari yem bulunabilecek hayvanların seçilmesi<br />

tavsiye edilmektedir. Kaliteli yem ve içme suyu temin edilmelidir.<br />

Nadir bulunan türler seçildiği zaman beslenme problem<br />

yaratabilir.<br />

– <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> temini<br />

Araştırmayı planlarken hayvan temininde harcanacak süre göz<br />

önüne alınmalıdır. Bu süre hayvanın niteliği ve sayısı ile değişmektedir.<br />

Bazı türleri (maymun gibi) veya özellikli hayvanları<br />

(<strong>tr</strong>angenik, SPF hayvanlar gibi) mevcut koşullarda bulmak zor<br />

olabilir. Ülkemizde fare, sıçan, tavşan ve kobay gibi yaygın ve<br />

konvansiyonel olarak yetiştirilen hayvanların temininde genel-<br />

Journal of Clinical and Analytical Medicine 7


<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

likle bir sorun yaşanmaz. Bu hayvanlar genellikle araştırmaların kalitatif ve kantitatif uyarlanabilirliğine, yani uygun olup olma-<br />

yapıldığı kurumlarda yetiştirilir veya ticari hayvan yetiştiriciliği dığına dikkat edilmelidir. Zira hayvan deneylerindeki ‘’hayvan-<br />

yapan firmalardan satın alınabilir. Kayıtsız, belgesiz veya çevrelardan insanlara uyarlama’’ kavramı halen anlaşılmazlığını koden<br />

toplanan hayvanlar deneylerde kullanılamaz. Özellikle dışarumaktadır. Bazı bilim adamlarına göre hayvan deneyleri sonuçrıdan<br />

getirilecek hayvanlar sağlık durumları incelenmelidir. Sağları insanlara uyarlanabilirliği söylenmektedir. Örneğin bir ilalık<br />

durumu iyi olmayan hayvanlar deneylerde kesinlikle kullanılcın sıçan ve köpekte zararsız olması insanlarda da zararsız olmamalıdır.ması<br />

gibi. Bazı bilim adamları ise, özellikle hayvan karşıtı olan-<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ların nakledilmelerinde; kafes niteliği ve boyutu, yöntemi, lar, hayvan deneylerinden elde edilen sonuçların yanıltıcı olduğu-<br />

yiyecek desteği gibi hususlara da dikkat edilmelidir.<br />

nu savunmaktadır. Örneğin, kobaylarda penisilinin öldürücü ol-<br />

d) Malzeme listesinin hazırlanması<br />

ması gibi. İnvi<strong>tr</strong>o yöntemlerle elde edilen sonuçların hayvanlara<br />

Türlerin seçimi<br />

ve insanlara uyarlamak çok daha zordur. Bu nedenlerle bu uyar-<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> araştırmalarında hayvan seçiminde tür ve soy bazında lamaların yapılmasına, açıklanmasına gerek yoktur. Sonuçların<br />

düşünmek gerekir. Çünkü her araştırmayı her hayvan türünde ya bir türden diğer türe aktarılmasında sadece homologunun se-<br />

da soyunda yapmak mümkün olmayabilir. Bu nedenle, çalışmaçilmesi ile olmamaktadır. Birden çok tür yaklaşımında da buluya<br />

başlamadan önce hangi hayvan türünün, hatta o türün içinnulmalıdır. Örneğin, toksikolojik çalışmalarda araştırılacak etkedeki<br />

hangi soyun çalışmaya en uygun olduğu saptanmalıdır. Senin kemirgen olmayan iki türde de (kedi ve köpek gibi) incelençilecek<br />

tür, insandaki durumu taklit etmek için çok uygun bir momesi gerekir.<br />

del oluşturmalıdır. Temin edilebileceği görüldükten sonra çalış- Uyarlamada türler arasında metabolik yapı ve hız uyumlu olmama<br />

projesi sunulmalıdır.<br />

lıdır. Örneğin kemirgenlerde metabolizma insanlardan oldukça<br />

hızlıdır. Metabolizmanın kon<strong>tr</strong>olü ve işleyişi vücut büyüdükçe<br />

azalır, ilaç dozları da buna göre hesaplanır.<br />

Türe özgü şu parame<strong>tr</strong>eler incelenmelidir:<br />

Fizyolojik özellikler; yaşam alanları, nabız ve soluk sayısı, toplam<br />

kan miktarları, deney süresince öldürmeden alınabilen kan miktarı<br />

ve bölgeleri, kan parame<strong>tr</strong>e özellikleri (biyokimyası gibi), injeksiyon<br />

bölgesi ve o bölgelere verilebilecek maksimum madde<br />

volümü, çıkardığı idrar miktarı, günlük içtiği su miktarı, dışkı<br />

özelliği, biyoloji ve üreme fonksiyonlarının iyi bilinmesi gerekir.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ların yaşam şekilleri ve davranışları dikkate alınmalıdır.<br />

Anatomik özellikler; yapılacak çalışmaya anatomik yapı olarak<br />

uygunluk, hayvan büyüklüğü, organ yapısı ve modele uygunluk,<br />

türler arası anatomik farklılıklar, özel anatomik eksiklerden faydalanma<br />

(sıçanda safra kesesi olmaması) gibi özellikler incelenmelidir.<br />

Küçük hayvanların; maliyeti, tutulmaları, bakım ve barındırma,<br />

üretim kolaylıkları açısından birçok avantajları vardır. Büyük<br />

hayvanlar ise cerrahi teknikler, i.v. injeksiyon, kan alma, örnek<br />

alma gibi durumlarda avantaj sağlamaktadır.<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> Tipinin Belirlenmesi<br />

Genetik homojenitesi yüksek olan hayvanların seçilmesi (inbred);<br />

büyüme hızı, vücut ağırlığı ve biyolojik özellikler açısından daha<br />

birörnektir. Eğer bir araştırmada inbred hayvanlar kullanılırsa,<br />

denekler arası bireysel farklılıklar azalacağı için ölçülen veriler<br />

benzer yakınlıkta olacaktır. Bu özellik deneyde daha az hayvan<br />

kullanmamızı sağlayacak, istatistiksel açıdan da sorun yaratmayacaktır.<br />

Ancak bazı deneysel araştırmalarda, toksisite testlerinde<br />

olduğu gibi, belirli derecede genetik farklılığın olması istenir<br />

(outbred).<br />

Belirlenen her gruba özgü yaş ve cinsiyetleri (erkek ya da dişi)<br />

benzer olan hayvanlar seçilmelidir.<br />

Bizı durumlarda enzim noksanlığı, immün yetersizliği olan ya da<br />

dalağı, timusu, tiroidi, hipofizi alınmış ya da diabetik hayvanlara<br />

gereksinim duyulabilir ve seçilebilir.<br />

Cerrahi girişimler için seçilecek bir hayvanda; operasyona uygun<br />

olması, büyük hayvanlar için mevcut olan cerrahi tekniklerin<br />

küçük hayvanlara uygulanabilmesi, ya da hayvana sürekli kanül<br />

takılabilmesi, NMR, radyografi, anjiografi, teleme<strong>tr</strong>i (nabız, kan<br />

basıncı, EKG, vücut ısısı, lokomotor aktivite gibi) gibi deney izleme<br />

yollarına uygun olması, uzun sürebilecek genel anesteziye<br />

dayanabilmesi gibi özellikler değerlendirilmeli ve seçilen hayvanın<br />

uygunluğunu belirlemek için ön çalışma yapılması gereklidir.<br />

Seçilecek türlerle elde edilecek verilerin (sonuçların), insanlara<br />

8 Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

4 | Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

Bazı türlerin en fazla kullanıldığı araştırma alanları:<br />

Fare: Kanser, antikor, ilaç, aşı…<br />

Sıçan (rat): Temel tıp, ilaç, gıda, davranış, toksisite…<br />

Kobay (guinea-pig): Duyarlılık, aşı, immünoloji, otoloji, diyet…<br />

Tavşan: Toksisite, antiserum üretimi, göz ve deri irritasyon testleri,<br />

damar sertliği…<br />

Hamster: Tümör, kan dolaşımı, üreme ve fötüs bozuklukları, bazı<br />

deneysel enfeksiyonlara (leptospiroz, influenza, köpek gençlik<br />

hastalığı) duyarlık, hipotermi (kış uykusuna yatar)…<br />

Gerbil: Epilepsi, kolesterol metabolizması ve damar sertliği, obezite,<br />

filarya, beyin infarktüsleri…<br />

Kedi: İlaç geliştirmesinde, kalp-damar hastalıkları, nöroloji…<br />

Köpek: Aşı ve ilaç testleri, cerrahi tekniklerin geliştirilmesi, kalpdamar<br />

hastalıkları…<br />

Domuz:, Deri, pankreas, gas<strong>tr</strong>ointestinal sistem, kardiyovasküler<br />

sistem, iskelet gibi pek çok organları insanlarınkine benzerlik<br />

gösterir. Aşı, gıda…<br />

Koyun ve keçi: Antikor geliştirme, cerrahi tekniklerin geliştirilmesi…<br />

Maymun: Aşı ve ilaç, davranış, insanlara özgü enfeksiyon hastalıkları…<br />

Kanatlılar (tavuk, güvercin, bıldırcın): Tavuklar; genellikle beslenme,<br />

aşılama, bağışıklık, embriyoloji ve toksikoloji, güvercin ve<br />

kumrular; fizyoloji ve davranış, farmakokinetik ve toksikoloji,<br />

Soğukkanlı omurgalılar: Sürüngenler zooloji ve karşılaştırmalı<br />

çalışmalarda, amfibiler organ gelişimi ve moleküler genetik, balıklar<br />

çevre kirliliği ve genetik araştırmalarında kullanılırlar.<br />

6. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> deneylerinin standartlaştırılması:<br />

Standartlaşma bir deneyden elde edilen verilerin ortalamasının,<br />

deney tekrarlandığında benzer yakınlıkta olmasını amaçlar. Dolayısıyla,<br />

hayvan deneylerinin standartlaştırılması; deneyde kullanılacak<br />

hayvanların, çevresel ve deneysel koşullarının sabit tutulması<br />

veya kon<strong>tr</strong>ol altına alınması anlamına gelir. Standartlaşmada<br />

metabolizmayı etkileyen değişkenler kon<strong>tr</strong>ol edilmelidir.<br />

Bunlar arasında beslenme şekilleri, cins, yaş, madde uygulama<br />

yolu-zamanı-miktarı, örnek alma yolu-hacmi-zamanı, mevsim,<br />

biyoloji gibi birçok özellik sayılabilir.<br />

Standartlaştırma aynı zamanda deneyde kullanılacak hayvanların<br />

ölçülebilir parame<strong>tr</strong>eleri arasındaki varyasyonu azaltacağı


<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

için daha az sayıda hayvan kullanımı sağlar. Beslenmenin standardizasyonu<br />

(yemler ve yemleme şekli gibi), genetik olarak birörnek<br />

hayvanların kullanılması (inbred), mikrobiyolojik kalitenin<br />

sağlanması (kontaminasyonların etkisini en aza indirmek veya<br />

tamamen ortadan kaldırmak için, spesifik patojen free, gnotobiyotik<br />

veya germfree hayvan üretim teknikleri) ve hayvanların<br />

çevresel ortamın standardizasyonu önemlidir.<br />

Mikrobiyolojik durumları birbirinden farklı hayvanların fizyolojileri<br />

ve çeşitli etkenlere karşı yanıtları farklı olacaktır. Örneğin,<br />

bazı patojenlerden arındırılmış (SPF) fareler ile geleneksel yetiştirilmiş<br />

farelerin bir maddeye karşı yanıtı bu özellikten dolayı<br />

farklı olabilir.<br />

Araştırmacı, bakıcı ve diğer personellerin tutum ve davranışları<br />

da hayvanları etkilediği için, bunlar sonuçlara deney dışı faktörler<br />

olarak yansımaktadır.<br />

Kısacası hayvanların refahını bozan her faktör deney sonuçlarını<br />

etkilemektedir. Bundan dolayı belirlenen standartların sağlanması<br />

ve sürdürülmesi etik, araştırma sonuçları, finans ve işgücü<br />

açısından oldukça önemlidir.<br />

Kaynaklar<br />

1. Altuğ T. Biyolojik Araştırmalarda Deney <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ı Kullanılmasının Ana İlkeleri. II.<br />

Ulusal Moleküler Biyoloji ve Genetik Öğrenci Kış Okulu Kitabı, Mart 2005, İstanbul,<br />

s. 97-101<br />

2. Altuğ T. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> Deneyleri Etiği. Türk Tıp Dizini. Sağlık Bilimlerinde Süreli Yayıncılık<br />

2009 7.Ulusal Sempozyum Bildirileri. S.53-68<br />

http://www.ulakbim.gov.<strong>tr</strong>/cabim/vt/uvt/tip/sempozyum7/altug.pdf<br />

3. Dokuz Eylül Üniversitesi [homepage on the Internet]. Dokuz Eylül Üniversitesi<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> Deneyleri Yerel Etik Kurulu.<br />

http://www.deu.edu.<strong>tr</strong>/DEUWeb/Icerik/Icerik.php?KOD=6664<br />

4. Dikensoy O. Neden <s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> Araştırmalar? Ülkemizde <s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> Araştırmalarda<br />

Mevcut Durum. Türk Toraks Derneği 13. Yıllık Kongre, 5-9 Mayıs 2010, İstanbul.<br />

5. Hughes HC, Lang CM. Basic Principles İn Selecting Animal Species For Research<br />

Project. Clınıcal Toxıcology. 1978;13; 611-621.<br />

6. Kaya M. <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> çalışmalarında planlama ve uygun model ve denek seçimi nasıl<br />

yapılmalı? Türk Toraks Derneği 13. Yıllık Kongre, 5-9 Mayıs 2010, İstanbul.<br />

7. Lipman NS, and Perkins SE. Factors That May Influence Animal Research. Fox<br />

JG, Anderson LC, Loew FM, Quimby FW. Editors, Laboratory Animal Medicine, Second<br />

Edition, London: Academic Press, 2002. p. 1143-1165.<br />

8. Planning the Experiment. nefrsef.org [homepage on the Internet]. Northeast Florida<br />

Regional Science and Engineering Fair, Inc; c2005 Available from: http://www.<br />

nefrsef.org/students/plan.html<br />

9. Poyraz Ö. Laboratuar <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ları Bilimi. Kardelen Ofset Ankara, 2000.<br />

10. Quimby FW. Animal Models in Biomedical Research. Fox JG, Anderson LC, Loew<br />

FM, Quimby FW. Editors, Laboratory Animal Medicine, Second Edition, London:<br />

Academic Press, 2002. p. 1185-1214.<br />

11. Russell. WMS, Burch RL.. The Principles of Humane experimental Technique.<br />

London: Methuen. 1959<br />

12. Utkan NZ, Cantürk NZ. Deney hayvanlarının ve deney modellerinin seçimi. In;<br />

Cantürk ZF, Sayek İ, Editörler. Cerrahi Araştırma “Araştırma planlama, Değerlendirme<br />

ve sunum, Deney hayvanları, Özgül deneysel modeller”. Birinci basım. İstanbul:<br />

Nobel Tıp Basımevi, 2005. s. 125-129.<br />

13. von Zutphen LFM, Baumans V, Beynen AC. Laboratuvar <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ları Biliminin<br />

Temel İlkeleri. Çeviri Editörü. Tayfun İde, Medipres Ankara 2003.<br />

14. Yavru N, Yavru S. Deney <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ları. Konya: Selçuk Üniversitesi Veteriner Fakültesi<br />

Yayını; 1996.<br />

15. Yeğen BÇ, Gören Z. Biyomedikal Araştırmalarda Deney <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong>ı “Temel Bilgiler<br />

ve Etik İlkeler” Yüce Yayım Tavaslı Matbaası, İstanbul, 2005.<br />

5<br />

| Journal of Clinical and Analytical Medicine<br />

<s<strong>tr</strong>ong>Deneysel</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Hayvan</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Araştırmalarının</s<strong>tr</strong>ong> <s<strong>tr</strong>ong>Planlamasında</s<strong>tr</strong>ong> Dikkat Edilecek Hususlar<br />

Journal of Clinical and Analytical Medicine 9

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!