ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ... ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

library.cu.edu.tr
from library.cu.edu.tr More from this publisher
19.07.2013 Views

3. MATERYAL ve METOT Kadir Uğurtan YILMAZ 3.2.3.7. pH Meyvelerden elde edilen meyve suları kullanılarak elektronik pH-metre yardımıyla çeşit ve tiplerin meyvelerinin pH’ları ölçülmüştür. 3.2.3.8. Asitlik (%) 5 ml’lik meyve suyunu 100 ml’ye damıtılmış saf su ile tamamladıktan sonra pH-metre yardımıyla, pH-metredeki dijital gösterge 8.00-8.10 değerine ulaşılıncaya kadar 100 ml’ye damıtık su ile tamamlanmış 5 ml’lik meyve suyuna titre edilebilir 0.1 Normallik NaOH (Sodyum Hidroksit) eklenmiştir. Kullanılan NaOH miktarı asitlik ölçümlerinde kullanılmıştır. Asitlik Formülü = 0.007 x Harcanan NaOH miktarı x 20 x Faktör (0.963) 3.2.3.9. Renk Tayini Proje kapsamında ele alınan yerli kayısı çeşit ve tiplerimize ait meyvelerde renk tayinleri Minolta CR-200 renk tayin cihazı kullanılarak L, a, b (Şekil 3.11.) değerleri cinsinden ölçülmüştür. Şekil 3.11. L, a, b değerlerinin renk skalası 40

3. MATERYAL ve METOT Kadir Uğurtan YILMAZ 3.2.3.10. Morfolojik Özelliklere ve Pomolojik Analiz Sonuçlarına Ait Verilerin Değerlendirilmesi Çalışmada ele alınan kayısı genotiplerine ait morfolojik özelliklere ve pomolojik analiz sonuçlarına ait verilerin istatistik analizlerinde, Temel Koordinatlar Analizi (Principle Coordinate Analysis = PCoA), Temel Bileşenler Analizi (Principle Component Analysis = PCA) ve pomolojik özellikler arasındaki korelasyon hesaplamaları, SAS (SAS version 8.02, SAS Institute, Cary, NC) adlı bilgisayar paket programı kullanılarak yapılırken, elde edilen verilerden morfolojik uzaklık indekslerinin hesaplanmasında NTSYSpc 2.11V (Rohlf, 2004) adlı bilgisayar paket programı kullanılmış, bu verilere ait soyağacının elde edilmesinde UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean) yöntemi uygulanmıştır. 3.2.4. Moleküler Genetik Çalışmalar 3.2.4.1. Yaprak Örneklerinin Toplanması 94 kayısı genotipine ait yaprak örnekleri 2004 yılının ilkbaharında Malatya Meyvecilik Araştırma Enstitüsü Ulusal Kayısı Gen Kaynakları Parseli ve Battalgazi İlçesi Alişar Köyü’nden toplanmıştır. Toplanan genç yapraklar ayrı ayrı kese kağıtlarına konulduktan sonra buz kutusu içerisinde Adana’ya Çukurova Üniversitesi’ne ulaştırılmıştır. Yaprak örnekleri önce çeşme suyu ve sonrasında da %50’lik etil alkolle yıkandıktan ve ıslaklıkları giderilinceye kadar kurutulduktan sonra sıvı azot (-196 o C) ile muamele edilerek DNA izolasyonu için –80 o C’lik derin dondurucuda muhafazaya alınmıştır. 3.2.4.2. DNA İzolasyonu DNA ekstraksiyonu için ön çalışma yapılmış ve Doyle ve Doyle (1987)’nin geliştirdiği ve Kafkas ve Perl-Treves (2001) tarafından modifiye edilen CTAB yöntemi oldukça iyi sonuç vermiştir. Bu nedenle, bu çalışmada laboratuarda rütin olarak kullanılan ve aşağıda tarif edilen yöntem uygulanmıştır. Bu yöntemde; 0.5 g genç yaprak örneği, içerisinde sıvı azot bulunan havanda iyice ezilir ve 1.5 mililitrelik üç adet eppendorf tübe eşit olacak şekilde 41

3. MATERYAL ve METOT Kadir Uğurtan YILMAZ<br />

3.2.3.10. Morfolojik Özelliklere ve Pomolojik Analiz Sonuçlarına Ait Verilerin<br />

Değerlendirilmesi<br />

Çalışmada ele alınan kayısı genotiplerine ait morfolojik özelliklere ve<br />

pomolojik analiz sonuçlarına ait verilerin istatistik analizlerinde, Temel Koordinatlar<br />

Analizi (Principle Coordinate Analysis = PCoA), Temel Bileşenler Analizi (Principle<br />

Component Analysis = PCA) ve pomolojik özellikler arasındaki korelasyon<br />

hesaplamaları, SAS (SAS version 8.02, SAS Institute, Cary, NC) adlı bilgisayar<br />

paket programı kullanılarak yapılırken, elde edilen verilerden morfolojik uzaklık<br />

indekslerinin hesaplanmasında NTSYSpc 2.11V (Rohlf, 2004) adlı bilgisayar paket<br />

programı kullanılmış, bu verilere ait soyağacının elde edilmesinde UPGMA<br />

(Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean) yöntemi uygulanmıştır.<br />

3.2.4. Moleküler Genetik Çalışmalar<br />

3.2.4.1. Yaprak Örneklerinin Toplanması<br />

94 kayısı genotipine ait yaprak örnekleri 2004 yılının ilkbaharında Malatya<br />

Meyvecilik Araştırma Enstitüsü Ulusal Kayısı Gen Kaynakları Parseli ve Battalgazi<br />

İlçesi Alişar Köyü’nden toplanmıştır. Toplanan genç yapraklar ayrı ayrı kese<br />

kağıtlarına konulduktan sonra buz kutusu içerisinde Adana’ya Çukurova<br />

Üniversitesi’ne ulaştırılmıştır. Yaprak örnekleri önce çeşme suyu ve sonrasında da<br />

%50’lik etil alkolle yıkandıktan ve ıslaklıkları giderilinceye kadar kurutulduktan<br />

sonra sıvı azot (-196 o C) ile muamele edilerek DNA izolasyonu için –80 o C’lik derin<br />

dondurucuda muhafazaya alınmıştır.<br />

3.2.4.2. DNA İzolasyonu<br />

DNA ekstraksiyonu için ön çalışma yapılmış ve Doyle ve Doyle (1987)’nin<br />

geliştirdiği ve Kafkas ve Perl-Treves (2001) tarafından modifiye edilen CTAB<br />

yöntemi oldukça iyi sonuç vermiştir. Bu nedenle, bu çalışmada laboratuarda rütin<br />

olarak kullanılan ve aşağıda tarif edilen yöntem uygulanmıştır.<br />

Bu yöntemde; 0.5 g genç yaprak örneği, içerisinde sıvı azot bulunan<br />

havanda iyice ezilir ve 1.5 mililitrelik üç adet eppendorf tübe eşit olacak şekilde<br />

41

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!