ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ... ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ ...

library.cu.edu.tr
from library.cu.edu.tr More from this publisher
19.07.2013 Views

4. BULGULAR ve TARTIŞMA Kadir Uğurtan YILMAZ ISSR yönteminde de morfolojik değerlendirmelerde olduğu gibi 02-K-15, 07 grubu içerisinde yer almıştır. Bu sonuç da aslında bu genotipin 07-K-15 tipi olduğunu, bu tipin Genetik Kaynaklar Parseli’nde hem tabelasının yanlış yazıldığı hem de parsel planına yanlışlıkla 02-K-15 olarak işlendiği belirlenmiştir (Ek 4). 4.3.2. RAPD Analizleri Bu çalışmada RAPD tekniği 96 kayısı genotipini karakterize etme ve aralarındaki genetik ilişkiyi ortaya çıkarma amacı ile kullanılan bir diğer yöntemdir. Bu teknikte kayısı genotipleri için en polimorfik RAPD primerlerini saptamak amacıyla ilk olarak 7 kayısı genotipinde toplam 160 adet OPERON serisi RAPD primeri test edilmiştir. Şekil 4.96. 48 kayısı genotipinde OPA07 nolu RAPD primerinin amplifikasyon ürünleri [sırasıyla 49’dan 96’ya kadar olan genotipler (Çizelge 3.1.)] Tarama işleminden sonra en polimorfik olarak saptanan 20 adet RAPD primeri 96 adet kayısı çeşit ve genotipinde test edilmiştir. OPA07 primerinin denemede yer alan bazı kayısı genotiplerindeki amplifikasyonu sonucu elde edilen ürünlerin gösterildiği jel görüntüleri Şekil 4.96.’da verilmiştir. Şekil 4.96.’da görüldüğü gibi, OPA07 RAPD primerinin 96 kayısı genotipi ile yapılan PCR amplifikasyonu sonucu oluşan ürünlerin 48 kayısı genotipini (49’dan 96’ya kadar olan genotipler) temsil eden jel resminde; 8 bandın 6’sının polimorfik olduğu tespit edilmiştir. Polimorfik bantların büyüklükleri ise 564–2000 bç arasında değişim göstermiştir. Bu büyüklükler dışında kalan bantlar değerlendirmeye 290 MA

4. BULGULAR ve TARTIŞMA Kadir Uğurtan YILMAZ alınmamıştır. Gülşen ve Mutlu (2005), RAPD primerlerinin DNA zinciri üzerinde 200 ile 2000 bç mesafede farklı dizinlere yapışması gerektiğini, yapışmanın bu mesafeden daha uzun olması durumunda DNA zincirinin polimeraz enzimi tarafından güçlendirilemeyeceğinden bahsetmişlerdir. 4.3.2.1. Kayısı Genotiplerinin RAPD Tekniği ile Karakterizasyonunda Polimorfizm ve Ayırma Gücü RAPD analizinde tarama işlemi sonucu elde edilen değerlere göre belirlenen 20 adet en polimorfik primer 96 genotipe uygulanmıştır. Elde edilen amplifikasyon ürünlerinden çok güçlü ve belirgin olanlar dikkate alınarak bantlarda var (1) ve yok (0) değerlendirmesi yapılmıştır. Bu değerlendirme sonucu elde edilen toplam bant sayıları (TBS), polimorfik bant sayıları (PBS), polimorfizm oranı (PO) ve bu primerlerin polimorfizm bilgi içerikleri (PBİ) ve ayırma gücü (AG) değerleri aşağıdaki Çizelge 4.291.’de verilmiştir. Çalışmada kullanılan 20 RAPD primeri değerlendirildiğinde; toplam 130 adet bant elde edilmiş ve bunların 99 adedi polimorfik bulunmuştur. Primer başına düşen toplam bant sayısı 2–11 (ortalama 6.50) arasında değişim göstermiştir. Primer başına düşen polimorfik bant sayısı ise, 1–8 (ortalama 4.95) arasında olmuştur. Toplam bant sayısı açısından primerler değerlendirildiğinde, OPP10 nolu primer en düşük (2 adet) bant sayısını üretmiş olup, OPA02 nolu primer ise en fazla (11 adet) bandı vermiştir. Polimorfik bant sayısı bakımından ise OPP10 ve OPA03 nolu primerlerden en düşük (1 adet) bant sayısı elde edilirken, OPA02 ve OPC06 nolu RAPD primerlerinden en yüksek (8 adet) bant sayısı elde edilmiştir. Primerlerin polimorfizm oranı % 77 bulunmuştur. OPA03 nolu primerden en düşük (%13), OPB11, OPC05, OPC06, OPK14 ve OPN01 nolu RAPD primerlerinden en yüksek (%100) polimorfizm oranı elde edilmiştir. RAPD primerlerinin polimorfizm bilgi içeriği (PBİ) ve ayırma güçleri de bu çalışmada değerlendirilmiştir. Ortalama polimorfizm bilgi içeriği değeri 0.542 olarak bulunmuştur. En düşük (0.208) polimorfizm bilgi içeriği değeri OPB11 nolu primerden, en yüksek (0.991) polimorfizm bilgi içeriği değeri ise OPA03 nolu primerden elde edilmiştir. 291

4. BULGULAR ve TARTIŞMA Kadir Uğurtan YILMAZ<br />

alınmamıştır. Gülşen ve Mutlu (2005), RAPD primerlerinin DNA zinciri üzerinde<br />

200 ile 2000 bç mesafede farklı dizinlere yapışması gerektiğini, yapışmanın bu<br />

mesafeden daha uzun olması durumunda DNA zincirinin polimeraz enzimi<br />

tarafından güçlendirilemeyeceğinden bahsetmişlerdir.<br />

4.3.2.1. Kayısı Genotiplerinin RAPD Tekniği ile Karakterizasyonunda<br />

Polimorfizm ve Ayırma Gücü<br />

RAPD analizinde tarama işlemi sonucu elde edilen değerlere göre<br />

belirlenen 20 adet en polimorfik primer 96 genotipe uygulanmıştır. Elde edilen<br />

amplifikasyon ürünlerinden çok güçlü ve belirgin olanlar dikkate alınarak bantlarda<br />

var (1) ve yok (0) değerlendirmesi yapılmıştır. Bu değerlendirme sonucu elde edilen<br />

toplam bant sayıları (TBS), polimorfik bant sayıları (PBS), polimorfizm oranı (PO)<br />

ve bu primerlerin polimorfizm bilgi içerikleri (PBİ) ve ayırma gücü (AG) değerleri<br />

aşağıdaki Çizelge 4.291.’de verilmiştir.<br />

Çalışmada kullanılan 20 RAPD primeri değerlendirildiğinde; toplam 130<br />

adet bant elde edilmiş ve bunların 99 adedi polimorfik bulunmuştur. Primer başına<br />

düşen toplam bant sayısı 2–11 (ortalama 6.50) arasında değişim göstermiştir. Primer<br />

başına düşen polimorfik bant sayısı ise, 1–8 (ortalama 4.95) arasında olmuştur.<br />

Toplam bant sayısı açısından primerler değerlendirildiğinde, OPP10 nolu primer en<br />

düşük (2 adet) bant sayısını üretmiş olup, OPA02 nolu primer ise en fazla (11 adet)<br />

bandı vermiştir. Polimorfik bant sayısı bakımından ise OPP10 ve OPA03 nolu<br />

primerlerden en düşük (1 adet) bant sayısı elde edilirken, OPA02 ve OPC06 nolu<br />

RAPD primerlerinden en yüksek (8 adet) bant sayısı elde edilmiştir.<br />

Primerlerin polimorfizm oranı % 77 bulunmuştur. OPA03 nolu primerden<br />

en düşük (%13), OPB11, OPC05, OPC06, OPK14 ve OPN01 nolu RAPD<br />

primerlerinden en yüksek (%100) polimorfizm oranı elde edilmiştir.<br />

RAPD primerlerinin polimorfizm bilgi içeriği (PBİ) ve ayırma güçleri de bu<br />

çalışmada değerlendirilmiştir. Ortalama polimorfizm bilgi içeriği değeri 0.542 olarak<br />

bulunmuştur. En düşük (0.208) polimorfizm bilgi içeriği değeri OPB11 nolu<br />

primerden, en yüksek (0.991) polimorfizm bilgi içeriği değeri ise OPA03 nolu<br />

primerden elde edilmiştir.<br />

291

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!