YÜKSEK LİSANS TEZİ - Çukurova Üniversitesi

YÜKSEK LİSANS TEZİ - Çukurova Üniversitesi YÜKSEK LİSANS TEZİ - Çukurova Üniversitesi

library.cu.edu.tr
from library.cu.edu.tr More from this publisher
19.07.2013 Views

1. GİRİŞ Savaş Fuat TURAN proteinleri olan kollagen, elastin, retukulin ve keratin bulunmaktadır. Bu yapılar türlere göre farklılıklar gösterebildiğinden türlerin ayırt edilmesinde kullanılabilmektedirler. Protein yapıları Elektroforez ve İzoelektrofokusing yöntemleri kullanılarak tespit edilmektedir. Elektroforez: Proteinlerin izoelektrik noktaları dışındaki pH’ larda sahip oldukları net elektrik yüklerinde ya da molekül ağırlıklarındaki farklılıklardan yararlanarak bir destek madde içerisinde uygulanan elektrik akımıyla farklı noktalarda toplanmaları işlemidir.Elektroforez, immunolojik yöntemlere göre daha net sonuç vermektedir ve İmmunolojik reaksiyonlarda görülen kross reaksiyonlar oluşmaz. Karıştırılmış ve parçalanmış et ürünlerinde, belirli derecelerde (100 °C’ de 30 dk) ısıl işlem uygulanmış etlerin ayırt edilmesinde de kullanılabilmekte ve protein miktarları da nicel olarak saptanabilmektedir (Arslan,2002). İzoelektrofokising: Elektroforeze göre daha duyarlıdır ve bütün hayvan etlerinde, ısıtılmış, dondurulmuş etlerde, et karışımlarında ve ürünlerinde uygulanabilmektedir. pH’sı 2-11arasında değişebilen bir polyakrilamid jel içinde, proteinlerin elektrik akımıyla net yüklerinin sıfır olduğu izoelektrik noktalarına göç etmeleridir. Böylece izoelektrik noktaları farklı proteinler değişik yerlerde toplanarak birbirlerinden ayrılırlar. Genetik Olarak Türlerin Ayırt Edilmesi: Canlılar arasındaki genler pürin ve pürimidin bazlarının farklı dizilişinden dolayı türlere göre farklılıklar göstermektedir. Bunlar esas alınarak türlerin ayrımı yapılabilmektedir.Hibridizasyon tekniği ve Polimeraz Zincir Reaksiyonu Tekniği kullanılarak genetik olarak türlerin ayrımı yapılmaktadır. Hibridizasyon teknikleri doku, organ, hücre kültürü, ekstret ve sekrete ait DNA’ lardaki spesifik genlerin işaretli prob’ larla (bilinen gen parçası) ortaya konulması ve sayısal olarak çoğaltılması esasına dayanmaktadır. Southern Blot Hibridizasyon, Nothern Blot Hibridizasyon, Dot Blot Hibridizasyon , İn Situ Hibridizasyon gibi kendi arasında farklı yöntemleri mevcuttur. Polimeraz Zincir Reaksiyonu: DNA dizisi arasındaki gen segmentlerini çoğaltılması için kullanılan, kısa bir sürede tamamlanan nükleik asit teknolojisi 3

1. GİRİŞ Savaş Fuat TURAN yöntemidir. PCR, DNA’nın iki zincirinin 94 0 -98 0 C’lik sıcaklık ile ayrılması, daha sonra sentetik oligonükleotidlerin 37 0 -65 0 C’de hedef DNA’ya bağlanması, sonra 72 0 C’de zincirin uzaması ve bu siklusun belirli sayıda tekrarlanması esasına dayanmaktadır. En önemli özelliği de özel bir DNA dizisini seçip çoğaltarak istenmeyen dizilerin ortaya çıkmasını önlenebilmesidir. Bu özellik dizinin tanınmasını kolaylaştırdığı gibi ayrıca DNA’ nın analiz edilmesini de sağlar. PCR’ın en önemli özelliklerinden biri de, çok az miktarda DNA ile çalışılmasına olanak sağlamasıdır.. Bu yöntemlerin tümünde laboratuvar koşulları gerekli olduğundan tüketicinin aldığı ürünü hemen tanıyabilmesi mümkün değildir.Bundan dolayı kullanılabilirlik açısından pratik değillerdir.Ayrıca maliyet açısından da yüksek maliyeti olan yöntemlerdir. Et kontrolleri insan sağlığını korumak amacıyla yapılması gereken zorunlu ve kaçınılmaz bir gereksinimdir. Tüm bu yöntemler insanların daha güvenli ve temiz et tüketmelerinin sağlanması amacıyla yapılmaktadır. İnsanların ekonomik olarak alım gücü arttırıldığı zaman ucuz etlere onan talebi azalacağından bu tür etlerin satışı da azalacaktır. Ayrıca etlerin denetlenmesi ile ilgili birimlerin gerekli sıklıkla ve kararlılıkla bu tur üretim yapan yerleri denetlemesiyle böyle hileli satışların önüne maksimum düzeyde geçilecektir. Ülkemizde çok miktarda farklı hayvan etlerinin kaçak olarak insan beslenmesinde kullanıldığı güncel basında izlenmektedir. Farklı hayvan türlerine ait etlerin ayrımının yapılması çok büyük önem arz etmektedir. Bu çalışmada türlere ait farklılıkları ortaya koyarak insanların et alırken daha bilinçli bir şekilde davranmalarının sağlanması amaçlanmıştır. Farklı türlere ait etlerin ayırt edilmesinde kullanılan yöntemlerin basit, ucuz, güvenilir ve hızlı biçimde yapılmasının zorunluluk haline gelmesi tüketici açısından kolaylıklar getirmiştir. Bu çalışmada türler arasındaki farklılıkları ortaya koyabilmek amacıyla her türe özgü olarak karkasların anatomik yapısı, kıllarının morfolojisi ve derialtı yağ asitleri değerleri belirlenecektir. 4

1. GİRİŞ Savaş Fuat TURAN<br />

proteinleri olan kollagen, elastin, retukulin ve keratin bulunmaktadır. Bu yapılar<br />

türlere göre farklılıklar gösterebildiğinden türlerin ayırt edilmesinde<br />

kullanılabilmektedirler. Protein yapıları Elektroforez ve İzoelektrofokusing<br />

yöntemleri kullanılarak tespit edilmektedir.<br />

Elektroforez: Proteinlerin izoelektrik noktaları dışındaki pH’ larda sahip<br />

oldukları net elektrik yüklerinde ya da molekül ağırlıklarındaki farklılıklardan<br />

yararlanarak bir destek madde içerisinde uygulanan elektrik akımıyla farklı<br />

noktalarda toplanmaları işlemidir.Elektroforez, immunolojik yöntemlere göre daha<br />

net sonuç vermektedir ve İmmunolojik reaksiyonlarda görülen kross reaksiyonlar<br />

oluşmaz. Karıştırılmış ve parçalanmış et ürünlerinde, belirli derecelerde (100 °C’ de<br />

30 dk) ısıl işlem uygulanmış etlerin ayırt edilmesinde de kullanılabilmekte ve protein<br />

miktarları da nicel olarak saptanabilmektedir (Arslan,2002).<br />

İzoelektrofokising: Elektroforeze göre daha duyarlıdır ve bütün hayvan<br />

etlerinde, ısıtılmış, dondurulmuş etlerde, et karışımlarında ve ürünlerinde<br />

uygulanabilmektedir. pH’sı 2-11arasında değişebilen bir polyakrilamid jel içinde,<br />

proteinlerin elektrik akımıyla net yüklerinin sıfır olduğu izoelektrik noktalarına göç<br />

etmeleridir. Böylece izoelektrik noktaları farklı proteinler değişik yerlerde toplanarak<br />

birbirlerinden ayrılırlar.<br />

Genetik Olarak Türlerin Ayırt Edilmesi: Canlılar arasındaki genler pürin ve<br />

pürimidin bazlarının farklı dizilişinden dolayı türlere göre farklılıklar göstermektedir.<br />

Bunlar esas alınarak türlerin ayrımı yapılabilmektedir.Hibridizasyon tekniği ve<br />

Polimeraz Zincir Reaksiyonu Tekniği kullanılarak genetik olarak türlerin ayrımı<br />

yapılmaktadır.<br />

Hibridizasyon teknikleri doku, organ, hücre kültürü, ekstret ve sekrete ait<br />

DNA’ lardaki spesifik genlerin işaretli prob’ larla (bilinen gen parçası) ortaya<br />

konulması ve sayısal olarak çoğaltılması esasına dayanmaktadır. Southern Blot<br />

Hibridizasyon, Nothern Blot Hibridizasyon, Dot Blot Hibridizasyon , İn Situ<br />

Hibridizasyon gibi kendi arasında farklı yöntemleri mevcuttur.<br />

Polimeraz Zincir Reaksiyonu: DNA dizisi arasındaki gen segmentlerini<br />

çoğaltılması için kullanılan, kısa bir sürede tamamlanan nükleik asit teknolojisi<br />

3

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!