MEME KANSERLİ HASTALARDA CYP19 GENİ KODON 39 Trp/Arg ...

Şekil 11: Kontrol grubu (K1-K8) DNA’larından elde edilen amplifikasyon ürünleri. TT, TC ve CC
genotiplerine ait 4 primer birlikte kullanılarak yapılan multipleks PCR görüntüleri.
PCR amplifikasyonu yapılan ve agaroz jelde görüntülenen toplam 75 hastadan
20 hastada, common bölge (427 bç.) ve T alleline ait bantlar (200 bç.) belirgin olarak
görüntülenirken 20 hastada belirgin olmayan bantların (non-spesific) görülmesi diğer
bir yöntemle (RFLP) doğrulama yapılmasını zorunlu kılmıştır. Bu 20 hasta için PCR
ürünleri RFLP yöntemi ile Aci I restriksiyon enzimi kullanılarak kesim reaksiyonuna tabi
tutuldu ve agaroz jel elektroforezinde yürütülerek tekrar değerlendirme yapıldı, PCR
ürünleri RFLP reaksiyonuna tabi tutuldu ve C allelinin (264 bç.) varlığını gösteren bir
kesim gerçekleşmedi (Şekil 12,13).
Çalışmamızda elimizde bulunan enzim miktarı sınırlı olduğundan RFLP işlemi
sadece kontrol grubundan 10, hasta grubundan 20 bireye uygulanabilmiştir. Şekil 12 ve
13 hasta ve kontrollere ait kesim reaksiyonu sonrası jel görüntülerinden örnekleri
oluşturmaktadır.
32