GİRİŞ VE AMAÇ

13. Her bir vaka için ayrı ayrı numaralandırılmış lamlara, oda sıcaklığında, nemli
ortamda E-cadherin antikoru (Mouse anti-E-cadherin (Clone HECD-1 ), Kat No: 13-
1700, Lot: 50192417) damlatıldı ve 20 dakika bekletildi.
14. Lamlar üzerindeki primer antikorlar distile su ile uzaklaştırılıp, PBS solüsyonuna
alınarak 5 dakika bekletildiler.
15. Lab Corporation=Universal cit linkin yerine (sarı renkte) Biotinylated Goat Antipolyvalent
(Ref: TP-125-BN LOT:PBN41116) solüsyonu damlatıldı ve 20 dakika
bekletildi.
16. PBS solüsyonu ile 5 dakika yıkanan lamlara, 2 nolu biotine bağlanacak olan
işaretleyici Lab Vision Corporation, Large volume Streptavidin Peroksidase (Ref: TS-
125-HR LOT: SHR 41025 damlatıldı ve 20 dakika daha bekletildi.
17. PBS solüsyonu ile 5 dakika yıkanan lamlara, 2 nolu biotine bağlanacak olan
işaretleyici Lab Vision Corporation,Dap Kromogen Ultravision Detection System
(Ref: TA-125-HD) damlatıldı ve 20 dakika daha bekletildi.
18. Distile su ile yıkanan lamlar PBS solüsyonunda 5 dakika bekletildi.
19. DAKO’ya ait “DAB+Liquid” (kod No. K 3468) kitinden karıştırılarak hazırlanan
renklendirici solüsyon lamlar üzerine damlatıldı, 10 dakika bekletildi.
20. Distile su ile yıkanan lamlar Mayer Hematoksilen solüsyonunda 40 saniye tutularak
zıt boyama yapıldı.
21. Musluk suyunda yıkandı.
22. Lamlar %5’lik amonyak solüsyonuna bir kez batırılarak morartma işlemine tabii
tutuldu.
23. %96’lık alkolle 2 kez 1’er dakika bekletildi..
24. Asetonla 2 kez 1’er dakika bekletildi.
25. Ksilende 2kez 1’er dakika bekletildi.
26. Gliserol jel ile kapatıldı.
CD10
1. Tümör ve çevre prostat dokusunu en iyi örnekleyen kesite ait parafin bloklardan 4µm
kalınlığında kesitler yapıldı. Kesitler 1/10’luk Poly-L-Lysine solüsyonu ile muamele
edilmiş lamlara alındı.
2. Bir gece 37° C etüvde veya 1 saat boyunca 60° C etüvde bekletilerek
deparafinizasyon işlemi uygulandı.
25