06.09.2014 Views

Lindgren, LU - Norovirus - Svenskt Vatten

Lindgren, LU - Norovirus - Svenskt Vatten

Lindgren, LU - Norovirus - Svenskt Vatten

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

<strong>Norovirus</strong> och andra magtarmsjukevirus i<br />

dricksvattenberedningen –<br />

kan det innebära en risk idag eller imorgon?<br />

Fredrik Nyström, Erik Dalin & Per-Eric <strong>Lindgren</strong><br />

Institutionen för klinisk och experimentell medicin<br />

p<br />

Linköpings universitet, Linköping<br />

Mikrobiologiska laboratoriet, Länssjukhuset Ryhov, Jönköping


Magtarmsjukevirus i vatten<br />

• Mikrobiell ”magsjuka” via vatten orsakas av bakterier,<br />

virus eller parasiter<br />

• Föroreningskällan är i de flesta fall av humant ursprung,<br />

från faeces<br />

• Avloppsvatten är i de flesta fallen källan till<br />

kontamineringen av råvattnet<br />

• Virus har länge varit metodologiskt svårare att detektera<br />

vid låga koncentrationer<br />

• Flera tidigare utbrott tt med okänd orsak kan misstänkas<br />

vara av viralt ursprung<br />

• Virus ofta mera motståndskraftiga mot desinfektion och<br />

behandlingar i verket än bakterier och parasiter


Infektiösa mag-tarminfektioner<br />

• Vilka är symtomen?<br />

Ofta allmänna symtom; kräkning, diarré, yrsel, huvudvärk,<br />

trötthet<br />

• Vilka mikroorganismer orsakar infektionerna?<br />

Bakterier, virus, parasiter<br />

• Hur sprids de?<br />

<strong>Vatten</strong>, förorenad föda, luft via aerosol, damm<br />

• Vilka är riskerna?<br />

Allvarligt främst hos barn och äldre personer<br />

Personer i ”riskgrupperna”, med dåligt allmäntillstånd<br />

Uttorkning, påverkan på hjärta och cirkulation


Virus<br />

• En av de enklaste livsformerna som existerar<br />

• Består av protein och arvsmassa (DNA eller RNA)<br />

• Kräver tillgång g till värdorganism för att kunna leva och<br />

föröka sig. Människa, djur, växter kan alla drabbas av<br />

virus<br />

• Virus lever inuti värdcellen och utnyttjar denna för sin<br />

förökning (parasit)<br />

• Många vanliga sjukdomar hos oss människor orsakas av<br />

g g j<br />

virus, t ex förkylning, influensa, mässling, vattkoppor


Vilka virus är viktiga?<br />

‣ RNA-virus<br />

• <strong>Norovirus</strong><br />

• Sapovirus<br />

• Astrovirus<br />

• Rotavirus<br />

• Hepatit E<br />

• (Hepatit A)<br />

‣ DNA-virus<br />

• Adenovirus (vissa typer)


Calicivirusfamiljen<br />

Caliciviridae<br />

<strong>Norovirus</strong> Sapovirus Lagovirus Vesivirus<br />

i<br />

GI GII GIII GIV GV<br />

~1/10 ~9/10 sällsynt<br />

Genogrupperna kan sedan i sin tur delas<br />

in i många olika genotyper<br />

60% skillnader i<br />

virusets höljeproteiner


Vinterkräksjukevirus k i = norovirus<br />

• Viruspartikeln har en regelbunden geometrisk<br />

form och är ca 30 nm i diameter<br />

• Består av ett proteinhölje med arvsmassa<br />

inuti<br />

• Arvsmassan består av enkelsträngat RNA –<br />

mycket variabel<br />

• Många olika typer av viruset finns med<br />

varierande virulens<br />

• Viruspartikeln har hög stabilitet även utanför<br />

en levande cell, t ex i miljön


Vinterkräksjuka k I<br />

• Vinterkräksjuka k är den vanligaste ickebakteriella<br />

orsaken (60-80%) till magtarmsjukdomar<br />

hos vuxna, men också vanlig<br />

hos barn<br />

• Totalt infekteras årligen mera än 700 milj<br />

barn


Vinterkräksjuka k II<br />

• Symtom: diarré, kräkningar, kramper, feber,<br />

yrsel<br />

• Normal varaktighet 1-3 dygn<br />

• Mycket infektiös, överförs oralt via personperson<br />

kontakt eller förorenad mat/dryck. 10-<br />

100 viruspartiklar tillräckligt för att infekteras<br />

• Kortlivad immunitet, dock är ca 15-20% (i<br />

Sverige) inte mottagliga för infektion<br />

• Stabil i miljön, sprids lätt via vatten, föda, luft<br />

och dålig hygien


Detektionsmetoder för virus i vatten<br />

• Serologiska metoder, ofta svår pga stor variabilitet<br />

• Mikroskopi<br />

• PCR<br />

Konventionell PCR<br />

Realtids-PCR, 10-100 X känsligare än konventionell PCR,<br />

även för kvantifiering, detektionsgräns


Vinterkräksjukevirus i avloppsvattenreningen<br />

• Hur sprids vinterkräksjukeviruset när det lämnat den mänskliga miljön och<br />

kommit ut i avloppet?<br />

Virus förekommer i avloppsvatten. Åtminstone det<br />

inkommande avloppsvattnet kan utgöra en potentiell<br />

smittokälla<br />

• Försvinner viruset från vattnet i reningsprocessen?<br />

Mängden virus reduceras under reningen 10-1000 gånger<br />

beroende på årstid, ungefär samma reduktion som koliforma<br />

bakterier<br />

• Finns risker att vi blir sjuka vid kontakt med utgående avloppsvatten?<br />

Inget tyder på detta, men risk kan finns för kontaminering av<br />

råvattentäkter<br />

Rotavirus by Lennart Svensson<br />

• Finns samband mellan utbrott av vinterkräksjuka på t ex sjukhus och det<br />

som finns i vattnet?<br />

Säsongsvariation finns både vad gäller utbrott diagnostiserade<br />

på sjukhus och förekomst i reningsverk


<strong>Norovirus</strong> i<br />

dricksvattenberedningen<br />

• Kunskapen om förekomst och spridning av<br />

virus har länge varit högst begränsad, pga<br />

indirekt metodik<br />

• Direkt detektion och kvantifiering är en<br />

utmaning pga mycket låga halter i vattnet<br />

och heterogen förekomst


Metodik<br />

• Känslig och specifik molekylärbiologisk<br />

metodik baserad på realtids-PCR finns<br />

utvecklad för norovirus. Metodiken möjliggör<br />

Detektion och kvantifiering<br />

Epidemiologisk kartläggning av spridningsvägar<br />

• För att kunna arbeta framgångsrikt med<br />

vattenprover krävs en föregående<br />

koncentrering/anrikning av virus i provet -<br />

vilket är en utmaning!


Humanpatogena virus i svenska<br />

ytvattentäkter – NORVID<br />

• Projektet syftar till att medvetenheten om<br />

och beredskapen för virala föroreningar i<br />

dricksvattentäkter<br />

• Härigenom skapas möjligheter till bättre<br />

förutsättningar att<br />

förutsäga<br />

förebygga<br />

lindra effekterna av<br />

bedöma/utvärdera risker för<br />

viral smittspridning via dricksvatten


NORVID<br />

• Projektledare: Johanna Ansker, Stockholm<br />

vatten; Forskningsledare: Per-Eric Ei <strong>Lindgren</strong><br />

• Huvudfinansiär: <strong>Svenskt</strong> <strong>Vatten</strong> Utveckling<br />

• Projektdeltagare: ”Görvälngruppen”, Linköpings<br />

universitet<br />

• Treårigt projekt


NORVID: Analys av norovirus i ytvatten


Spridningsvägar<br />

10 3 -10 7<br />

(virus/liter)<br />

Upp till 10 6<br />

(virus/liter)<br />

10 5 -10 12<br />

(virus/gram)<br />

???


Analysmetodik<br />

20 L<br />

4µL<br />

Sjövatten (ytvatten)<br />

Realtids-PCR<br />

RNA<br />

DNA<br />

Anrikning<br />

RNA-extraktion<br />

cDNA-syntes


Analysmetodik<br />

20 L<br />

4µL<br />

Sjövatten<br />

Realtids-PCR<br />

Anrikning<br />

RNA-extraktion<br />

cDNA-syntes


Anrikning genom filtrering<br />

20 L<br />

4 L 15 mL 0,2 mL


Säsongsstudie över ett år<br />

Mälaren<br />

Göta Älv<br />

Ringsjön


Minska samhällets sårbarhet för<br />

vattenburen virussmitta trots ett<br />

förändrat klimat - VISK<br />

• Projekt inom ramen för EU Interreg IVA<br />

• Treårigt projekt, 17 partners i Sverige, Norge<br />

och Danmark<br />

• Projektkoordinator: Lena Blom,<br />

Kretsloppskontoret, Göteborgs stad<br />

• Huvudmålsättning: Skapa verktyg för att hantera<br />

dagens och morgondagens risker med<br />

virussmitta i dricksvatten


Var kan man läsa mer?<br />

SVU Rapport<br />

SVU-rapport 2010-09: Analysmetoder för norovirus i ytvatten, Erik Dalin,Johanna Ansker,<br />

Peder Häggström, Bengt Dahlberg, Britt-Marie Pott, Per Ericsson, Per-Eric <strong>Lindgren</strong><br />

Nordgren, J., Bucardo, F., Dienus, O., Svensson, L., and <strong>Lindgren</strong>, P.-E. 2008. Novel<br />

light-upon-extension real-time PCR assays for detection and quantification of genogroup I<br />

and II noroviruses in clinical specimens. J. Clin. Microbiol. 46:164-170<br />

Nordgren, J., Matussek, A., Mattsson, A., Svensson, L., <strong>Lindgren</strong>, P.-E. 2009. Prevalence<br />

of norovirus and factors influencing virus concentrations during one year in a full-scale<br />

wastewater treatment plant. Water Research 43:1117-1125


Tack<br />

• Kollegor vid Linköpings universitet:<br />

<br />

Johan Nordgren, Lennart Svensson<br />

• Personal vid Ryaverket, Göteborg:<br />

<br />

Ann Mattson och medarbetare<br />

• Kollegor vid Mikrobiologiska laboratoriet, Ryhovs sjukhus,<br />

Jönköping:<br />

<br />

Sture Löfgren, Andreas Matussek<br />

• Kollegor vid Sahlgrenska sjukhuset, Göteborg:<br />

<br />

Nancy Nenonen, Tomas Bergström<br />

• ”Görvälngruppen” - dricksvattenverk:<br />

<br />

Johanna Ansker, Peder Häggström, Per Ericsson, Britt-Marie Pott, Elisabeth<br />

Athley<br />

• Finansiellt stöd:<br />

<strong>Svenskt</strong> vatten, EU, Linköpings universitet, FORSS, Landstingen i Jönköpings och<br />

Östergötlands län, FORMAS, Vetenskapsrådet

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!