Den perfekta markoren
Den perfekta markoren
Den perfekta markoren
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
SoniC - det första helautomatiska systemet för pre-analytisk upparbetning av avföringsprover<br />
SoniC används idag för upparbetning av prover för analys av fekalt kalprotektin men kan<br />
även användas för extraktion av DNA, RNA och andra biomarkörer i feces. Systemet utför<br />
identifiering, vägning, homogenisering, centrifugering och alikvotering av prover med hög<br />
effektivitet och reproducerbarhet.<br />
95 % sensitivitet medan sensitivitet för<br />
CRP och SR var betydligt lägre och låg på<br />
36 % respektive 41 % (8). Kalprotektin i<br />
plasma/serum är inte lika känslig markör<br />
för IBD som kalprotektin i feces vilket<br />
förklaras med den naturliga kontakten<br />
mellan avföringen och den inflammerade<br />
tarmslemhinnan.<br />
Dessvärre är kalprotektin inte specifik<br />
markör för IBD. Förhöjd koncentration<br />
av kalprotektin i avföringen förekommer<br />
även vid gastrointestinal cancer,<br />
tarminfektioner, blod i provmaterialet,<br />
kolonpolyp, NSAID-enteropati och luftvägsinfektioner<br />
(9).<br />
Hur mäter man kalprotektin i<br />
avföringen? Antalet kalprotektin analyser<br />
har ständigt ökat sedan introduktionen<br />
i landets laboratorieverksamhet. I<br />
Sverige analyseras ca 70 000 kalprotektin<br />
prover/år och trenden mot ökat antal<br />
beställningar fortsätter.<br />
Metoden som används i de flesta laboratorierna<br />
är en ELISA (Enzyme-linked<br />
immunosorbent assay). Metoden är relativt<br />
enkel och billig. <strong>Den</strong> är dock tidskrävande<br />
och medför 1-3 veckor långa svarstider,<br />
delvis beroende på den pre-analytiska<br />
upparbetningen av avföringsprover.<br />
De flesta tillverkare av ELISA-metoden<br />
erbjuder även semi-kvantitativa eller<br />
kvantitativa snabbtester för kalprotektin.<br />
Avsikten är att de ska användas i<br />
8 | Laboratoriet Nr 6 2011<br />
primärvården, alternativt att patienten<br />
ska kunna utföra testet i hemmet och själv<br />
läsa av resultaten.<br />
Utmaningar inför framtiden. Långa<br />
svarstider är en klar nackdel och utgör hinder<br />
i den kliniska vardagen. En självklar<br />
utmaning inför framtiden är att förkorta<br />
svarstider med snabbare analysprocess.<br />
Både den pre-analytiska upparbetningen<br />
av prover och själva analysen av<br />
kalprotektin i avföringen bör automatiseras<br />
för snabb och effektivt leverans av<br />
analysresultat.<br />
Lösningen för automatiserad upparbetning<br />
av avföringsprover är redan framtagen<br />
och utgörs av en robot som ersätter<br />
den manuella upparbetningen och utför<br />
extraktion av kalprotektin ur avföringsprover<br />
(se bild ovan).<br />
Metoden som skulle kunna ersätta<br />
ELISA finns för närvarande inte på<br />
marknaden men är en utmaning för tillverkare<br />
av kalprotektin kit. Dessutom<br />
är en enkel och pålitlig snabbtest för<br />
primärvården och eventuell hemmabruk<br />
ett önskvärt alternativ som komplement<br />
till kalprotektin analysen som utförs på<br />
laboratoriet.<br />
Fekalt kalprotektin är hittills den<br />
mest studerade och bästa markören för<br />
IBD. Förutom kalprotektin finns det flera<br />
intressanta proteiner som studeras i samband<br />
med sjukdomar i mag-tarm kana len.<br />
S100A12 är ett protein som liksom kalprotektin<br />
uttrycks i neutrofila granulocyter<br />
men sägs vara något mer specifik än<br />
kalprotektin eftersom den inte uttrycks i<br />
monocyter, makrofager och epitelceller.<br />
Flera proteiner från eosinofila granulocyter<br />
studeras i samband med tarminflammation<br />
som potentiella markörer för IBD.<br />
Likväl är ingen av markörerna som står<br />
till förfogande idag specifik markör för IBD<br />
vilket innebär att jakten på den <strong>perfekta</strong><br />
markören fortsätter.<br />
Referenser<br />
1. Functional bowel disorders and irritable<br />
bowel syndrome in Europe.<br />
Delvaux M. Aliment Pharmacol Ther<br />
2003; 18 Suppl 3: 75-9<br />
2. Assessment of the neutrophil dominating<br />
protein Calprotectin in feces. A<br />
methodologic study<br />
Roseth et al., Scandinavian Journal of<br />
Gastroenterology, 1992:27 (9): 792-8<br />
3. Release and quantification of leukocyte<br />
derived protein (L1).<br />
Fagerhol MK et al., Scand. J. Haematol.<br />
1980; 24:393-8<br />
4. Antimicrobial actions of calcium binding<br />
leucocyte L1 protein, Calprotectin<br />
Steinback et al., Lancet 1990; 336:<br />
763-65<br />
5. Correlation between faecal excretion<br />
of indium-111-labelled granulocytes and<br />
Calprotectin, a granulocyte marker protein,<br />
in patients with inflammatory bowel<br />
disease<br />
Roseth et al., Scandinavian Journal of<br />
Gastroenterology, 1999:34 (1): 5 0-4<br />
6. Fecal Calprotectin levels in healthy<br />
children studied with an improved assay<br />
Fagerberg et al., Journal of Pediatric<br />
Gastroenterology and Nutrition, 2003;<br />
37(4): 468-72<br />
7. Diagnostic precision of fecal<br />
Calprotectin for inflammatory bowel disease<br />
and colorectal malignancy<br />
Von Roon et al., American Journal of<br />
Gastroenterology, 2000; 95(10): 2831-7<br />
8. Colorectal Inflammation is Well<br />
Predicted by Fecal Calprotectin in<br />
Children with Gastrointestinal Symptoms<br />
Fagerberg et al., Journal of Pediatric<br />
Gastroenterology and Nutrition 2005;<br />
40: 450-455<br />
9. Calprotectin, Calgranulin C, and<br />
Other Members of the S100 Protein<br />
Family in Inflammatory Bowel Disease<br />
Manolakis et al., Dig Dis Sci, 2011;<br />
56:1601-11