Symposium över medicinsk isotopdiagnostik - Svensk Förening för ...

STUDIER MED ISOTOPMii.RKTA ÄGGVITEÄMNEN
Gunnar Birke
och
Börje OJ.hagen
Konung Gustaf V:s Forskningsinstitut, Stockholm
Metodologiskt väsentliga detaljer som måste beaktas vid studier
med isotopmärkta proteiner är särskilt följande,
För det första måste man isolera det protein man skall studera i
mycket ren form och särskilt viktigt är att isoleringen sker på sådant sätt
att inte någon denaturation sker. Det är självklart att även märkningen
måste utföras på ett skonsamt sätt så att inte heller där någon denatura­
tionsrisk uppträder, Av de isoleringsmetoder för pi·oteiner, som existerar,
har det visat sig att fällningsf'Örfaranden och elektrofores bör undvikas. I
regel är proteinet känsligare ju större molekylvikt det har. Bäst är att an-·
vända kromatografi på cellulosajonbytare eller gelfiltrering i sephadex­
kolonner. Vi har med den senare metoden lyckats få f!'am ett rent 7S-gamma­
globulin, som inte visar några tecken på denaturation. Vad beträffar själva
märkningen så är givetvis valet av lämplig isotop viktigt, Man fordrar av
isotopen som skall användas:
att man kan märka proteinet utan denaturationsrisk
att det märkta proteinet till alla delar uppför sig som det nativa
att isotopen är så starkt bunden till proteinet att den inte kan
lossna annat än vid proteinmolekylens nedbrytning
att isotopen inte i kroppen kan på nytt märka något protein
utan den skall snabbt utsöndras
att halveringstiden för isotopen varken är för kort eller för
lång för den studie som skall göras
att den har en sådan strålning att den lätt kan mätas men att
den inte är av sådan art att proteinet eller patienten kan
skadas av den.
Dessa kriterier uppfylles för närvarande bäst av J 1 25, Utom denna isotop
användes även J 131 , som dock har den stora nackdelen att dess betastrålning
så småningom denaturerar det märkta proteinet. Man kan således inte använda
ett J 131 -märkt protein mer än hög.co tre veckor ffö· metaboliska studier
Rl.