You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Enzymaktivering Cykling Slutlig förlängning<br />
95 °C 95 °C<br />
15 min 30 sek.<br />
59 °C<br />
Omgivande temperatur 1 min 30 sek.<br />
26 cykler<br />
72 °C 72 °C<br />
1 min 30 sek. 30 min<br />
2. En negativ (vatten) kontroll måste ingå i varje PCR-körning. Det kan även anses<br />
lämpligt att inkludera andra kontroller, t.ex. positiv normal (medföljande DNA-kontroll) och<br />
positiv trisomikontroll (DNA medföljer ej).<br />
3. Tina ett tillräckligt antal ampuller med <strong>QST*R</strong>-reaktionsblandning, som i förväg har<br />
delats upp i alikvoter, för antalet prover och kontroller som ska köras (se anteckning<br />
under Tillhandahållet material) och centrifugera ampullerna vid 12 000 g i 10 sekunder.<br />
4. Använd separata pipettspetsar och tillsätt 2,5 µl med analys-DNA till en provampull<br />
som innehåller 10 µl <strong>QST*R</strong>-reaktionsblandning och blanda genom att pipettera upp och<br />
ned. Gör detta för alla prover som ska analyseras.<br />
Tillsätt inte DNA till PCR-ampullen för den negativa kontrollen. Tillsätt istället 2,5 µl sterilt<br />
destillerat vatten.<br />
Anm. Var noga med att inte kontaminera PCR-reaktionen med något Insta<strong>Gen</strong>e-resin.<br />
5. Centrifugera ampullerna kortvarigt tills all vätska finns på botten av varje ampull.<br />
6. Placera alla ampullerna stadigt i blocket på den termiska cyclern. Starta<br />
aktiveringsprogrammet på 95 °C följt av amplifieringsprogrammet (se steg 1).<br />
7. När amplifieringsprogrammet är klart kan proverna förvaras vid rumstemperatur över<br />
natten eller vid 2–8 °C i upp till 7 dagar innan de analyseras med kapillärelektrofores.<br />
AN000BY001SV Rev.07/2012 Sida 11 av 36
Change language