2005-08-13 - EUR-Lex

▼B
5. METOD
För röda viner med höga halter av fenolföreningar rekommenderas
förbehandling med PVPP:
Slamma upp ca 0,2 g PVPP i vatten och låt stå i 15 minuter. Filtrera
genom ett veckfilter.
Häll 10 ml vin i en 50 ml konisk kolv, tillsätt fuktad PVPP som
skrapats av från filtret med en spatel. Skaka om i två till tre minuter.
Filtrera.
Spektrofotometern ställs in på våglängden 340 nm. Bestämning sker
med 1 cm kuvetter med luft som nollabsorbansstandard (referens,
ingen kuvett i strålgången). Sätt följande till 1 cm kuvetterna:
Referenskuvett
(ml)
Lösning 2.1 1,00 1,00
Lösning 2.2 0,10 0,10
Prov — 0,20
Dubbeldestillerat vatten 2,00 1,80
Lösning 2.3 0,02 0,02
Provkuvett
(ml)
Blanda och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna
(A 1 ) efter ca fem minuter.
Tillsätt:
Lösning 2.4 0,02 ml 0,02 ml
Blanda och vänta till dess att reaktionen är avslutad (ca fem minuter)
och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna
(A 2 ).
Beräkna absorbansdifferensen (A 2 − A 1 ) för referens- och provkuvetterna,
ΔA R och ΔA P .
Beräkna slutligen skillnaden mellan dessa differenser:
ΔA =ΔA D − ΔA T
Anmärkning:
Den tid som krävs för enzymerna att verka kan variera mellan serierna
och värdet ovan anges endast som vägledning. Värdet bör bestämmas
för varje serie.
6. REDOVISNING AV RESULTATEN
Citronsyrahalten anges i milligram per liter och avrundas till närmaste
heltal.
6.1 Beräkningsmetod
Nedanstående allmänna formel används för beräkning av koncentrationen
i mg/l:
V
C ¼
ε
där
PM
d v
Δ A
V = provlösningens volym i ml (här 3,14 ml)
v = provvolymen i ml (här 0,2 ml)
PM = molekylvikten av den substans som skall bestämmas (för
vattenfri citronsyra M = 192,1)
d = kuvettens optiska väglängd i cm (här 1 cm)
ε = NADHs absorptionskoefficient (vid 340 nm, ε = 6,3 mmol −1
×1×cm −1 )
så att
C = 479 × ΔA
1990R2676 — SV — 13.08.2005 — 011.001 — 99