2005-08-13 - EUR-Lex

▼B
2.3.2 Kolorimetrisk bestämning
Häll 2 ml av provet, som beretts enligt 2.3.1, i två 25 ml kolvar, a resp
b, med proppar av slipat glas. Häll 5 ml paratoluidinlösning (2.2.2) i
vardera flaskan. Blanda och tillsätt 1 ml destillerat vatten till kolv b
(referens) och 1 ml barbitursyra (2.2.1) till kolv a. Skaka om för att
homogenisera. Överför innehållet i kolvarna till spektrofotometerkuvetter
med 1 cm optisk väglängd. Nollställ absorbansskalan med hjälp
av innehållet i kolv b för en våglängd om 550 nm. Följ absorbansvariationen
för innehållet i kolv a. Notera maximala värdet A som
uppnås efter 2-5 min.
Prov som innehåller mer hydroximetylfurfural än 30 mg/l skall spädas
före analys.
2.3.3 Beredning av kalibreringskurvan
Häll 2 ml av hydroximetylfurfurallösningarna med 5, 10, 20, 30 resp.
40 mg/l (2.2.4.) i två serier 25 ml kolvar, benämnda a och b, och
behandla dem enligt anvisningarna i 2.3.2.
Kurvan över variationen av absorbansen med halten av hydroximetylfurfural
i mg/l är en rak linje som skär igenom nollpunkten.
2.4 Redovisning av resultaten
Halten av hydroximetylfurfural i renad koncentrerad must anges i mg/
kg av den totala sockerhalten.
2.4.1 Beräkningsmetod
Halten C av hydroximetylfurfural i mg/l i analysprovet är lika med den
koncentration på kalibreringskurvan som motsvarar den för provet
bestämda absorbansen A.
Halten av hydroximetylfurfural i mg/kg av den totala sockerhalten blir:
250 C
P
P = den totala sockerhalten i procent (w/w) i den renade koncentrerade
musten.
3. HPLC (VÄTSKEKROMATOGRAFI)
3.1 Apparatur
3.1.1 HPLC-apparat med
— injektor, 5 eller 10 μl,
— spektrofotometerdetektor för bestämning vid 280 nm,
— kolonn av oktadecylbunden silica (tex Bondapak C 18 — Corasil,
Waters Ass.),
— skrivare, eventuellt integrator.
Den mobila fasens flödeshastighet skall vara 1,5 ml/min.
3.1.2 Membranfiltreringsapparat med pordiameter 0,45 μm.
3.2 Reagenser
3.2.1 Dubbeldestillerat vatten.
3.2.2 Metanol, CH 3 OH, destillerat eller av HPLC-kvalitet.
3.2.3 Ättiksyra, CO 3 COOH (ρ 20 = 1,05 g/ml).
3.2.4 Mobil fas: vattenmetanol (3.2.2), ättiksyra (3.2.3) som i förväg
filtrerats genom ett membranfilter (0,45 μm), (40 — 9 — 1 v/v).
Den mobila fasen skall beredas dagligen och avgasas före användning.
3.2.5 Referenslösning av hydroximetylfurfural, 25 mg/l (v/v).
Häll 25 mg noggrant vägd hydroximetylfurfural, C 6 H 3 O 6 , i en 100 ml
mätkolv och fyll upp till märket med metanol (3.2.2). Späd denna
lösning 1:10 med metanol (3.2.2) och filtrera genom membranfilter
(0,45 μm).
1990R2676 — SV — 13.08.2005 — 011.001 — 173