2005-08-13 - EUR-Lex

▼B
RUTINMETOD
21. TOTAL HALT AV ÄPPELSYRA
1. PRINCIP
Äppelsyra som separeras med en anjonbytarkolonn bestäms kolorimetriskt
i eluatet genom bestämning av den gula färg som bildas med
kromotropsyra i närvaro av koncentrerad svavelsyra. Korrektion för
orenheter görs genom att dra ifrån den absorbans som erhålls med
86 % svavelsyra och kromotropsyra (äppelsyra reagerar inte vid dessa
syrakoncentrationer) från den absorbans som erhålls vid användning av
96-procentiga syror.
2. APPARATUR
2.1. Glaskolonn, ca 250 mm lång, 35 mm innerdiameter, med avtappningskran.
2.2. Glaskolonn, ca 300 mm lång, 10-11 mm innerdiameter, med avtappningskran.
2.3. Termostatreglerat vattenbad, 100 °C.
2.4. Spektrofotometer med 10 mm kuvetter för absorbansbestämning vid
420 nm.
3. REAGENSER
3.1. Starkt basisk jonbytarharts (t.ex. Merck III).
3.2. Natriumhydroxid, 5 % (w/v).
3.3. Ättiksyra, 30 % (w/v).
3.4. Ättiksyra, 0,5 % (w/v).
3.5. Natriumsulfatlösning (Na SO ),1 0 % (w/v).
2 2
3.6. Koncentrerad svavelsyra, 95-97 % (w/w).
3.7. Svavelsyra, 86 % (w/w).
3.8. Kromotropsyra, 5 % (w/v).
Bered en färsk lösning före varje bestämning genom att lösa 500 mg
natriumkromotropat (C H Na O S ,2HO) i 10 ml destillerat vatten.
10 6 2 8 2 2
3.9. DL-äppelsyralösning, 0,5 g/l.
Lös 250 mg äppelsyra (C H O ) i natriumsulfatlösning (10 %). Fyll
4 6 5
upp till 500 ml med natriumsulfatlösning (10 %) (3.5).
4. METOD
4.1 Beredning av jonbytarharts
Placera en bomullstuss som är indränkt med destillerat vatten på
kolonnens botten (35 × 250 mm) ovanför avtappningskranen. Häll en
suspension av jonbytarharts i glaskolonnen. Vätskan bör nå 50 mm
över hartsens översta nivå. Skölj med 1 000 ml destillerat vatten.
Tvätta kolonnen med natriumhydroxidlösning (5 %). Låt rinna av så
att nivån är 263 mm ovanför hartsens översta nivå, tvätta ytterligare
två gånger med 5 % natriumhydroxid och låt stå i en timme. Tvätta
kolonnen med 1 000 ml destillerat vatten. Fyll kolonnen igen med
ättiksyra (30 %), låt rinna av till 2-3 mm från kolonnens översta del
och tvätta ytterligare två gånger med ättiksyra (30 %). Låt stå i minst
24 timmar före användning. Förvara jonbytarhartsen i ättiksyra (30 %)
för senare analyser.
4.2 Beredning av jonbytarkolonn
Placera en bomullstuss på kolonnens botten (11 × 300 mm) ovanför
kranen. Häll i suspensionen av jonbytarharts (beredd enligt 4.1) till en
nivå av 10 cm. Öppna kranen och låt ättiksyralösningen (30 %) rinna
ut till en nivå 2-3 mm ovanför hartsens översta nivå. Tvätta med 50 ml
ättiksyra (0,5 %).
4.3 Separering av DL-äppelsyra
Häll 10 ml vin eller must i kolonnen (beredd enligt 4.2). Låt en droppe
i taget rinna ut (i genomsnitt en droppe per sekund) och hejda flödet
när nivån är 2-3 mm från hartsens översta nivå. Tvätta kolonnen med
1990R2676 — SV — 13.08.2005 — 011.001 — 113