Biochimie - Lucrari practice - PIM Copy

Anca Mihaela Mocanu Camelia ŞoldeaCorina CernătescuUniversitatea Tehnică Gh. Asachi IaşiBIOCHIMIE- lucrări practice -Editura PIM2008

ISBN: 978-606-520-174-3

CUPRINSI. NORME GENERALE DE LUCRU IN LABORATORMĂSURI DE PROTECTIA MUNCII.......................................................I.1. Reguli generale....................................................................................I.2. Manipularea substanţelor toxice, caustice,inflamabile şi explozive......................................................................I.2.1. Manipularea substanţelor toxice şi caustice...............................I.2.2. Manipularea substanţelor inflamabile şi explozive...................I.3. Manipularea aparatelor de laborator cu acţiune electrică...................II. PREPARAREA SOLUŢIILOR ..............................................................II.1. Condiţii de preparare şi de păstrare....................................................II.2. Soluţii tampon...................................................................................III. METODE CROMATOGRAFICE APLICATE LAPURIFICAREA ŞI IDENTIFICAREA BIOMOLECULELOR...............III.1. Aspecte generale..............................................................................III.2. Cromatografia pe hârtie şi cromatografia în strat subţire................III.2.1. Cromatografia pe hârtie.......................................................III.2.2. Cromatografia în strat subţire.............................................III.3. Gaz cromatografia ( GC) ................................................................III.4. Cromatografia pe coloană................................................................III.5. Cromatografia pe schimbători de ioni..........................................III. 6. Cromatografia de excluziune cu gel................................................IV. AMINOACIZI..........................................................................................IV.1. Reacţii de recunoaştere....................................................................IV.2. Titrarea aminoacizilor (Metoda Sörensen)......................................IV.3. Separarea aminoacizilor prin cromatografie în strat subţire............IV.4. Separarea aminoacizilor dintr-un amestecprin cromatografie pe hârtie............................................................IV.5. Separarea aminoacizilor legaţi din culturile deMycobacterium tuberculosis şi Mycobacterium paratuberculosisprin cromatografie descendentă şi circulară....................................IV.6. Separarea aminoacizilor liberi şi legaţi din plante de cultură..........IV.7. Obţinerea aminoacizilor prin hidroliza proteinelor..........................11334455688101011121414161818212427283031

V. PROTEINE................................................................................................V.1. Reacţii de recunoaştere.....................................................................V.2. Caseina – izolare şi identificare........................................................V.3. Determinarea proteinelor din plante..................................................VI. ZAHARIDE.............................................................................................VI.1. Monozaharide..................................................................................VI.1.1. Reacţii de recunoaştere........................................................VI.1.1.1. Reacţii de culoare....................................................VI.1.1.2.Acţiunea reducătoare a monozaharidelor.................VI.1.1.3.Reacţia cu fenilhidrazina..........................................VI.1.2. Oxidarea aldozelor la acizi zaharici.....................................VI.1.3. Esterificarea monozaharidelor.............................................VI. 1.4. Reacţia Salivanov de diferenţierea cetozelor de aldoze...........................................................VI. 1.5. Dozarea glucidelor reducătoare..........................................VI.2. Oligo–şi polizaharide.............................................................................VI.2.1. Hidroliza zaharozei.............................................................VI.2.2. Dozarea zaharozei................................................................VI.2.3. Dozarea zahărului după metoda Bertrand............................VI.2.4. Determinarea amidonului din plante....................................VI.2.5. Hidroliza amidonului...........................................................VI.2.6. Zaharificarea amidonului.....................................................VI.2.7. Determinarea celulozei din plante.......................................VII. LIPIDE, GLICERIDE, ACIZI GRAŞI, SĂPUNURI.............................VII.1. Reacţii caracteristice pentru gliceride...........................................VII.1.1. Punerea în evidentă a glicerinei din grăsimi prinformarea acroleinei...........................................................VII.1.2. Punerea în evidentă a acizilor graşi din grăsimiprin formarea săpunurilor..................................................VII.2. Obţinerea acizilor graşi din săpunuri...........................................VII.3. Proprietăţile săpunurilor..............................................................VII.4. Reacţii ale grăsimilor nesaturate..................................................VII.4.1. Determinarea indicelui de saponificare...........................VII.4.2.Determinarea indicelui de iod...........................................32323538424242424647484950515656575860606263666666666768697070

VII.5. Determinarea indicelui de refracţie al grăsimilor........................VII.6. Determinarea grăsimii brute din materialul biologic..................VII.7. Extracţia şi identificarea acizilor graşidin uleiul de porumb...................................................................VII.8. Analiza lipidelor..........................................................................VIII. ACIZI NUCLEICI, NUCLEOTIDE, BAZE AZOTATE......................VIII.1. Analiza cromatografică a bazelor azotate..............................VIII.1.1. Separarea bazelor purinice şi pirimidinice din aciziinucleici izolaţi din plantulele de grâu şi porumb.......VIII.2. Hidroliza nucleoproteidelor.......................................................VIII.3. Separarea cafeinei din frunzele de ceai.....................................IX. VITAMINE...............................................................................................IX.1. Dozarea vitaminei C din fructe şi legume......................................IX.2. Dozarea α- şi β-carotinei ( provitamina A)din fructe şi legume.......................................................................IX.3. Analiza vitaminei A din margarină……………………………....BIBLIOGRAFIE.............................................................................................73757679838686899093939596101