2 - Akademos - Academia de Ştiinţe a Moldovei

2 - Akademos - Academia de Ştiinţe a Moldovei 2 - Akademos - Academia de Ştiinţe a Moldovei

akademos.asm.md
from akademos.asm.md More from this publisher
12.07.2015 Views

AkademosSTUDIUL ŞIUTILIZAREAVARIABILITĂŢIIGENETICE ÎNAMELIORAREACALITĂŢII BOBULUILA SPECIA ZEA MAYS L.Membru corespondent al A.Ş.M.Andrei PALII,Universitatea Agrară de Stat din MoldovaSTUDYING AND USING OF GENETICS VA-RIABILITY IN BREEDING CORN (ZEA MAYSL.) FOR IMPROVED QUALITY OF KERNELSResults of more than 40 years efforts for increasingprotein content and its quality in kernels of maize aresummarized. Five new high lysine stocks containinggene o 2and two genotypes – gene fl 2were identified.In our studies we have found the complementary genecfl 2(complementary fl 2) in some lines which alters theexpression of gene fl 2.Under the influence of cfl 2in thepresence of one allele fl 2we can see a considerable increaseof methionine content (by 20-25%) and an increaseof lysine content (by 10-15%).Nutritive value of corn kernels can be improvedto a significant degree by using the biochemical effectof opaque-2 endosperm mutation. Results of studies ofthe possibilities of improving of opaque-2 endospermphysical texture by the obtaining of double recessiveso 2su 2, o 2wx 1and selection of o 2- forms with modifiedendosperm showed that, the latest direction is morepreferable. Use of the opaque-2 mutation in breedingof maize has shown the possibility to develop high lysinehybrids similar in yield as normal.IntroducereÎn condiţiile exploziei demografice din a douajumătate a secolului XX, devine tot mai acut deficitulglobal în alimentaţia umană concomitent cu extindereasubnutriţiei pe areale în creştere continuă.Dată fiind contribuţia hotărâtoare a cerealelor înasigurarea hranei, omenirea şi-a îndreptat atenţia înmai mare măsură asupra câtorva culturi: grâu, orezşi porumb. În această ordine de idei, importanţa porumbuluiîn alimentaţia umană, ca furaj în zootehnieşi ca materie primă în industrie, este incontestabilă.Datorită particularităţilor sale biologice (alogamie– caracteristică pentru speciile de plante monoice,coeficientul înalt de reproducţie a seminţelor,numărul redus de cromozomi care reprezintă doar10 grupe de linkaj etc.), la începutul secolului XXporumbul devine un obiect clasic al studiilor de genetică.În acelaşi timp, au fost obţinute şi succeseremarcabile în ameliorarea porumbului. Graţie folosiriifenomenelor de heterozis şi androsterilitate nucleo-citoplasmicăa devenit posibilă obţinerea unorhibrizi de porumb cu un înalt potenţial genetic, ceasigură o recoltă de peste 150 – 200 q/ha.Concomitent cu ameliorarea capacităţii de producţiea porumbului o atenţie deosebită se acordăşi îmbunătăţirii calităţii bobului. Valoarea medie acompoziţiei chimice a boabelor de porumb este următoarea:proteine 10,05%, grăsimi 4,67%, glucide68,17% şi cenuşă 1,45%. După cum se ştie, compoziţiachimică a boabelor de porumb în mare măsurădepinde de factorii genetici (grupa botanică, soi, linie,hibrid) şi de condiţiile mediului de cultivare.În cercetările noastre drept direcţie strategicăde cercetare a fost luată variabilitatea genetică aspeciei Zea mays L. şi posibilităţile de utilizare a eiîn ameliorarea calităţii bobului.Printre premisele de bază, care ne-au determinatsă alegem această direcţie de cercetare, au servit:- realizările remarcabile ale cercetătorilor dela Staţiunea experimentală din Illinois (SUA) care,după circa 70 de generaţii de selecţie din soiul iniţialBurr White cu un conţinut iniţial de 10% proteineîn bob, au obţinut forme cu un conţinut de proteinecuprins între 4,4 şi 26,6% (1);- primele succese înregistrate în cercetărileefectuate în condiţiile Republicii Moldova de cătreA. Kovarskii şi B. Pucalov (1961), care prin metodaselecţiei individuale au reuşit să majoreze conţinutulde proteină în bob cu 3-4% la soiurile locale deporumb Portocaliu şi Moldovenesc Oranj (2);- descoperirea efectului biochimic al genelorrecesive opaque-2 (o 2) şi fl oury-2 (fl 2), care în starehomozigotă determină consistenţa făinoasă a endospermuluişi modifică compoziţia chimică a acestuia,determinând un conţinut sporit de lizină şi triptofanîn proteina din bob (3, 4).Obiectivele de bază ale cercetărilor rezidă înstudiul variabilităţii genetice al speciei Zea maysL., crearea materialului iniţial pentru ameliorare şiobţinerea în baza acestuia a unor hibrizi speciali deporumb cu un conţinut sporit de lizină în proteină,conţinut de proteine, amilopectină în bob etc.În lucrarea de faţă ne-am propus o analiză succintăa rezultatelor obţinute ca urmare a cercetărilorefectuate pe parcursul a 40 de ani, privind utilizareaefectului biochimic al unor mutaţii ale endospermuluiîn procesul de ameliorare a calităţii bobului deporumb. Cercetările au fost iniţiate sub conducerea66 - nr. 4(11), decembrie 2008

Ştiinţă Genetică şi educaţieacademicianului AŞM A. Kovarskii şi efectuate încadrul Secţiei de Genetică a plantelor a AŞM (1968– 1973), Institutului de Cercetări Ştiinţifice pentruPorumb şi Sorg (1974 – 1975) şi Universităţii Agrarede Stat din Moldova (1976 – până în prezent).Materialul şi metoda de cercetareÎn calitate de material biologic iniţial am utilizatdiverse linii consangvinizate, soiuri-populaţii, sursegenetice ale mutaţiilor structurii endospermului (o 2,fl 2, su 1, su 2, wx 1, ae, etc.), donori ai conţinutului înaltde proteine în bob (Illinois High Protein) şi alte surseprimite din colecţia mondială a Institutului Unionalde Fitotehnie „N. Vavilov” din St. Petersburg.Transferarea genelor mutante în scopul obţineriiliniilor – analoage s-a realizat prin metoda backcrosstimp de 5-6 generaţii succesive. Liniile consangvinizate,bogate în proteină, lizină şi amilopectinăau fost obţinute prin autopolenizare şi selecţieindividuală repetată.Principalele caracteristici studiate au fost celeprivind proprietăţile fizice ale structurii endospermului,capacitatea de producţie, exprimată în q/hboabe cu 14% umiditate, perioada de vegetaţie, conţinutulde proteine şi lizină, amidon şi amilopectinăîn boabe.Materialul pentru analizele biochimice a fostobţinut prin reproducerea controlată sub izolatoare.Conţinutul de proteine a fost determinat prin metodamicro-Kjeldahl şi transformarea azotului total înproteină prin înmulţirea cu coeficientul 6,25. Conţinutulde lizină şi al altor aminoacizi a fost determinatla amino-analizatoarele de tipul 6020A şi HD– 1200.Prelucrarea datelor principale obţinute în experienţes-a efectuat prin analiza varianţelor. Rezultatelesegregării în F 2au fost apreciate prin testul ξ 2 .Rezultatele cercetărilor şi discuţiiCrearea materialului iniţial pentru ameliorareaporumbului la calitatea bobului.Începând cu anul 1968 şi până în prezent, a fostcreată o colecţie de circa 460 linii analoage, în genotipulcărora au fost încorporate diverse gene (o 2,fl 2, su 1, su 2, wx 1, ae, etc.) ce determină structura fizicăa endospermului şi modificări în complexul glucido-proteic.Această colecţie se foloseşte pe larg înprogramele de genetică şi ameliorare a porumbuluila calitatea bobului, atât la noi în ţară, cât şi dupăhotare.Pentru asigurarea unei diversităţi genetice maimari, în procesul de ameliorare, în paralel cu creareamaterialului iniţial nou, utilizând la început sursegenetice de provenienţă americană, am efectuatun studiu detaliat al resurselor genetice colecţionatede către acad. A. Kovarskii şi colaboratorii săi înanii 1945-1949, în condiţiile Republicii Moldova.În urma studierii a 678 probe, în cercetările noastrerealizate în colaborare cu T. Cialîc şiV. Micu aufost depistate 5 surse genetice noi care determinăun conţinut ridicat de lizină, ce posedă mutaţiaopaque-2 şi două surse - mutaţia fl oury-2 (5).În procesul de creare a liniilor-analoage, pe bazamutaţiei fl 2, am descoperit o genă nouă, pe care amnumit-o cfl 2(complementary fl oury-2 (6). Luând înconsideraţie natura triploidă a endospermului, amconstatat că prezenţa în genotipul endospermului adouă alele cfl 2şi doar a unei alele fl 2condiţioneazăaspectul opaque al bobului. Concomitent am constatatcă gena cfl 2în prezenţa unei alele fl 2contribuiela majorarea conţinutului de metionină (20-25%)şi lizină (10-15%) în boabe, comparativ cu formeleporumbului comun (7).Ameliorarea conţinutului de lizină înproteinele din endospermProblema ameliorării conţinutului de proteine înbob a fost şi rămâne în centrul atenţiei multor cercetători.În urma investigaţiilor biochimice s-a constatatcă, de regulă, ponderea proteinelor în bobul deporumb este de 80% în endosperm, 17% în embrionşi 3% în părţile periferice ale bobului. Dintre proteine,prolaminele (zeina-fracţie alcool-solubilă estefoarte săracă în unii aminoacizi esenţiali cum ar filizina şi triptofanul) reprezintă cea mai mare parte(29,9%), fiind urmată de gluteline (27,9%), albumine(27,1%) şi globuline (15,7%).Folosirea metodelor tradiţionale de ameliorare(selecţie, hibridare interspecifică, poliploidie, mutagenezăindusă) a contribuit la obţinerea unor formede porumb cu un conţinut foarte bogat de proteine(18-28%). Numeroase cercetări au arătat însă că,odată cu sporirea conţinutului substanţelor proteiceîn endosperm, creşte respectiv şi conţinutul dezeină.Lucrările de ameliorare a calităţii proteinelordin porumb au luat o amploare mare în urma descopeririiefectului biochimic al genelor mutante recesiveopaque-2 (o 2) şi fl oury-2 (fl 2). Aceste geneîn stare homozigotă controlează structura făinoasă aendospermului şi condiţionează concomitent o acumularesporită de lizină şi triptofan în proteina dinbob (3,4).Deja în primii ani de cercetări ale formelor noide porumb create pe baza acestor gene, în diverseinstituţii au fost obţinute rezultate practice valoroase.În urma folosirii boabelor de porumb mutant înnr.4(11), decembrie 2008 - 67

Ştiinţă Genetică şi educaţieaca<strong>de</strong>micianului AŞM A. Kovarskii şi efectuate încadrul Secţiei <strong>de</strong> Genetică a plantelor a AŞM (1968– 1973), Institutului <strong>de</strong> Cercetări Ştiinţifice pentruPorumb şi Sorg (1974 – 1975) şi Universităţii Agrare<strong>de</strong> Stat din Moldova (1976 – până în prezent).Materialul şi metoda <strong>de</strong> cercetareÎn calitate <strong>de</strong> material biologic iniţial am utilizatdiverse linii consangvinizate, soiuri-populaţii, sursegenetice ale mutaţiilor structurii endospermului (o 2,fl 2, su 1, su 2, wx 1, ae, etc.), donori ai conţinutului înalt<strong>de</strong> proteine în bob (Illinois High Protein) şi alte surseprimite din colecţia mondială a Institutului Unional<strong>de</strong> Fitotehnie „N. Vavilov” din St. Petersburg.Transferarea genelor mutante în scopul obţineriiliniilor – analoage s-a realizat prin metoda backcrosstimp <strong>de</strong> 5-6 generaţii succesive. Liniile consangvinizate,bogate în proteină, lizină şi amilopectinăau fost obţinute prin autopolenizare şi selecţieindividuală repetată.Principalele caracteristici studiate au fost celeprivind proprietăţile fizice ale structurii endospermului,capacitatea <strong>de</strong> producţie, exprimată în q/hboabe cu 14% umiditate, perioada <strong>de</strong> vegetaţie, conţinutul<strong>de</strong> proteine şi lizină, amidon şi amilopectinăîn boabe.Materialul pentru analizele biochimice a fostobţinut prin reproducerea controlată sub izolatoare.Conţinutul <strong>de</strong> proteine a fost <strong>de</strong>terminat prin metodamicro-Kjeldahl şi transformarea azotului total înproteină prin înmulţirea cu coeficientul 6,25. Conţinutul<strong>de</strong> lizină şi al altor aminoacizi a fost <strong>de</strong>terminatla amino-analizatoarele <strong>de</strong> tipul 6020A şi HD– 1200.Prelucrarea datelor principale obţinute în experienţes-a efectuat prin analiza varianţelor. Rezultatelesegregării în F 2au fost apreciate prin testul ξ 2 .Rezultatele cercetărilor şi discuţiiCrearea materialului iniţial pentru ameliorareaporumbului la calitatea bobului.Începând cu anul 1968 şi până în prezent, a fostcreată o colecţie <strong>de</strong> circa 460 linii analoage, în genotipulcărora au fost încorporate diverse gene (o 2,fl 2, su 1, su 2, wx 1, ae, etc.) ce <strong>de</strong>termină structura fizicăa endospermului şi modificări în complexul glucido-proteic.Această colecţie se foloseşte pe larg înprogramele <strong>de</strong> genetică şi ameliorare a porumbuluila calitatea bobului, atât la noi în ţară, cât şi dupăhotare.Pentru asigurarea unei diversităţi genetice maimari, în procesul <strong>de</strong> ameliorare, în paralel cu creareamaterialului iniţial nou, utilizând la început sursegenetice <strong>de</strong> provenienţă americană, am efectuatun studiu <strong>de</strong>taliat al resurselor genetice colecţionate<strong>de</strong> către acad. A. Kovarskii şi colaboratorii săi înanii 1945-1949, în condiţiile Republicii Moldova.În urma studierii a 678 probe, în cercetările noastrerealizate în colaborare cu T. Cialîc şiV. Micu aufost <strong>de</strong>pistate 5 surse genetice noi care <strong>de</strong>terminăun conţinut ridicat <strong>de</strong> lizină, ce posedă mutaţiaopaque-2 şi două surse - mutaţia fl oury-2 (5).În procesul <strong>de</strong> creare a liniilor-analoage, pe bazamutaţiei fl 2, am <strong>de</strong>scoperit o genă nouă, pe care amnumit-o cfl 2(complementary fl oury-2 (6). Luând înconsi<strong>de</strong>raţie natura triploidă a endospermului, amconstatat că prezenţa în genotipul endospermului adouă alele cfl 2şi doar a unei alele fl 2condiţioneazăaspectul opaque al bobului. Concomitent am constatatcă gena cfl 2în prezenţa unei alele fl 2contribuiela majorarea conţinutului <strong>de</strong> metionină (20-25%)şi lizină (10-15%) în boabe, comparativ cu formeleporumbului comun (7).Ameliorarea conţinutului <strong>de</strong> lizină înproteinele din endospermProblema ameliorării conţinutului <strong>de</strong> proteine înbob a fost şi rămâne în centrul atenţiei multor cercetători.În urma investigaţiilor biochimice s-a constatatcă, <strong>de</strong> regulă, pon<strong>de</strong>rea proteinelor în bobul <strong>de</strong>porumb este <strong>de</strong> 80% în endosperm, 17% în embrionşi 3% în părţile periferice ale bobului. Dintre proteine,prolaminele (zeina-fracţie alcool-solubilă estefoarte săracă în unii aminoacizi esenţiali cum ar filizina şi triptofanul) reprezintă cea mai mare parte(29,9%), fiind urmată <strong>de</strong> gluteline (27,9%), albumine(27,1%) şi globuline (15,7%).Folosirea meto<strong>de</strong>lor tradiţionale <strong>de</strong> ameliorare(selecţie, hibridare interspecifică, poliploidie, mutagenezăindusă) a contribuit la obţinerea unor forme<strong>de</strong> porumb cu un conţinut foarte bogat <strong>de</strong> proteine(18-28%). Numeroase cercetări au arătat însă că,odată cu sporirea conţinutului substanţelor proteiceîn endosperm, creşte respectiv şi conţinutul <strong>de</strong>zeină.Lucrările <strong>de</strong> ameliorare a calităţii proteinelordin porumb au luat o amploare mare în urma <strong>de</strong>scopeririiefectului biochimic al genelor mutante recesiveopaque-2 (o 2) şi fl oury-2 (fl 2). Aceste geneîn stare homozigotă controlează structura făinoasă aendospermului şi condiţionează concomitent o acumularesporită <strong>de</strong> lizină şi triptofan în proteina dinbob (3,4).Deja în primii ani <strong>de</strong> cercetări ale formelor noi<strong>de</strong> porumb create pe baza acestor gene, în diverseinstituţii au fost obţinute rezultate practice valoroase.În urma folosirii boabelor <strong>de</strong> porumb mutant înnr.4(11), <strong>de</strong>cembrie 2008 - 67

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!