programul 4 “parteneriate in domeniile prioritare” - Institutul National ...

programul 4 “parteneriate in domeniile prioritare” - Institutul National ... programul 4 “parteneriate in domeniile prioritare” - Institutul National ...

12.07.2015 Views

PROGRAMUL 4 “PARTENERIATE IN DOMENIILEPRIORITARE” 2007-2013pentru ca în luna noiembrie să fie iniţiată conservarea microtuberculilor. Martie este lunadebutului cultivării în seră a microtuberculilor menţinuţi în frigider cu estimarea unieproducţii de 100000 minituberculi/meristem iniţial.Calendarul derulării acestui flux tehnologic este specific condiţiilor pedoclimatice aleţării noastre în scopul obţinerii unui ranadament crescut la preţurile de cost cele mai reduse.CONCLUZII SI RECOMANDǍRIPrezentul model experimental privind obţinerea de vitroplante de cartof prin metodebiotehnologice a fost elaborat pe baza respectǎrii exigenţelor standardizate privind stabilireaculturilor de explante vegetale „in vitro”, cu unele adaptari la condiţiile specifice alelaboratorului nostru. Pornind de la principiile generale ale tehnicilor de cultura „in vitro”, acǎror aplicabilitate a fost verificatǎ în cazul majoritǎţii speciilor, cercetǎrile noastre auurmǎrit stabilirea condiţiilor optime pentru dezvoltarea de culturi cu capacitatemorfogeneticǎ pronunţatǎ în vederea producerii materialului de plantat la cele 4 soiuri decartof luate in studiu (Christian, Magic, Roclas si Astral), cu eficienţǎ sporitǎ, prin metodebiotehnologice.Protocolul de lucru elaborat ca urmare a cercetǎrilor întreprinse privind cultivarea „invitro” a apexurilor caulinare prelevate de la lǎstarii obţinuţi prin forţarea tuberculilor, înanotimpul rece, pentru a dezvolta lăstari utilizaţi ca surse de explante în scopulmicroclonǎrii, întruneşte cerinţele impuse de realizarea creşterii eficiente „in vitro”, putând fiadaptat la micropropagarea unor soiuri de cartof.Cultura de apexuri meristematice de aproximativ 1 cm lungime, constând dinmugurele apical sau axilar şi o porţiune din internod este preferabilǎ culturii de meristeme dedimensiuni reduse (atunci când obiectivul nu constǎ în eliminarea virozelor), deoareceasigurǎ un procent mai mare de supravieţuire a explantelor în condiţiile „in vitro”, şi implicito ratǎ superioarǎ a regenerǎrii de vitroplante.Asepsizarea materialului biologic care serveşte ca sursǎ de explante se poate realizacu eficienţǎ optimǎ folosind produsele comerciale pe bazǎ de hipoclorit de sodiu şi surfactanţineionici (Domestos) care sunt ieftine, mai puţin poluante şi toxice comparativ cu cloruramercuricǎ, iar procentul de explante sǎnǎtoase şi viabile este în general de 100%.Mediul bazal Murashige–Skoog (1962) a reprezentat formula nutritivǎ optimǎ pentrustabilirea culturilor de apexuri meristematice si explante uninodale de cartof şi pentruregenerarea de vitroplante viguroase în cazul tuturor soiurilor studiate.59

PROGRAMUL 4 “PARTENERIATE IN DOMENIILEPRIORITARE” 2007-2013Suplimentarea mediului de inoculare numai fitohormoni de tipul auxinelor(AIA siANA) citochininelor (BAP si Kin) precum si cu acid giberelic conduce la obţinerea derezultate superioare în ce priveşte alungirea rapidǎ a lǎstarului, dezvoltarea de muguri silastari adventivi multipli dar in acelasi timp si dezvoltarea sistemului radicular.Insa procesul de tuberogeneza indus la nivelul explantelor uninodale se poate realizadoar in prezenta unei cantitati suplimentare de carbohidrati (50-70 g/l zaharoza) si subinfluenta factorilor fizici dirijati artificial prin alternarea perioadelor de temperatura sifotoperioada normala cu perioade de mentinere la intuneric continuu sitemperaturi de 10-15°C. De asemenea, concentraţia ridicată de citochinina BAP 2 mg/l şi respectiv de 2,5 mg/lutilizată în mediul de cultură a determinat formarea unui procent ridicat de 1-2 tuberculi peexplant, la soiurile Magic şi Roclas.Reţeta din varianta M3 elaborata din combinarea chinetinei (Kin-2mg/l) cu acidulnaftil acetic (NAA-0,01 mg./l NAA) nu a determinat obţinerea procesului de tuberizare lanivelul explantelor inoculate de cartof.In sistemele de regenerare “in vitro” caulogeneza se exprimǎ prin dezvoltarea destructuri unipolare reprezentate de muguri şi lǎstari, direct din explant sau via calus,citochininele având un rol esenţial în inducerea acestui tip de morfogenezǎ; prin detaşarealǎstarilor dezvoltaţi „in vitro” şi înrǎdǎcinarea acestora pe medii rizogene speciale pot firegenerate plante autonome, proces care stǎ la baza majoritǎţii tehnologiilor demicropropagare vegetativǎ la plante.Pe baza rezultatelor obţinute apreciem cǎ modelul experimental de microclonare princulturi de apexuri meristematice şi de obţinere a vitroplantelor de cartof, stabilit şi optimizatca urmare a cercetǎrilor noastre, constituie un procedeu de multiplicare randamental şireproductibil, care poate fi utilizat cu eficienţǎ în practicǎ.Aceste aspecte precum si elaborarea unui protocol de inducere a dezvoltarii unuinumar mult mai mare de microtuberculi constitue obiectivul de lucru pentru partenerul P2-USAMV in etapa urmatoare.Pe baza rezultatelor obţinute pana in prezent, apreciem cǎ modelul experimental demicroclonare prin culturi de apexuri meristematice şi de obţinere a vitroplantelor de cartof,stabilit şi optimizat ca urmare a cercetǎrilor noastre, constituie un procedeu de multiplicarerandamental şi reproductibil, care poate fi utilizat cu eficienţǎ în practicǎ.60

PROGRAMUL 4 “PARTENERIATE IN DOMENIILEPRIORITARE” 2007-2013Suplimentarea mediului de <strong>in</strong>oculare numai fitohormoni de tipul aux<strong>in</strong>elor(AIA siANA) citoch<strong>in</strong><strong>in</strong>elor (BAP si K<strong>in</strong>) precum si cu acid giberelic conduce la obţ<strong>in</strong>erea derezultate superioare în ce priveşte alungirea rapidǎ a lǎstarului, dezvoltarea de muguri silastari adventivi multipli dar <strong>in</strong> acelasi timp si dezvoltarea sistemului radicular.Insa procesul de tuberogeneza <strong>in</strong>dus la nivelul explantelor un<strong>in</strong>odale se poate realizadoar <strong>in</strong> prezenta unei cantitati suplimentare de carbohidrati (50-70 g/l zaharoza) si sub<strong>in</strong>fluenta factorilor fizici dirijati artificial pr<strong>in</strong> alternarea perioadelor de temperatura sifotoperioada normala cu perioade de ment<strong>in</strong>ere la <strong>in</strong>tuneric cont<strong>in</strong>uu sitemperaturi de 10-15°C. De asemenea, concentraţia ridicată de citoch<strong>in</strong><strong>in</strong>a BAP 2 mg/l şi respectiv de 2,5 mg/lutilizată în mediul de cultură a determ<strong>in</strong>at formarea unui procent ridicat de 1-2 tuberculi peexplant, la soiurile Magic şi Roclas.Reţeta d<strong>in</strong> varianta M3 elaborata d<strong>in</strong> comb<strong>in</strong>area ch<strong>in</strong>et<strong>in</strong>ei (K<strong>in</strong>-2mg/l) cu acidulnaftil acetic (NAA-0,01 mg./l NAA) nu a determ<strong>in</strong>at obţ<strong>in</strong>erea procesului de tuberizare lanivelul explantelor <strong>in</strong>oculate de cartof.In sistemele de regenerare “<strong>in</strong> vitro” caulogeneza se exprimǎ pr<strong>in</strong> dezvoltarea destructuri unipolare reprezentate de muguri şi lǎstari, direct d<strong>in</strong> explant sau via calus,citoch<strong>in</strong><strong>in</strong>ele având un rol esenţial în <strong>in</strong>ducerea acestui tip de morfogenezǎ; pr<strong>in</strong> detaşarealǎstarilor dezvoltaţi „<strong>in</strong> vitro” şi înrǎdǎc<strong>in</strong>area acestora pe medii rizogene speciale pot firegenerate plante autonome, proces care stǎ la baza majoritǎţii tehnologiilor demicropropagare vegetativǎ la plante.Pe baza rezultatelor obţ<strong>in</strong>ute apreciem cǎ modelul experimental de microclonare pr<strong>in</strong>culturi de apexuri meristematice şi de obţ<strong>in</strong>ere a vitroplantelor de cartof, stabilit şi optimizatca urmare a cercetǎrilor noastre, constituie un procedeu de multiplicare randamental şireproductibil, care poate fi utilizat cu eficienţǎ în practicǎ.Aceste aspecte precum si elaborarea unui protocol de <strong>in</strong>ducere a dezvoltarii unu<strong>in</strong>umar mult mai mare de microtuberculi constitue obiectivul de lucru pentru partenerul P2-USAMV <strong>in</strong> etapa urmatoare.Pe baza rezultatelor obţ<strong>in</strong>ute pana <strong>in</strong> prezent, apreciem cǎ modelul experimental demicroclonare pr<strong>in</strong> culturi de apexuri meristematice şi de obţ<strong>in</strong>ere a vitroplantelor de cartof,stabilit şi optimizat ca urmare a cercetǎrilor noastre, constituie un procedeu de multiplicarerandamental şi reproductibil, care poate fi utilizat cu eficienţǎ în practicǎ.60

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!