Metode analitice pentru unele antiinflamatoare ... - "Gr.T. Popa" Iasi

Etapele procedurii SPE sunt:
Condiţionarea (activarea): presupune umectarea cartuşului
cu solvent organic (de cele mai multe ori, metanol).
Echilibrarea: presupune îndepărtarea excesului de solvent
din faza de activare prin spălarea cu solventul în care este
preparată proba.
Trecerea probei prin cartuş: este necesar să se asigure
compatibilitatea între probă şi analiţii de interes.
Spălarea: se îndepărtează eventualele interferenţe,
reţinându-se pe cartuş doar analiţii de interes.
Eluţia: compuşii de interes sunt desorbiţi cu ajutorul unui
solvent adecvat.[142]
Procedeu de lucru: Se prepară o soluţie stoc de concentraţie
10µg/ml în acid clorhidric 0,1N. Se prepară soluţii de lucru în
domeniul de concentraţii 1÷10 µg/ml.
1 ml din fiecare soluţie stoc se trece prin coloana
precondiţionată în prealabil (spălare cu 5 ml metanol, şi apoi cu 5 ml
apă distilată). Se reglează debitul la 6-7 picături/min. Piroxicamul
este eluat de pe coloană cu 1 ml metanol în eprubete gradate.
Soluţiile obţinute se prelucrează conform metodei, (după adăugarea
tuturor reactivilor, volum final de 5 ml, concentraţia echivalentă a
piroxicamului, respectiv a produsului de reacţie, se află în intervalul
1,0÷10,0µg/probă respectiv 0,2 ÷ 2,0 µg/ml.). Dacă este cazul se
completează volumul la 5 ml cu metanol. Utilizând ecuaţia curbei de
calibrare obţinută la liniaritatea metodei se calculează regăsirea şi
randamentul de extracţie (Media randament = 80,83%).
Procedeul se aplică şi pentru probe de urină îmbogăţite cu
soluţie etalon de piroxicam şi se constată că valoarea medie a
conţinutului în µg/ml (Regăsire medie= 98,53%) se încadrează în
intervalul 95-105% aşa cum cer normele europene.
III.2. Determinarea spectrofotometrică de absorbţie în vizibil a
tenoxicamului
Principiul metodei: tenoxicamul reduce fericianura de potasiu
în mediu acid la ferocianură care cu ionii Fe 3+ , formează ferocianura
ferică, compus colorat în albastru ce prezintă un maxim de absorbţie
la 760 nm.
14