evaluari biochimice in explorarea hepatica

More documents

Recommendations

Info

Valori scăzute : deficit de piridoxal fosfat ce apare în sarcină, afecţiuni hepatice secundare consumului de alcool. neoplazii infecţii urinare În majoritatea afecţiunilor hepatice sunt necesare dozări seriate ale enzimelor, valoarea acestora indicînd evoluţia clinică . DETERMINAREA ACTIVITĂŢII GAMMA-GT ( -GT) (metoda cinetică) Principiul metodei: Determinarea activităţii -GT se face folosind ca substrat L- - glutamil-3-carboxi-4nitroanilida. Reacţia este următoarea: HOOC CH CH2 NH 2 CH 2 C=O NH NO 2 H2N CH2 C=O CH 2 L-Gama-glutamil p-nitro-anilida Glicil-glicina HOOC CH CH2 CH2 C=O NH 2 NH CH2 C=O HN CH 2 COOH HN COOH H2N NO 2 L-Gama-glutamil glicil-glicina p-nitro-anilina Creşterea absorbanţei pe măsură ce se formează 4-nitroanilina este direct proporţională cu activitatea -GT. Citirile se efectuează la 405 nm.
Aparatură: Spectrofotometru Cronometru Cronometru Reactivi: 1. Soluţie glicilglicina in tampon TRIS pH=8,25, 100 mmol 2. Soluţie substrat L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida, de concentraţie 2,9 mmol/1 Mod de lucru: 1. Prepararea soluţiei de lucru: Se amestecă 5 părţi reactivul 1 cu o parte reactiv 2. Această soluţie este stabilă 7 zile la temperatură de 20-25 C sau 28 de zile la 2-8 C. 2. Dozarea propriu-zisă: Soluţie de lucru ( l) 500 Ser ( l) 50 Se agită şi citesc absorbantele la 1, 2 şi 3 minute la Calcularea rezultatelor: 1, Se face diferenţa între prima şi ultima citire şi se împarte la numărul de minute citite. Se 2 si 3 notează cu ( A/min). Concentraţia -GT (U/l) = ( A/min) x 1152. minute Intervale de referinţă: 25 C 30 C 37 C Bărbaţi 6-28 U/l 8-38 U/l 11-50 U/l Femei 4-18 U/l 5-25 U/l 7-32 U/l Observaţii: Serul folosit trebuie să fie proaspăt şi nehemolizat, iar recoltarea se face pe citrat, oxalat sau EDTA. Linearitatea reacţiei se menţine până la valori de 280 U/l. Peste aceste valori se recomandă diluarea a 0,1 ml probă cu 0,9 ml ser şi se înmulţeşte rezultatul cu 10.
Page 1 and 2: ACTIVITATE EXPERIMENTALĂ DETERMINA
Page 3 and 4: Intervale de referinţă: 25 C 30 C
Page 5: Dozarea ALAT şi ASAT rămîne cea
Page 9 and 10: DETERMINAREA ACTIVITĂŢII FOSFATAZ
Page 11: Nu s-au observat interferenţe pent

evaluari biochimice in explorarea hepatica

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?