evaluari biochimice in explorarea hepatica

Reactivi:
1. Soluţie substrat: aspartat 200 mM în tampon fosfat 100 mM şi pH =7,4
2. Amestec de: -cetoglutarat 12 mM, NADH + +H + 0,2 mM, LDH 10mg/l, MDH 10
mg/l în tampon fosfat 100 mM pH=7,4
Mod de lucru:
În momentul începerii determinărilor se amesteca soluţia 1 cu 2 (4 părţi reactiv 1 cu 1
parte reactiv 2 ).
Amestec de reactivi 1+2 (µl) 1000
Ser (µl) 250
Se agită bine şi se citesc extincţiile la lungimea de undă de 366 nm în cuve de 1 cm.
Citirea se face din minut în minut timp de 3 minute la 25 C
Calcularea rezultatelor:
Se face diferenţa între prima şi ultima citire şi se împarte la numărul de minute
citite. Se notează cu ( A/min). Concentraţia ALAT în U/l = ( A/min) x 1520.
Observaţii:
Dacă valoarea ( A/min) creşte mai mult de 0,08 se recomandă diluarea a 0,1 ml probă cu
0,9 ml ser şi se înmulţeşte rezultatul cu 10. Citirile se pot efectua şi la 30 C şi 37 C.
Intervale de referinţă:
25 C 30 C 37 C
Bărbaţi pînă la 18 U/l pînă la 25 U/l pînă la 37 U/l
Femei pînă la 15 U/l pînă la 21 U/l pînă la 31 U/l
Interpretarea rezultatelor:
Permeabilitatea membranei celulare hepatice creşte gradat funcţie de suferinţă.
Investigaţiile biochimice evidenţiază creşteri în ser a unor enzime celulare (ALAT, ASAT, LDH,
etc.).Nivelul seric al acestor enzime de leziune, variază în funcţie denumărul de hepatocite
afectate, de gravitatea lezării fiecărei celule, de viteza cu care s-a produs leziunea şi de viteza de
eliminare din ser (t 1/2) a enzimelor respective.