evaluari biochimice in explorarea hepatica

More documents

Recommendations

Info

-cetoglutaric Alanină Acid glutamic Acid piruvic Piruvatul format este transformat în lactat de către NADH+H + în reacţia catalizata de LDH (lactat dehidrogenază) conform reacţiei: CH 3 C COOH NADH+H + LDH CH 3 CH O NAD OH Acid piruvic Acid lactic COOH Se măsoară viteza de diminuare a concentraţiei NADH+H + pe măsură ce trece în NAD + , prin scăderea absorbţiei în UV. Ea este direct proporţională cu activitatea ALAT. Aparatură: Spectrofotometru Cronometru Reactivi: 1. Soluţie substrat; L-alanina 800 mM in tampon fosfat 100 mM şi pH=7,4 2. Amestec de: -cetoglutarat 10 mM, NADH + +H + 0,2 mM, LDH 10mg/l în tampon fosfat 100 mM, pH=7,4 Mod de lucru: În momentul începerii determinărilor se amestecă soluţia 1 cu 2 (4 părţi reactiv 1 cu 1 parte reactiv 2 ). Amestec de reactivi 1+2 (µl) 1000 Ser (µl) 250 µl) Se agită bine şi se citesc extincţiile la lungimea de unda de 366 nm în cuve de l cm. k3CI f syy) C Citirea se face din minut în minut timp de 3 minute la 25 C Calcularea rezultatelor: Se face diferenţa între prima şi ultima citire şi se împarte la numărul de minute citite. Se notează cu ( A/min). Concentraţia ALAT în UI/l = ( A/min) x 1520 Observaţii: dacă valoarea ( A/min) creşte mai mult de 0,08 se recomandă diluarea a 0,1 ml probă cu 0,9 ml ser şi se înmulţeşte rezultatul cu 10. Citirile se pot efectua şi la 30 C şi 37 C.
Intervale de referinţă: 25 C 30 C 37 C Bărbaţi pînă la 22 UI/l pînă la 29 UI/l pînă la 40 UI/l Femei pînă la 17 UI/l pînă la 22 UI/l pînă la 31 UI/l DETERMINAREA ACTIVITĂŢII ASPARTAT AMINOTRANSFERAZEI (ASAT)- (GOT) Principiul metodei: Alanin aminotransferaza (ASAT) catalizează următoarea reacţie: COOH CH 2 CH 2 C=O COOH COOH CH 2 CH NH 2 COOH ASAT COOH CH 2 CH 2 HC NH 3 COOH COOH CH 2 C=O COOH Acid Acid Acid Acid α cetoglutaric aspartic glutamic oxalacetic Oxalacetatul format este transformat în malat de către NADH + + H + în reacţia catalizată de MDH (malat dehidrogenază) conform reacţiei: COOH C=O CH 2 COOH MDH NADH+H + NAD COOH HC OH CH 2 COOH Acid oxalacetic Acid malic Se măsoară viteza de diminuare a cantităţii de NADH+H + pe măsură ce trece în NAD + , prin scăderea absorbţiei în UV. Ea este direct proporţională cu activitatea enzimei ASAT. Aparatură: Spectrofotometru Cronometru
Page 1: ACTIVITATE EXPERIMENTALĂ DETERMINA
Page 5 and 6: Dozarea ALAT şi ASAT rămîne cea
Page 7 and 8: Aparatură: Spectrofotometru Cronom
Page 9 and 10: DETERMINAREA ACTIVITĂŢII FOSFATAZ
Page 11: Nu s-au observat interferenţe pent

evaluari biochimice in explorarea hepatica

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?