Povesti de succes - uefiscdi

Centrul de Chirurgie Generala şi Transplant Hepatic
60
publicarea in 2009 în Cancer Gene Therapy a articolului: Transcriptional
silencing of ETS-1 efficiently suppresses angiogenesis
of pancreatic cancer, în care s-a demonstrat că transferul
unei molecule dominant negative a ETS-1 (ETS-DN) în linii
celulare tumorale pancreatice nu a afectat rată de proliferare în
vitro, dar a inhibat semnificativ creşterea lor in vivo pe modelul
de şoarece imunodeficient.
În cadrul proiectulu CEEX 64 /2006 (cu o valoare de finanțare
pentru CCGTH de 450 000 RON) am studiat, împrenă
cu partenerii de la Institutul National de Crecetare- Dezvoltare
în Domeniul Patologiei Științelor Biomedicale “Victor Babeș”,
dr Cristina Tănase, expresia cav 1 la 34 de pacienți cu adenocarcinomă
pancreatic și în țesutul peritumoral asociat prin
metode de imunohistochimie și western blot. Am corelat expresia
Cav-1 cu cea a altor markeri tisulari tumorali: Ki-67,
p53), dar și cu a markerilor serici CA19-9. În țesutul tumoral,
atât celulele tumorale cât și cele din vase exprima cav-1, iar în
țesutul peritumoral expresia cav-1 există doar în vase și doar
ocazional se exprimă în celule ductale sau parenchimale. Supraexprimarea
cav-1 a fost asociată cu dimensiunea tumorală, stadializare,
iar expresia cav-1 în țesutul tumoral s-a corelat cu
creșterea nivelului seric pentru CA 19-9.
- medicină regenerativă: terapii celulare
Terapia celulară cu celule stem și cu celule progenitoare
hepatice reprezintă o abordare nouă, promițătoare în regenerarea
hepatică. Celulele stem hematopoietice adulte, obținute
din sângele periferic, sau din măduva osoasă pot reprezenta un
avantaj considerabil în folosirea lor pentru terapia leziunilor hepatice
prin faptul că ele pot fi prelevate de la donori vii,
printr-o tehnică minim invazivă. Teme de cercetare abordate în
cadrul acestui domeniu au potențialul, prin rezultatele scontate,
de a aprofunda cunoașterea în domeniul biologiei celulare hepatice,
constituind o sursă importantă de date pentru viitoarele
studii clinice. Celulele stem adulte pot fi manipulate in vitro
pentru a induce diferențierea în celule hepatocyte like. Impreună
cu partenerii proiectului CEEX 65/2006 (cu o valoare de
finanțare pentru CCGTH de 640 000 Ron) de la Institutul de
Virusologie “Ștefan S. Nicolau” și de la Institutul Național de
Crecetare - Dezvoltare în Domeniul Patologiei Științelor Biomedicale
“Victor Babeș” s-a propus să se determine diferențierea
celulelor stem mezenchimale umane în hepatocite,
folosind factori “specifici hepatici”: hepatocyte growth factor,
Insulin-Transferrin-Selenium, dexamethasone, nicotinamide.
Celulele stem mezenchimale umane au fost expuse la diferite
medii de cultură în care acești compuși au fost folosiți individual
sau în diferite combinații. Diferențierea hepatocitara a fost
determinată prin tehnici de RT- PCR, imunohistochimie, teste
funcționale. Profilul expresiei genice pentru: albumin, alphafetoprotein
și cytokeratin 19 a arătat că atunci când acești factori
sunt folosiți individual se obține o diferențiere hepatocitară
incompletă. Folosirea unui mediu de cultură care să contină toți
factorii enumerați a arătat o expresie crescută pentru albumină,
dar nu și pentru cytokeratin 19. Celulele obținute prezintă
funcții hepatice specifice, incluzând producerea de uree, glucoză.
Rezultatele obținute vor fi prezentate la 10 th International
Cell Transplant Society (CTS) Congress in Okayama, Japan,
care se va desfățura între 20-21 Aprilie 2009.
În CCGTH s-au efectuat în premieră națională primele autotransplante
de celule stem adule pentru afecțiuni hepatice și
pentru diabet, primul transplant combinat de insule pancreatice
și ficat. Cazul de autotransplant de celule stem la un caz cu
transplant hepatic domino a fost publicat în Clinical Transplantation.
În CCGTH s-a realizat testarea pe model animal a unei
combinații constituie dintr-o matrice biologica și celule stem
mezenchimale (CSM) din maduva osoasă, urmârind regenerarea
in vivo a peretelui digestiv. S-au folosit ca și suport vase
de porc decelularizate, acoperite de un burete de collagenagarose
combinat cu CSM, urmârind a obține un patch 3D cu
următoarele proprietăți: biocompatibil, biodegradabil, porozitate
adecvată, integritate structurală. Rezultatele noastre arată
că patchul 3D imbogățit cu CSM promovează repararea defectului
peretelui digestiv cu reconstitirea structurii acestuia. CSM
au dus la îmbunătățtirea grefării patchului 3D și regenerarea
tisulară completă fără a fi necesară realizarea imunosupresiei
recipientului. Rezultatele cercetărilor s-au concretizat în lu-
angiogenesis of pancreatic cancer”, which demonstrated that the
transfer of a dominant negative molecule ETS-1 (ETS-DN) in
pancreatic tumor cell lines did not affect the rate of proliferation
in vitro, but significantly inhibited their growth in vivo on
mouse model of immunodeficiency.
In the project CEEX 64 / 2006 (with a funding value of 450
000 USD for CGSLT) we studied with the National Institute of
Development Field in Biomedical Science Pathology "Victor
Babes",(Dr Cristina Tanase)the expression of CAV 1 in 34 patients
with pancreatic adenocarcinoma and peritumoral tissue
trough Immunohistochemistry and western blot. We correlated
the expression of Cav-1 with other tissue tumor markers: Ki-67,
p53), but also with serum markers CA19-9. In tumoral tissue,
both tumor cells and the vessels express CAV-1, and in peritumoral
tissue expression of CAV-1 exists only in vessels and only
occasionally is expressed in cells or ductile parenchyma. Superexpressing
of CAV-1 was associated with tumor size, staging,
and CAV-1 expression in tumoral tissue was correlated with increased
CA 19-9 serum level.
- Regenerative medicine: cells theraphy
Considering recent findings stem cells could be harvested
from a patient and used to repair his own damaged liver. The
adult hematopoietic stem cells can be harvested by a minim invasive
technique from the peripheric blood, bone marrow and
used in liver diseases. Additionally, stem cells may be manipulated
in vitro, to induce hepatic differentiation. The research activities
of CCGTH and the project partners (Romanian Institute
of Virology and „ Victor Babes” National Institute of the CEEX
65/2006 project) ( total budget of CCGTH is 640000 Ron) aims
to determine the differentiation efficacy of various liver-specific
factors (hepatocyte growth factor, Insulin-Transferrin-
Selenium, dexamethasone, nicotinamide) used for stem cells differentiation
into hepatocyte-like cells. Human mesenchymal
stem cells were exposed to different media containing these
compounds added individually or in various combinations. Hepatic
differentiation was assessed by quantitative RT-PCR, and
immunocytochemical staining for stemness or liver-specific
genes and proteins like: albumin, cytokeratins 18, 19, HepPar-
1, alpha-fetoprotein and nestin, and also by some functional
tests. The expression profiles of albumin, alpha-fetoprotein and
cytokeratin 19 demonstrated that when hepatocyte growth factor,
nicotinamide or dexamethasone were added individually an
incomplete hepatocyte differentiation was achieved and the obtained
cell populations contained bivalent progenitors that express
both hepatic (albumin) and biliary (cytokeratin 19)
markers, together with alpha-fetoprotein. When all factors were
added in culture cells become more committed to hepatic lineage,
showing an increased expression of albumin but not cytokeratin
19. The obtained cells presented specific hepatic
functions, including glycogen storage, urea and glucose production.
The results shows that each of the liver-specific factor
tested individually. The perliminary results will be presented at
the la 10th International Cell Transplant Society (CTS) Congress
in Okayama, Japan, in April 2009.
There have been also performed the first autotransplantations
with adult stem cells for liver diseases and diabetes mellitus,
the first combined liver-islet cell transplantation. The case
of stem cell autotransplantation in a liver transplanted patient
has been published in Clinical Transplantation.
- In the CGSLT it has been performed on the animal model a
combination of a biological matrix and mesenchymal stem cells
(MSC) from bone marrow, following in vivo regeneration of digestive
wall. There were used as support decellarized pig vessels
covered by a collagen-agarose sponge combined with MSC,
aiming to obtain a 3D patch with the following properties: biocompatible,
biodegradable, adequate porosity,and structural integrity.
Our results showed that 3D MSC-enriched patch
promoted the defect repair of the digestive wall. The MSC led
to improvement 3D patch grafting and complete regeneration of
the tissue without the need of adding immunosuppression. The
results of this research were published in this paper: Transplantation
of mesenchymal stem cells cultured on biomatrix support
induces digestive tract of repairing iatrogenic defects. Mirela-
Patricia-BOETI Sirbu, M. Chivu, Liliana L. Pâslaru, C.
Efrimescu, V. Herlea, C. Pecheanu, L. Moldovan, L. Dragomir,
C. Bleotu, E. Ciucur, C. Vidulescu, M. Vasilescu, A. Boicea, S.
Mãnoiu, MI Ionescu, I. Popescu (surgery, 104 (1): 55-65)