Formular aplicatie.pdf - USAMV Cluj-Napoca

Specia Staphylococcus aureus face parte din familia Micrococaceae, facultativ
anaerobă, imobilă, Gram +, cu un perete celular bogat în acid teichoic si peptidoglican,
bacterie care acţionează la nivel extracelular prin virulenţa (A. F Gillaspy, J.J.Iandolo 2009).
Staphylococcus aureus este un organism versatil cu mai multe caracteristici virulente şi
mecanisme de rezistenţă la dispoziţia sa. Este, de asemenea, o cauză semnificativă a unei
game largi de boli infecţioase la om, cum ar fi endocardita bacteriemică şi pneumonia,
afecţiuni care adeseori pot pune viaţa în pericol (Zeina A.,Kanafani, Vance G Fowler Jr,
2006). Se cunoaste faptul ca 30% dintre oameni, poartă acest germen la nivelul mucoasei
nazale, acest lucru reprezentând un uriaş rezervor de contaminare a alimentelor sau de
migrare in alte părţi ale organismului prin mecanisme patogenetice proprii bacteriei (Ashok
Kumar, Pallab Ray si colab. 2005).
Specia Salmonella enterica grup C si D face parte din familia Enterobacteriaceae, se
dezvoltă aerob/anaerob, este Gram -, mobilă, catalază pozitivă şi reprezintă conform studiilor
efectuate de Kelborn aproximativ 90% din izolările de la om. Salmonella cauzează o
diversitate de sindroame in secial digestive atat la animale cât şi la păsări şi om şi rămâne o
problema gravă pentru sănătatea publică din întreaba lume (F. Begum, Y. Adachi and S. M.
R. Khan 2008) Simptomele observate la om cu salmoneloza pot include diaree, crampe
abdominale, greaţă, vărsături, febră, dureri de cap, şi sânge în fecale iar mecanismul de
actiunea a germenului include ambele forme de agresivitate: virulenta si toxigenitatea (C
Poppe 2011)
Cercetarea proteinelor caracteristice fiecărui microoganism in parte, poate permite
dezvoltatea măsurilor protective faţă de acţiunea invazivă a acestor bacterii (F. Begum, Y.
Adachi and S. M. R. Khan 2008). Se încearcă identificarea unor proteine marker a speciilor
bacteriene.
Originalitatea proiectului propus constă în faptul că nu s-au identificat în literatura de
specialitate studii comparative privind profilul proteomic al bacteriilor Gram + şi al celor Gram-.
Pentru o mai buna valorificare a rezultatelor obţinute se va incerca testarea efectului
antimicromian al unor extracte vegetale.
Profilului proteomic al bacteriilor luate in studiu va fi cercetat utilizând metoda
electroforetică SDS-PAGE (sodium dodecil sulfat de poliacrilamidă, gel de electroforeză).
Metoda descrie o colecţie de tehnici conexe utilizate pe scară largă în biochimie, genetică şi
biologia moleculară pentru a separa proteinele în funcţie de mobilitatea electroforetica - în
funcţie de lungimea unui lanţ polipeptidic şi sarcina sa (Gianluca Picariello si colab. 2006).
Procedura cuprinde mai multe etape care includ în cadrul acestui proiect următoarele:
rehidratarea culturilor pure de microorganisme prin cultivarea în bulion nutritiv si verificarea
purităţii acestora, lizarea celulelor pentru extractia proteinei şi denaturare proteina. Se va
continua cu pregătirea şi turnarea gelurilor, încărcarea probei şi electroforeza propriu-zisă.
Gelul se va colora utilizând Coomasie blue sau Silver stain, se va scana si interpreta (PAGE-
SDS Laemmli Protocol).
Având în vedere studiile din literatura de specialitate, proiectul propune o identificare
comparativă a caracteristicilor proteomice a principalelor bacterii Gram pozitive şi Gram
negative, implicate în producerea de toxiinfectii alimentare în ţara noastră.
Bibliografie:
1. Eugen Ulea, Florin Daniel Lipşa 2011, Microbiologie , Ed Ioan Ionescu de la Brad,
Iaşi
2. P. Desmorchelier, N Fegan 2006, Escherichia coli, Food Science Australia,
Brisbane, Encyclopedia of Toxicology (Secod Edition), pg 115-116
3. Lee R Shugart & Associates 2006, Inc., Oak Ridge, TN, USA, 2006, E. coli
(Escherichia coli ) Encyclopedia of Microbiology (Third Edition), pg: 948- 954
4/11