rezumat RO pt CD.pdf

Obţinerea de biosurfactanţi şi utilizarea lor în protecţia mediului şi a culturilor horticole
Amplificarea ADN-ului bacterian prin tehnologia PCR (Polymerase Chain Reaction).
În urma folosirii microplăcilor Biolog GP2 s-a evidenţiat profilul fiziologic al tulpinilor
bacteriene B1 şi B2 şi s-a stabilit apartenenţa noilor izolate la genul Bacillus, specia B. subtilis,
probabilitatea de identificare fiind de 85% pentru ambele tulpini.
Analizarea probelor în vederea identificării tulpinilor prin tehnica FISH, s-a realizat la cele
două tulpini bacteriene Gram-pozitive izolate, B1 şi B2, şi la tulpina Gram-negativă,
Pseudomonas sp. Prin folosirea sondelor moleculare marcate fluorescent şi examinarea produşilor
de hibridizare la microscopul cu epifluorescenţă, s-au evidenţiat unele deosebiri între cele două
izolate aparţinând genului Bacillus şi a izolatului din genul Pseudomonas, dar nu au permis
identificarea speciilor cărora le aparţin izolatele testate.
Prin analize moleculare, ADN-ul genomic a fost utilizat în reacţii de amplificare distincte,
utilizând diferite tipuri de primeri, atât pentru tulpina Pseudomonas sp., cât şi pentru cele două
tulpini de Bacillus. Rezultatele obţinute arată că noul izolat de Pseudomonas aparţine speciei
Ps. aeruginosa şi că noile tulpini B1 şi B2 prezintă un comportament similar celui evidenţiat la
tulpina de referinţă B. subtilis ATCC 6633, ceea ce ar sugera că aparţin speciei B. subtilis.
Deşi în cercetările noastre am pornit de la o bază de date deja existentă în ceea ce priveşte
izolarea, identificarea şi caracterizarea micoorganismelor, am considerat necesară testarea metodelor
de identificare şi caracterizare, astfel încât rezultatele să fie comparabile cu cele obţinute pe plan
internaţional. Principalele contribuţii au fost axate pe două direcţii: (a) izolarea unor noi tulpini de
Bacillus din medii poluate cu hidrocarburi şi (b) o abordare polifazică pentru identificarea noilor
izolate bacteriene prin combinarea metodelor microbiologice clasice cu cele moleculare.
Capitolul III: Cercetări proprii privind testarea activităţii antifungice a tulpinilor bacteriene
selectate
Cercetările prezentate în acest capitol au avut ca obiectiv, evidenţierea capacităţii tulpinilor
bacteriene selectate de a inhiba fungi fitopatogeni in vitro şi in vivo (în condiţii de laborator). Pentru
analizarea eficacităţii tulpinilor de interes B1 şi B2 ca agenţi de combatere biologică au fost realizate
teste de apreciere a antagonismului faţă de fungii fitopatogeni. Scopul acestor experimente a fost de
a evidenţia dacă izolatele bacteriene luate în studiu sunt competitive.
Pentru testarea in vitro s-au folosit fungii fitopatogeni Alternaria tenuis, Fusarium
oxysporum var. lycopersici, Sclerotium bataticola, Rhizoctonia solani, Pythium spp., cultivaţi în
plăci Petri cu mediul PDA. Testarea s-a făcut prin inocularea tulpinilor în poziţii juxtapuse, în vase
7