rezumat RO pt CD.pdf
rezumat RO pt CD.pdf
rezumat RO pt CD.pdf
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Obţinerea de biosurfactanţi şi utilizarea lor în protecţia mediului şi a culturilor horticole<br />
ce sugerează posibile aplicaţii ale tulpinilor bacteriene selectate pentru degradarea uleiurilor<br />
vegetale uzate (arse).<br />
Pentru că rezultatele obţinute au arătat capacitatea tulpinilor bacteriene B1, B2, B17 şi BW<br />
de a produce agenţi tensioactivi, ne-am propus să examinăm dacă aceste tulpini sunt potenţial<br />
producătoare de lipope<strong>pt</strong>ide de tip iturin, folosind două perechi de primeri ituD şi lpa14. Rezultatele<br />
obţinute sunt prezentate în mod sintetic în tabelul 4.6 (tabelul 4.9 din teză).<br />
Rezultatele testului PCR<br />
13<br />
Tabelul 4.6 (Tabelul 4.9 – Teză)<br />
Tulpina<br />
bacteriană<br />
Rezultate PCR Comentarii<br />
B. subtilis ATCC Ampliconul de 1203 pb specific pentru<br />
6633<br />
ituD este clar, în timp ce ampliconul de<br />
675 pb corespunzător genei lpa-14 nu<br />
este foarte clar<br />
Posibil producător de iturin<br />
B. subtilis B1 Ambii ampliconi sunt prezenţi Producător de iturin<br />
B. subtilis B2 Niciunul dintre produşii de amplificare Nu produce iturin, biosurfactanţii pe<br />
nu a fost detectat<br />
care îi sintetizează sunt de alt tip<br />
B. subtilis BW Ambii ampliconi sunt prezenţi Producător de iturin<br />
Extracţia biosurfactanţilor s-a făcut după o metodă ada<strong>pt</strong>ată după mai multe metode<br />
prezentate în literatura de specialitate, fiind descrisă în capitolul IV al tezei, subcapitolul Materiale<br />
şi metode. În experimentele noastre, în urma evaporării metanolului, s-a obţinut, pentru toate<br />
tulpinile bacteriene luate în studiu, un depozit de culoare brun-gălbuie, fiind considerat biosurfactant<br />
brut. S-au constatat, totuşi, diferenţe în privinţa mărimii depozitului: cel mai mare depozit s-a<br />
obţinut la tulpina B2. În vederea evidenţierii biosurfactanţilor prin cromatografie în strat subţire<br />
(TLC) şi pentru determinarea eventualei activităţi antifungice, sedimentele de biosurfactant au fost<br />
reluate în 100 µl metanol sau în 100 µl n-butanol.<br />
Pentru detectarea biosurfactanţilor prin TLC, s-a folosit sistemul solvent cloroform-metanol-<br />
apă (65:25:4 v/v/v), iar ca soluţie de revelare o soluţie alcoolică de ninhidrină 0,2%. Aplicarea<br />
extractelor metanolice sau butanolice pe plăcile cu silicagel, a condus la evidenţierea unor spoturi de<br />
culoare violet, indicând prezenţa lipope<strong>pt</strong>idelor.<br />
Deşi în cercetările noastre am pornit de la o platformă de cunoştinţe deja existente în ceea ce<br />
priveşte creşterea acestui tip de microorganisme, având în vedere dificultatea alegerii unui mediu<br />
bun pentru cultivarea izolatelor bacteriene selectate, potenţial producătoare de biosurfactanţi, am<br />
considerat necesară testarea şi o<strong>pt</strong>imizarea creşterii tulpinilor bacteriene, astfel încât rezultatele<br />
obţinute în cadrul etapelor următoare să fie comparabile cu cele obţinute pe plan internaţional. Am