MÉTODOS DE MELHORAMENTO DE PLANTAS DE ...
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HibridaçãoA escolha dos genitores é um aspecto importante na hibridação. A escolha deveser baseada em características complementares e, pelo menos um dos genitores deveapresentar baixa necessidade e frio. Desse modo, o conhecimento das características dogermoplasma disponível é essencial na escolha.A hibridação envolve diversas etapas: coleta de pólen do genitor masculino,emasculação das flores e polinização da planta mãe.Coleta de pólenO pólen deve ser coletado de flores bem desenvolvidas, mas ainda não abertas,para evitar contaminação por pólen vindo de outras flores. Isto acarretaria mistura nafutura progênie.As flores devem ser colhidas em saquinhos de papel. Em seguida, as anterasdevem ser separadas da seguinte maneira. Os botões florais são invertidos sobre umapeneira de malha fina (1,5-2 mm) e esfregados levemente sobre a tela. As anerasatravessam a tela e caem sobre uma pequena bandeja de papel, confeccionada eidentificada com o nome do genótipo e data de coleta. As bandejas são deixadas àtemperatura ambiente e fora do alcance da luz solar direta. A deiscência das anterasocorre de 24 a 36 horas após a coleta.Após secas, as anteras e o pólen são recolhidos em frascos de vidro, tamponadoscom algodão e colocados em dessecador com substância higroscópica, a sílica gel.Quando se deseja conservar o pólen para utiliza-lo no ano seguinte, como é o caso decruzamentos que envolvam o genitor feminino precoce e o masculino tardio, osdessecadores devem ser colocados em congeladores a aproximadamente - 18º C. nestascondições o pólen pode permanecer viável por até 3 ou 4 anos.Teste de viabilidade do pólenO método mais utilizado nos programas de melhoramento genético de frutíferasde clima temperado, para testar a viabilidade de pólen, é a germinação in vitro.Para realizar este método, primeiramente é confeccionado um meio de culturapadrão, com 10% de sacarose + 1% de agar, diluídos em água destilada. Entretanto,pólen de algumas cultivares de ameixeira, germinam melhor com a adição de 20 a 40ppm de ácido bórico. O meio é aquecido para dissolver completamente o ágar, semebulir. Ainda quente, são colocadas 3 a 4 gotas de meio sobre tubos de PVC de 1,5 cmde diâmetro e 0,5 cm de altura, colados sobre lâminas comuns.Após esfriar o meio, o pólen a ser testado é polvilhado levemente sobre asuperfície do meio de cultura, com auxílio de um pincel. As lâminas são colocadas emplacas de Petri, com papel umedecido no fundo, para simular uma câmara úmida. Asplacas de Petri são, então, colocadas à temperatura de aproximadamente 25º C. Três aquatro horas após, pode ser feita a contagem dos grãos de pólen germinados e nãogerminados. Sob microscópio ótico são contados de 100 a 200 grãos de pólen porgenótipo, obtendo-se o percentual de germinação.Em geral, uma boa viabilidade de pólen é considerada entre 50 a 80%.Entretanto, quando utiliza-se pólen vindo do exterior, admite-se até 30% ou menos degerminação, realizando-se polinização em um maior número de flores.