Reagente IgA-Flex - Medcorp

REF DF74Dimension ® clinical chemistry systemFlex ® reagent cartridgeIGACartucho de reagente Flex ® para Imunoglobulina AFim a que se destina: O cartucho de reagente Flex® IGA para osistema de química clínica Dimension® é um teste para diagnósticoin vitro destinado à medição quantitativa da imunoglobulina A (IgA)no soro e plasma.Resumo: As imunoglobulinas são produzidas pelas célulasplasmáticas como uma resposta humoral ao contacto do sistemaimunitário com antigénios 1 . A reacção inicial é a produção deanticorpos IgM, seguida pela produção de IgG e de IgA. Adeterminação quantitativa das imunoglobulinas pode fornecerinformações importantes sobre o estado da imunidade humoral.A IgA é a segunda imunoglobulina mais abundante no plasma deadultos normais. É a imunoglobulina predominante em secreçõescorporais, tais como o colostro, saliva e suor2. A síntese de IgA éiniciada durante as primeiras semanas de vida; não existe IgA noplasma de recém-nascidos. A diminuição das concentrações de IgAocorre em situações de imunodeficiência primária, assim como eminsuficiências imunitárias secundárias. 3 O aumento dasconcentrações de IgA ocorre devido a proliferação deimunoglobulinas policlonal ou oligoclonal.4 No soro, a IgA existe nasformas monomérica e polimérica. Além da determinaçãoquantitativa, é necessária uma investigação pormenorizada para odiagnóstico diferencial da imunoglobulinémia monoclonal5.Princípios do procedimento: O método IGA é um ensaioturbidimétrico, quantitativo, que utiliza uma detecção de ponto final,baseado na precipitação da IgA pelo seu anticorpo policlonala.A IgA existente no soro ou plasma reage com o seu anticorpopoliclonal para formar complexos imunes. A adição de polietinoglicolacelera a formação destes complexos. A turvação resultante émedida utilizando leituras bicromáticas de ponto final a 340 nm e700 nm. O aumento na turvação é proporcional à concentração deIgA presente na amostra e os resultados são referidos em unidadesdo analito (mg/dL ou g/L).PEGIgA + Anticorpo ———————> Complexo IgA-Anticorpoa. O anticorpo é fabricado pela Dade Behring, Marburg, Alemanha.ReagentesPoços b Forma Ingrediente Concentração c Fonte1,2,3 Líquido Polietilenoglicol, 120 mg/mLTampão e60 mMestabilizadores4,5,6 Líquido Anticorpo Anti-IgA e 1.5 mg/mL d Coelhoestabilizadoresb. Os poços são numerados consecutivamente a partir da extremidade largado cartucho.c. Valor nominal na mistura de reacção final.d. O título do anticorpo varia de lote para lote.Precauções: As cuvetes utilizadas contêm líquidos biológicoshumanos; manipular com o cuidado adequado para evitar ocontacto com a pele ou a ingestão.Para utilização em diagnóstico in vitroPreparação do reagente: Todos os reagentes são líquidos e estãoprontos a serem utilizados.Instruções para armazenamento: Armazenar a 2 – 8 °C.Validade: Consultar a embalagem para obter a data de validade decada um dos cartuchos de reagentes não abertos. Os poços doscartuchos selados permanecerão estáveis durante 30 dias. Depois deos poços 1 a 6 terem sido penetrados pelo instrumento,permanecerão estáveis durante 4 dias.Colheita de amostras: Para as amostras analisadas por este métodopodem ser utilizados os procedimentos normais para a colheita earmazenamento de soro e de plasma heparinizado. 6As amostras devem estar livres de partículas. Para evitar oaparecimento de fibrina nas amostras de soro, o coágulo deveráestar completamente formado, antes da centrifugação. As amostrascom lipémia elevada ou amostras congeladas que estejam turvasapós a descongelação, devem ser centrifugadas para clarificaremantes de serem analisadas.Cada laboratório deverá determinar a aceitabilidade dos tubos decolheita de sangue e dos produtos de separação do soro que utiliza.Podem existir variações nestes produtos entre fabricantes e, porvezes, entre lotes do mesmo fabricante.Substâncias interferentes conhecidas• A interferência proveniente da icterícia (40 mg/dL debilirrubina [684 mmol/L]) e , hemólise (500 mg/dL dehemoglobina [0.31 mmol/L] (monómero) e de lipémia(750 mg/dL de triglicéridos [8.5 mmol/L]) foi inferior a 10%.• As seguintes substâncias, nas concentrações indicadas, nãoexercem efeitos significativos (inferiores a 10%) sobre ométodo IGA, quando são adicionadas a um pool de sorocontendo 214 mg/dL [2.14 g/L] de IgA.Acetaminofeno 20 mg/dL [1323 µmol/L]Albumina 6 g/dL [60 g/L]Amicacina 15 mg/dL [256 µmol/L]Acido ascórbico 3 mg/dL [170 µmol/L]Cafeína 10 mg/dL [515 µmol/L]Carbamazepina 12 mg/dL [508 µmol/L]Cloramfenicol 25 mg/dL [774 µmol/L]Clordiazepóxido 2 mg/dL [67 µmol/L]Clorpromazina 5 mg/dL [157 µmol/L]Éster de Colesterol 500 mg/dL [12.9 mmol/L]Cimetidina 10 mg/dL [396 µmol/L]Creatinina 30 mg/dL [2652 µmol/L]Dextrano 75 2500 mg/dL [333 µmol/L]Diazepam 2 mg/dL [70 µmol/L]Digoxina 5 ng/mL [6.4 nmol/L]Eritromicina 20 mg/dL [273 µmol/L]Etanol 350 mg/dL [76 mmol/L]Etosuximida 30 mg/dL [2125 µmol/L]Furosemida 2 mg/dL [61 µmol/L]Gentamicina 12 mg/dL [251 µmol/L]Heparina de sódio 8 U/mL [8000 IU/L]Ibuprofeno 40 mg/dL [1939 µmol/L]Lidocaína 6 mg/dL [256 µmol/L]Cloreto de litio 3.5 mg/dL [5.07 mmol/L]Nicotina 2 mg/dL [123 µmol/L]Penicilina G 25 U/mL [25,000 U/L]Pentobarbital 10 mg/dL [442 µmol/L]Fenobarbital 15 mg/dL [646 µmol/L]Fenitóina 10 mg/dL [396 µmol/L]Primidona 10 mg/dL [458 µmol/L]Propoxifeno 0.4 mg/dL [12 µmol/L]Ácido saliciliso 50 mg/dL [3.6 mmol/L]Teofilina 25 mg/dL [1388 µmol/L]Ureia 500 mg/dL [83.3 mmol/L]Ácido úrico 20 mg/dL [1.2 mmol/L]Ácido valpróico 50 mg/dL [3467 µmol/L]e. Sistema Internacional de Unidades (Unidades S.I.) entre parêntesis.ProcedimentoMaterials necessáriosCartucho de reagente Flex® para IGA, N o de Catálogo DF74.Calibrador Especial de Proteína, N o de Catálogo DC51Passos do testeA recolha da amostra, dispensação do reagente, agitação,processamento e impressão dos resultados são realizadosautomaticamente pelo sistema Dimension®. Para obter pormenoressobre este processamento, consultar o manual do sistemaDimension®.Condições de testeCuvete 1• Volume da amostra 10 µL• Volume do tampão PEG 135 µL• Volume do diluente 255 µL• Temperatura do teste 37 °CCuvete 2• Primeiro volume transferido 4 µL• Volume do tampão PEG 110 µL• Volume do diluente 280 µL• Volume do anticorpo 50 µL• Segundo volume transferido 36 µL• Temperatura do teste 37 °C• Comprimentos de onda 340 e 700 nm• Tipo de leitura bicromática• Unidades mg/dL [g/L]

CalibraçãoO procedimento geral de calibração encontra-se descrito no manual dosistema Dimension®. Quando calibrar o método IGA, deverão sertomadas em consideração as seguintes informações:• Intervalo do ensaio: 10 a 1000 mg/dL [0.1 –10.0 g/L]• Material de referência: Calibrador Especial de Proteína, N o de CatálogoDC51• Níveis de calibração: 0, 90, 300, 600, 1200 mg/dL[0.0, 0.9, 3.0, 6.0, 12.0 g/L]• Esquema de calibração: Cinco níveis em duplicado• Frequência da calibração: Cada lote novo de cartucho de reagente. De doisem dois meses para qualquer lote individual.• Coeficientes atribuídos: C 0 -50.0C 1 400.0C 2 -1.0C 3 500.0C 4 0.5Controlo da QualidadePelo menos uma vez em cada dia de utilização, analise dois níveis deum material de controlo da qualidade com concentrações de IgAconhecidas.Se os resultados caírem fora dos limites aceitáveis do laboratório, sigao procedimento apresentado no manual do sistema Dimension®.Pode existir uma avaria do sistema se for observada a seguinteprecisão de 5 testes:Concentração de IGADesvio Padrão86 mg/dL [0.86 g/L] > 7.4 mg/dL [0.074 g/L]298 mg/dL [2.98 g/L] > 10.9 mg/dL [0.109 g/L]*Resultados: O instrumento calcula e imprime automaticamente aconcentração de IgA em mg/dL [g/L] utilizando o esquema de cálculoilustrado no manual do sistema Dimension®.Para efeitos de diagnóstico e tratamento, os resultados deste testedevem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico médicodo doente, o estado clínico e outras indicações.Limitações do procedimentoResultados:> 1000 mg/dL [10.0 g/L]Diluição manual: Para obter resultados que se encontrem dentro dointervalo do ensaio, efectuar a diluição apropriadacom solução salina. Introduzir o factor de diluição.Voltar a efectuar o ensaio. A leitura do resultado écorrigida para a diluição.Auto-diluição (AD): Consultar o manual do sistema Dimension®.O volume recomendado da amostra de auto-diluição éde 2 µL.Resultados:< 10 mg/dL [0.1 g/L] devem ser referidos como“inferior a 10 mg/dL [0.1 g/L]”, em vez do valornumérico.O sistema de emissão de relatórios do instrumento contémmensagens de erro para prevenir o utilizador de avarias específicas.Qualquer relatório que contenha tais mensagens de erro deve serretido para seguimento. Consultar o manual do sistema Dimension®.As amostras que contenham uma imunoglobulina monoclonal podemoriginar uma situação de excesso de antigénio e valores artificialmentediminuídos. Como a presença de uma proteína monoclonal pode sernormalmente detectada utilizando a electroforese das proteínas, avalidade dos resultados imunoquímicos pode ser confirmada com umpadrão electroforético.Intervalo de referência: 87 a 474 mg/dL [0.87 – 4.74 g/L]Esta população de referência aplica-se às amostras de soro de 150adultos saudáveis (75 homens com idades compreendidas entre 19 e65 anos e 75 mulheres com idades compreendidas entre 19 e 59anos).Este intervalo de referência foi calculado de forma não paramétrica erepresenta os 95% centrais da população. 7Cada laboratório deverá estabelecer o seu intervalo de referência paraa IGA, conforme é executado o procedimento no sistema Dimension ®.Características específicas de desempenho fReprodutibilidade g,hMédia Desvio padrão (% CV)Material mg/dL [g/L] Intra-ensaio TotalPool de SoroNível 1 261 [2.61] 3.9 [0.04] (1.5) 6.9 [0.07] (2.7)Controlo Imunitário Liquichek Bio-RadNível 1 110 [1.10] 2.0 [0.02] (1.8) 5.4 [0.05] (4.9)Nível 2 294 [2.94] 4.7 [0.05] (1.6) 7.0 [0.07] (2.4)Liquichek é uma marca comercial registada da Bio-Rad Laboratories, Inc.,Hercules, CA 94547f. Todos os testes de características de desempenho específicas foramefectuados após a realização das verificações normalmente recomendadasdo controlo da qualidade do equipamento (consultar o manual do sistemaDimension®).g. Os testes da reprodutibilidade foram efectuados de acordo com a NormaExperimental NCCLS para a Avaliação pelo Utilizador do Desempenho comPrecisão de Aparelhos de Química Clínica (NCCLS Tentative Guideline forUser Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices)(EP5-T2, 1992).h. As amostras de cada nível foram analisadas em duplicado, duas vezes pordia, durante 20 dias. Os desvios intra-ensaio e os desvios padrão totaisforam calculados através do método da análise da variância.CorrelaçãoEstatísticas de regressão iMétodo Intersecção Coeficiente decomparartivo Declive mg/dL [g/L] correlação n jBeckmanArray 360 0.95 -1.48 [-0.01] 0.993 224i. A equação modelo para a estatística de regressão é a seguinte: [resultado doanalidador Dimension®] = [declive x resultado do método comparativo ] +intersecção.j. O intervalo dos valores de IgA no estudo de correlação foi de 5 a1050 mg/dL [0.05 –10.50 g/L].Especificidade analíticaPara informações mais detalhadas, consultar a secção Substânciasinterferentes conhecidas.RecuperaçãoO intervalo de recuperação do material de referência CRM470/RPPHS8variou de 101.0 –110.7 %, com uma recuperação média de 106.1%.Bibliografia1. Benjamini E, Sunshine G, Leskowitz. Immunology: A Short Course, 3 rdedition, Wiley, New York, NY, 1996.2. Tomasi TB. The Discovery of Secretory IgA and the Mucosal MembraneSystem. Immunol. Today 1992;13:416.3. Hayward AR. Immunodeficiency. In: Lachmann PJ and Peters DK (eds).Clinical Aspects of Immunology, vol II, 4 th ed, Blackwell ScientificPublications, Oxford, UK, 1982.4. Hobbs JR. Imunoglobulins in Clinical Chemistry. Adv. Clin. Chem.1971;14:220.5. Kyle RA and Lust JA. The Monoclonal Gammopathies (Paraproteins). Adv.Clin. Chem. 1990;28:146.6. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedure forHandling and Processing of Blood Specimens, NCCLS Document H 18-A2,1990, Villanova, PA.7. National Committee for Clinical Laboratory Standards. How to Define,Determine, and Utilize Reference Intervals in the Clinical Laboratory, NCCLSDocument C 28-P, 1992, Villanova, PA8. Whicher JT et al. New International Reference Preparation for Proteins inHuman Serum (RPPHS). Clin. Chem. 1994;40:934.Dimension® e Flex® são marcas registadas da Dade Behring Inc., noGabinete de Patentes e Marcas Registadas dos E.U., na Alemanha e emmuitos outros países.* As secções revistas são anotadas com um asterisco.EC REPEXPYYYY-MM-DDIVDLOTChave dos SímbolosFabricado porRepresentante AutorizadoDispositivo Médico para Diagnóstico In VitroCódigo do LoteA data em “Utilizar antes de” encontra-se noformato ano-mês-dia (AAAA-MM-DD)0800-170417SAC - Serviço de Atendimento ao Clientesac/brazil@dadebehring.comImportado e distribuído porDADE BEHRING LTDA.Rua Geraldo Flausino Gomes, 61 - 1º AndarBrooklin - São Paulo - SP - CEP 04575-060Fone (11) 3371-3200 - Fax (11) 3371-3201CNPJ: 00.897.408/0001-08Resp. Téc.: Nanci A. TrindadeCRF - SP: 7.297Dade Behring Inc.Newark, DE 19714, U.S.A.ECREPDade Behring LimitedRegus House, AtterburyMilton Keynes MK10 9RGUnited Kingdom2°C8°CREFLimitação da TemperaturaMarca CENúmero de CatálogoConsulte as Instruções de Utilização2001-12-13 PT2003-10 B PN 717074.001-PT