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armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

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___________________________________________________RESULTADOS E DISCUSSÃOUma vez constatadas as ativida<strong>de</strong>s biológicas positivas, proce<strong>de</strong>u-se acaracterização estrutural <strong>do</strong>s metabólitos utilizan<strong>do</strong>-se extratos em acetato <strong>de</strong>etila obti<strong>do</strong> a partir <strong>de</strong> 8 litros <strong>de</strong> meio <strong>de</strong> cultivo das bactérias. As condições<strong>de</strong> preparo <strong>do</strong>s inóculos, fermentação, preparo <strong>do</strong> extrato e purificação dassubstâncias <strong>de</strong> interesse são semelhantes às <strong>de</strong>scritas no cultivo com metanolcomo fonte <strong>de</strong> carbono.Em to<strong>do</strong>s os casos, as acil-homosserina lactonas foram purificadas porcromatografia em coluna <strong>de</strong> sílica gel, eluin<strong>do</strong> na polarida<strong>de</strong>diclorometano/acetato <strong>de</strong> etila 7/3. Foram obtidas frações praticamente puras,conten<strong>do</strong> apenas os compostos <strong>de</strong> interesse. Isto permitiu a avaliação direta damassa <strong>de</strong>stes metabólitos e uma estimativa <strong>de</strong> sua produção por litro <strong>de</strong> cultivoem diferentes meios. No caso <strong>do</strong> cultivo em meio CHOI3, estima-se umaprodução <strong>de</strong> 137,5 μg/L; CHOI3/glucose, 50 μg/L e no caso <strong>do</strong> cultivo emmeio TSB 287,5 μg/L.As substâncias foram i<strong>de</strong>ntificadas pela comparação <strong>do</strong>s espectros <strong>de</strong>massas e índices <strong>de</strong> retenção (Tabela 3). Os Índices <strong>de</strong> Retenção foramcalcula<strong>do</strong>s através <strong>de</strong> uma fórmula levan<strong>do</strong> em consi<strong>de</strong>ração os tempos <strong>de</strong>retenção <strong>do</strong>s metabólitos <strong>de</strong> interesse e um padrão <strong>de</strong> hidrocarbonetos,segun<strong>do</strong> procedimento consagra<strong>do</strong> na literatura (vi<strong>de</strong> seção Experimental)(Figura 41).78

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