armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

___________________________________________________RESULTADOS E DISCUSSÃO3.3.3.1. Avaliação da produção de acil-homosserina lactonas por M.mesophilicum em condições não metanotróficas de crescimentoComo descrito acima, a bactéria Gram-negativa M. mesophilicumproduz principalmente acil-homosserina lactonas de cadeia longa quandocultivada em meio contendo metanol como única fonte de carbono.Posteriormente, identificou-se as substâncias produzidas em condições nãometanotróficas de crescimento.Foram realizados estudos com dois meios de cultivo distintos. Oprimeiro consistia numa modificação do meio CHOI3, contendo glucose comoúnica fonte de carbono em substituição ao metanol. No segundo caso, abactéria foi cultivada em meio complexo TSB (tripticase soy broth).Inicialmente, preparou-se um extrato de acetato de etila a partir de umlitro de cultivo da bactéria em cada meio de cultura (CHOI3/glucose e TSB).Este extrato foi filtrado por cromatografia em coluna de sílica gel, rendendofrações que foram ensaiadas com o biossensor A. tumefaciens NTL4(pZLR4)como descrito anteriormente. Este teste visava obter evidências da produçãode substâncias de interesse nos novos meios, antes de partir para um estudoquímico mais aprofundando. Como resultado, ambos os extratos mostraramatividade biológica positiva (Figura 39). Neste caso, realizou-se também umbranco com o extrato do meio de cultivo TSB.O meio CHOI3 modificado contém glucose como única fonte decarbono. Constatou-se que o extrato proveniente do cultivo de M.mesophilicum proporcionou uma atividade biológica positiva com o repórterA. tumefaciens NTL4(pZLR4). O mesmo ensaio foi realizado com extratosprovenientes do meio de cultura TSB (tripticase soy broth). Neste caso(Figura 40), observou-se uma atividade biológica positiva para o extrato76