armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

PARTE EXPERIMENTALpurificado, Tópico 5.4.2). Em seguida, adicionou-se 0,5 mL de DMDS(dimetildissulfeto) e 40 μL de solução de iodo (60 mg/mL em éter etílico). Obalão foi fechado com tampa de teflon e vedado com parafilme.O sistema permaneceu sob aquecimento em banho de óleo e agitaçãomagnética a 40ºC durante 22 horas. Após este período, adicionou-se ao meio3 mL de diclorometano e 3 mL de solução de tiossulfato de sódio 5%. Amistura foi agitada magneticamente com vigor durante 5 minutos. Emseguida, a fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída comdiclorometano (2 x 1 mL). As fases orgânicas reunidas foram secas sobsulfato de magnésio anidro, filtradas e evaporadas sob fluxo de nitrogênio.A amostra derivatizada foi analisada por CG-EM nas seguintescondições: coluna MDN-5S (30 m x 0,25 mm x 0,25 μm), com rampa detemperaturas 60-300(6ºC/min) e mantido a 300ºC por 20 minutos. O injetoroperou em modo splitless a 250ºC. O fluxo de gás de arraste (hélio) foimantido a 1 mL/min.5.4.5. Purificação das acil-HSLs naturais – procedimento geralOs extratos obtidos a partir de 8 litros de cultivo da bactéria M.mesophilicum em meio CHOI3, CHOI3/glucose e TSB (extratos 2, 4 e 6respectivamente) foram purificados por cromatografia em coluna de sílicagel (0,035-0,070 mm de diâmetro de partícula) com os solventes hexano,diclorometano e acetato de etila em polaridades crescentes. As condiçõesutilizadas para cada extrato foram:1) Extratos 2 e 4: coluna com 1 cm de diâmetro; 4 g de sílica gel.2) Extrato 6: coluna com 2 cm de diâmetro; 25 g de sílica gel.153