armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

PARTE EXPERIMENTALcontrole positivo e soluções teste), homogeneizados, e diluídos em série,sendo descartados os 100 μL de solução ao final das diluições. As seguintessoluções foram testadas:1) Controle negativo (branco): água destilada/dimetilsulfóxido 20 %.2) Controle positivo: cloranfenicol comercial, estoque a 1 mg/mL.3)Soluções teste: racemato, enantiômeros R e S dos produtos sintéticosN-heptanoil-HSL, N-(3-oxo-octanoil)-HSL, N-(3-oxo-dodecanoil)-HSL e N-(3-oxo-tetradecanoil)-HSL. Soluções estoque a 1 mg/mL emágua/dimedilsulfóxido 20 %.Após as diluições, as placas foram incubadas com tampa em BODdurante 24 horas a 30ºC. Após este período, adicionou-se nos poços 100 μLde solução do corante revelador MTT (0,025 % em água destilada). Asplacas foram avaliadas visualmente e fotografadas 1 hora após a adição docorante. Nos poços em que o desenvolvimento microbiano foi normal,observa-se a formação de coloração roxa; nos poços onde o crescimento foiinibido, observa-se coloração amarelada.5.3.2.2. Ensaio quantitativo – análise absorciométricaNo caso do ensaio quantitativo, o inóculo foi preparado pela adição de500 μL da suspensão de B. cereus CCT 4060 (3 x 10 8 ufc/mL) a 50 mL demeio líquido Miller-Hinton.As microplacas utilizadas neste ensaio eram especiais, esterilizadas defábrica com raios gama e completamente livres de resíduos de materialcelular. A cada poço, adicionou-se 100 μL da solução água/dimetilsulfóxido20%. As soluções a serem testadas (100 μL) foram adicionadas e diluídaspor um fator de 50 %. Em seguida, adicionou-se 100 μL do meio Miller-147