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armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

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PARTE EXPERIMENTAL13' 11' 9' 7' 5'O O3'14' 12' 10' 8' 6' 4' 2'1'NH4 5 13 2HO(R)-N-(3-oxo-tetra<strong>de</strong>canoil)-homosserina lactona. Rendimento global: 50,7%. Os da<strong>do</strong>s <strong>de</strong> CG-EM, RMN <strong>de</strong> 1 H e 13 C são idênticos aos obti<strong>do</strong>s para a(±)-N-(3-oxo-tetra<strong>de</strong>canoil)-HSL. [α] 20 D +11º (c. 0,50 MeOH).O5.3.2. Bioensaios <strong>de</strong> ativida<strong>de</strong> antimicrobiana contra bactérias Grampositivas.5.3.2.1. Ensaio semi-quantitativo preliminar – análise visualOs ensaios antimicrobianos foram feitos com as bactérias GrampositivasStaphylococcus aureus CCT 1295, Bacilus cereus CCT 4060 eBacilus subtillis CCT 0089.Os inóculos <strong>do</strong>s microrganismos foram prepara<strong>do</strong>s em slants conten<strong>do</strong>meio cal<strong>do</strong> nutriente sóli<strong>do</strong> (3 tubos cada), cresci<strong>do</strong>s a 30 ºC por 24 horasem BOD. Após crescimento, as células foram removidas com alça flambadae suspendidas em água <strong>de</strong>stilada estéril (10 mL), até obter uma suspensãocom turbi<strong>de</strong>z equivalente a 3 x 10 8 ufc/mL, <strong>de</strong> acor<strong>do</strong> com uma escala <strong>de</strong>McFarland. No caso <strong>do</strong>s ensaios preliminares, foram toma<strong>do</strong>s 5 mL <strong>de</strong>stasuspensão e adiciona<strong>do</strong>s em 50 mL <strong>de</strong> meio Miller-Hinton, que foi emseguida pipeta<strong>do</strong> (100 μL) para a microplaca <strong>de</strong> 96 poços (as placas forampreviamente lavadas com água em abundância, sêcas e esterilizadas porexposição à lâmpada UV durante 1 hora). No topo <strong>de</strong> cada coluna (emduplicata), foram pipeta<strong>do</strong>s 100 μL <strong>de</strong> cada solução a ser testada (branco,146

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