armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

PARTE EXPERIMENTAL5.1.4. Cepas bacterianasA cepa Pantoea ananatis SERRANO CCT 6481 T (= IBSBF 860,NCPPB 1846, ICMP 1850, ATCC 33244), linhagem tipo, foi adquirida daColeção de Culturas Tropical, da Fundação André Tosello (Campinas, SãoPaulo). A bactéria foi mantida em meio NB sólido. A bactéria foi isolada noBrasil a partir de uma infecção em abacaxi (Ananas comosus) em 1965.A espécie Methylobacterium mesophilicum foi isolada como endofítico emlaranjeira atacada pela clorose variegada dos citros, pelo Dr. Welington Luízde Araújo (Esalq, USP) e conservada em slants contendo meio CHOI3sólido. O biorepórter Agrobacterium tumefaciens NTL4(pZLR4) foi mantidoem slants contendo meio LB sólido, suplementado com gentamicina (50μg/mL). As bactérias Gram-positivas Staphylococcus aureus CCT 1295,Bacilus cereus CCT 4060, Bacilus subtillis CCT 0089, e os endofíticos delaranja Bacilus sp. CL15, Bacilus sp. CL16, Nocardiopsis sp. eCurtobacterium flaccumfaciens ER 1/5 foram mantidas em slants contendomeio caldo nutriente.5.2. Determinação da configuração absoluta de (S)-N-heptanoil-HSLproduzida por Pantoea ananatis CCT 6481.5.2.1. Cultivo de P. ananatis e purificação da (S)-N-heptanoil-HSLPrepararam-se inóculos do microrganismo P. ananatis em tubos deensaio contendo 10 mL de meio líquido NB. Os tubos foram mantidos sobincubação a 30ºC, sem agitação, em BOD. Após 24 horas, os inóculos foramtransferidos a erlenmeyers (2 L) contendo 1 L de meio de cultivo NB líquido134