armando mateus pomini - Biblioteca do Instituto de Química - Unicamp

___________________________________________________RESULTADOS E DISCUSSÃO3.3.6. Determinação da configuração absoluta das acil-HSLs naturaisA última etapa na caracterização estrutural das acil-homosserina lactonasproduzidas por M. mesophilicum consistiu na determinação da configuraçãoabsoluta do centro estereogênico localizado na porção lactona. Dadas asquantidades extremamente pequenas de substâncias disponíveis para análises,foi necessário escolher uma metodologia simples, rápida e principalmente,com alta sensibilidade e capacidade de resolução dos enantiômeros. A técnicaescolhida foi a cromatografia gasosa acoplada a detecção por ionização emchama com coluna com fase estacionária quiral Chrompack Chirasilciclodextrina. Vale ressaltar que nosso grupo de pesquisas foi pioneiro nautilização da técnica de CG-FID com coluna com fase estacionária quiral paradeterminar a configuração absoluta desta classe de substâncias (Pomini et al.,2005, 2006 e 2007).A análise inicial da fração F22 bruta proveniente do cultivo de M.mesophilicum provou ser impraticável, uma vez que os sinais correspondentesà (S)-N-tetradecanoil, (S)-(7Z)-N-tetradecenoil e (S)-(2E,7Z)-Ntetradecadienil-homosserinalactona eluiram com elevado tempo de retenção,apresentando-se como sinais largos e parcialmente sobrepostos, conformemostrado na Figura 47. Isto impossibilitava quaisquer estudos de co-injeçãocom produtos sintéticos enantiomericamente enriquecidos.Com isto, tornou-se necessário desenvolver um procedimento quepossibilitasse a determinação da configuração absoluta destas substâncias emmicroescala, uma vez que apenas 1,1 mg da mistura de acil-HSLs eradisponível, inviabilizando por exemplo estudos extensivos por cromatografialíquida de alta eficiência. A estratégia escolhida consistiu na hidrogenaçãocatalítica de parte da mistura F22, fazendo com que as substâncias contendo96