Reagente Metanol - Medcorp

REF DF90ADimension ® clinical chemistry systemFlex ® reagent cartridgeMETHCartucho de reagente Flex ® para Despiste deMetadona na UrinaFim a que se destina: O cartucho de reagente Flex® para METHutilizado no sistema de química clínica Dimension® fornecereagentes para um teste de diagnóstico in vitro destinado àdeterminação qualitativa e semi-quantitativa de metadona na urinahumana. As medições obtidas com o método METH são utilizadaspara detectar a presença ou a sobredosagem de metadona, e paradeterminar o cumprimento do tratamento de manutenção commetadona.O método METH fornece apenas um resultado preliminaranalítico. Deve ser utilizado um método químico alternativo commaior especificidade, de forma a obter um resultado analíticoconfirmado. O método de confirmação aconcelhado é acromatografia gasosa/espectrometria de massa (CG/EM). 1,2Encontram-se disponíveis outros métodos de confirmaçãoquímica. A consideração clínica e a avaliação profissionaldeverão ser utilizadas em qualquer resultado do teste de drogade abuso, particularmente quando são utilizados resultadospositivos preliminares.A metadona é uma droga sintética narcótica/analgésica que éadministrada por via oral ou intravenosa. A desintoxicação sobvigilância médica é geralmente conseguida através da utilização dametadona. A metadona é frequentemente utilizada em programas demanutenção como substituto da heroína ou de outros opiáceos deabuso, enquanto permite ao indivíduo participar com êxito nadesintoxicação. As capacidades dos pacientes são mantidas com ametadona e são capazes realizar tarefas complexas comcompetência. 1A metadona é metabolizada no fígado. Os rins tornam-se ocaminho principal de excreção da metadona a doses que excedemos 50 mg/dl. Os níveis de metadona na urina em pacientes deprogramas de manutenção situam-se entre 1 e 5 µg/ml 24 horasapós a dose de metadona. 1Resumo: O cartucho de reagente Flex® para METH contém osreagentes Emit® II Plus 1 . O cartucho METH é utilizado no sistemaDimension® para fornecer uma aplicação automática deste ensaio.Baseia-se na competição para os locais de ligação dos anticorposentre o fármaco presente na amostra e o fármaco marcado com aenzima glucose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH).Emit ® é uma marca comercial registada da Syva Company - Dade Behring Inc.San Jose, CA 95161-9013.Princípios do procedimento: Os lotes correspondentes dosanticorpos policlonais reactivos à metadona e à metadona marcadacom a glucose-6-fosfato desidrogenase são utilizados nestametodologia Syva Emit® II Plus. A sequência da reacção é aseguinte:Ab+ METHH + METHH- ———> Ab-METH + Ab-METH-G6PDH + METH-G6PDH (inibida) G6PDH(activa)METH-G6PDHGlucose-6- + NAD + ————> 6-fosfogluconolactona + NADH + H +fosfato (activo) (absorve a 340 nm)Onde: Ab = antiticorpo reactivo à metadonaMETH = metadonaMETH-G6PDH = metadona-glucose-6-fosfato desidrogenaseconjugadoA concentração da droga na amostra determina a quantidade doconjugado METH-glucose-6-fosfato desidrogenase (METH-G6PDH)que está ligada ao anticorpo. O conjugado não ligado catalisa aoxidação da glucose-6-fosfato com a redução simultânea do NAD+para NADH, mais rapidamente do que o conjugado ligado. Avelocidade de aumento da absorvância a 340 nm devido aoaumento do NADH está relacionada com a concentração da drogapresente na amostra através de uma função matemática.ReagensPoços a Forma Ingrediente Concentração b Fonte1 Vazio2,3 Líquido Enzima de metadonaconjugado bb4 Vazio5,6 Líquido Anticorpo policlonal breactivo à metadona, b,c OvelhaNAD +, G6P7 Vazio8 Líquido Anticorpo policlonal breactivo à metadona, b,c OvelhaNAD + , G6Pa. Os poços são numerados consecutivamente a partir da extremidade larga docartucho Flex®.b. O anticorpo e o conjugado são um par correspondente. A titulação doanticorpo e a actividade do conjugado enzimático podem variar de lote paralote.c. Contém albumina de soro bovino.Precauções: As cuvetes utilizadas contêm líquidos biológicoshumanos; manipular com o devido cuidado para evitar o contactocom a pele ou a ingestão.Para utilização em diagnóstico in vitroPreparação do reagente: Todos os reagentes são líquidos e estãoprontos a serem utilizados.Instruções para armazenamento: Armazenar entre 2 e 8 °C.Validade: Consultar a embalagem para obter a data de validade docartucho de reagente não aberto individual. Os reagentes doscartuchos selados permanecerão estáveis durante 30 dias. Depois deum poço ter sido perfurado pelo instrumento, permanecerá estáveldurante 2 dias.Colheita de amostra: 1,2,3 Para as amostras analisadas com ocartucho de reagente Flex® para METH podem ser utilizados osprocedimentos normais para a colheita de urina.• A colheita das amostras de urina deve ser executada em recipienteslimpos, inquebráveis e estanques. Devem ser utilizadas amostras deurina colhidas recentemente. Se não forem imediatamente analisadas, asamostras deverão ser refrigeradas durante um período inferior a 24horas. Se for necessário um armazenamento superior a 24 horas, asamostras deverão ser congeladas.• As amostras de urina colhidas recentemente não necessitam de nenhumpré-tratamento especial.• Poderão existir amostras que exibam turvação. Recomenda-se acentrifugação dessas amostras, antes de serem analisadas.• Não são necessários quaisquer aditivos nem conservantes.• O ácido bórico não deve ser utilizado como um conservante.• As amostras deverão ter um valor de pH entre 5 e 8. As amostras comum valor de pH fora deste intervalo deverão ser ajustadas para esteintervalo através da adição de 1N de HCl ou de 1N de NaOH, antes daanálise.• Antes da análise, as amostras deverão estar a uma temperatura de 20 a25 ºC.• A adulteração da amostra de urina poderá originar resultados erróneos.Se houver suspeita de adulteração, efectuar a colheita de uma amostrarecente.• As amostras de urina humanas deverão ser manipuladas e tratadascomo se fossem potencialmente infecciosas.Concentração de compostos mostrandoresultados METH negativos no “Cutoff” de 300 ng/mlCada um dos seguintes compostos foi adicionado a urina sem fármaco eforneceu resultados METH negativos com um “Cutoff” de 300 ng/ml:CompostoConcentraçãoAcetaminofen1000 µg/mlα-Acetyl-N,N-dinormetadol (dinor LAAM) 25 µg/mlI-α−Acetilmetadol (LAAM)5 µg/mlN-Acetilprocainamida (NAPA)400 µg/mlÁcido acetilsalicílico1000 µg/mlAmitriptilina250 µg/mld-Amfetamina1000 µg/mlBenzoilecgonina1000 µg/mlBuprenorfina100 µg/mlCafeína1000 µg/mlCimetidin1000 µg/mlClomipramina2.5 µg/mlClonidina1000 µg/ml

CodeínaCotininaCiclobenzaprinaDesipraminaDifenidraminaDoxepina2-Etilideno-1,5-dimetil-3,3-difenilpirrolidina (EDDP)FluoxetinaGlutetimidaIbuprofenoQuetaminaCetorolac TrometaminaLormetazepamLSDMeperidinad-MetanfetaminaMetaqualonaMorfinaNaproxenoNortriptilinaOxazepamFenciclidinaFenitoínaPrometazinaPropoxifenoRanitidinaEscopolaminaSecobarbital11-nor-∆ 9 -THC-9-COOHTioridazinaTramadolTiraminaZidovudina (AZT)Zolpidem500 µg/ml100 µg/ml28 µg/ml800 µg/ml250 µg/ml10 µg/ml1000 µg/ml500 µg/ml500 µg/ml1000 µg/ml100 µg/ml1000 µg/ml1 µg/ml10 ng/ml250 µg/ml2 µg/ml1500 µg/ml1000 µg/ml1000 µg/ml750 µg/ml300 µg/ml1000 µg/ml1000 µg/ml500 µg/ml1000 µg/ml900 µg/ml500 µg/ml1000 µg/ml0.2 µg/ml100 µg/ml100 µg/ml100 µg/ml2 mg/ml100 µg/mlTeste de InterferênciasCada um dos seguintes compostos foi adicionado à urina numaconcentração de +/- 25% do “cutoff”, não produzindo uma respostafalsa relativamente ao “cutoff” de 300 ng/ml:CompostoConcentraçãoAcetona1.0 g/dlÁcido ascórbico1.5 g/dlBilirrubina0.25 mg/dlCreatinina0.5 g/dlEtanol1.0 g/dlGama Globulina0.5 g/dlGlicose2.0 g/dlHemoglobina115 mg/dlAlbumina de soro humano0.5 g/dlÁcido oxálico0.1 g/dlCloreto de sódio6.0 g/dlUreia6.0 g/dlRiboflavina7.5 mg/dlEspecificidade: O método METH detecta a presença de metadona naurina humana. Este método não detecta o metabolito 1-áacetilmetadol(LAAM) em concentrações que seriam encontradas naurina de pacientes que seguem um tratamento de LAAM.Materiais necessários:Cartucho de reagente Flex® para METH, N° de Cat. DF90ACatálogo do Calibrador de Nível 0 Syva Emit® 9A509UL 0 ng/ml metadonaCatálogo do Calibrador de Nível 2 Syva Emit® 9A549UL 150 ng/ml metadonaCatálogo do Calibrador de Nível 3 Syva Emit® 9A569UL 300 ng/ml metadonaCatálogo do Calibrador de Nível 4 Syva Emit® 9A589UL 500 ng/ml metadonaCatálogo do Calibrador de Nível 5 Syva Emit® 9A609UL 1000 ng/ml metadonaProcedimento: Para a execução do teste de METH é necessário ocartucho de reagente Flex® para METH, No. de Catálogo DF90A. Esteteste é efectuado automaticamente no sistema de química clínicaDimension ® , depois de o método ter sido calibrado (consultar oMaterial de Referência na secção Calibração, em baixo).Passos do testeA recolha da amostra, dispensação do reagente, agitação,processamento e impressão dos resultados são realizadosautomaticamente pelo sistema Dimension®. Para obter pormenoressobre este processamento, consultar o manual do sistemaDimension ® .NOTA: Os copos de amostra deverão ser enchidos com 1.0 mlde amostra, controlo ou calibrador, utilizando uma pipetaautomática. Não devem ser utilizadas pipetas de distribuiçãoplásticas. Isto ajuda a manter uma razão superfície do copo/volume da amostra constante, e minimiza a perda de fármacoda amostra devido à aderência dos fármacos à superfície docopo.Condições de teste• Volume de Amostra: 6 µl• Volume de Purga (água purificada): 10 µl• Volume do reagente 1 (anticorpo,NAD,G6P): 245 µl• Volume do reagente 2 (Enzyme Conjugate): 105 µl• Temperatura do teste: 37° C• Comprimento de onda: 340 e 600 nm• Tipo de leitura: Taxa• Volume de auto-diluição: 2 µl(Modo semi-quantitativo)*CalibraçãoQuando se calibrar o método da METH, deverão ser tomadas emconsideração as seguintes informações:Concentração “Cutoff”: 300 ng/mlMaterial de referência: Calibrador de Nível 3 Syva Emit® Catálogo 9A569ULModo qualitativo:300 ng/ml metadonaMaterial de referência Calibrador de Nível 0 Syva Emit® Catálogo 9A509ULModo semi-quantitativo: 0 ng/ml metadonaCalibrador de Nível 2 Syva Emit® Catálogo 9A549UL150 ng/ml metadonaCalibrador de Nível 3 Syva Emit® Catálogo 9A569UL300 ng/ml metadonaCalibrador de Nível 4 Syva Emit® Catálogo 9A589UL500 ng/ml metadonaCalibrador de Nível 5 Syva Emit® Catálogo 9A609UL1000 ng/ml metadonaIntervalo de calibração: 0-1000 ng/mlNíveis de calibração sugeridos:Modo qualitativo: 300 ng/ml (Nível de “cutoff”)Validar a calibração através do teste de um controlopositivo e de um negativo.Modo semi-quantitativo:Coeficientes inciciais:Modo semi-quantitativo: C0: 75.0C1: 150.0C2: -5.0C3: 750.0C4: 0.5Esquema de calibração:Modo qualitativo:Modo semi-quantitativo:Frequência da calibração:Intervalo do ensaioModo semi-quantitativo:0,150,300 (Nível de “cutoff”),500 e 1000 ng/mlValidar a calibração através do teste de um controlopositivo e de um negativo.Nível “Cutoff” (300 ng/ml) em triplicadoNíveis 0,150,300,500 e 1000 ng/ml em duplicadoCada lote novo de cartucho de reagente. Cada 30 diaspara qualquer lote individual.107-900 ng/mlControlo da qualidadePelo menos uma vez em cada dia de utilização, analisar um controlopositivo e um controlo negativo relativamente à concentração“cutoff”, utilizando um material de controlo à base de urinaadequado. Se os resultados caírem fora dos limites aceitáveis dolaboratório, seguir o procedimento da resolução de problemasapresentado no manual do sistema Dimension ® . Pode existir umaavaria do sistema se for observada a seguinte precisão de 5 testes:Concentração Desvio Padrão % CV300 ng/ml metadona > 15 ng/ml 5.0300 ng/ml metadona > 27 QUAL 2.7(Unidades QUAL normalizadas)ResultadosModo qualitativo: Os resultados obtidos numa análise de METHpodem ser referidos qualitativamente como negativos ou positivos,relativamente ao “cutoff” de 300 ng/ml para METH. Os resultadospositivos indicam que, provavelmente, a amostra contém metadona.Os resultados negativos indicam que a amostra não contémmetadona ou que a metadona está presente em concentraçõesinferiores ao nível “cutoff” de 300 ng/ml.Modo semi-quantitativo: Os resultados de uma análise de METHpodem ser referidos semi-quantitativamente com um resultadoexpresso numa concentração com unidade numérica (ng/ml)seguido por uma designação negativa ou positiva. O resultado daconcentração em ng/ml representa, aproximadamente, aconcentração cumulativa dos fármacos detectados pela análise deMETH. O resultado numérico pode ser utilizado para a semiquantificaçãoda amostra, para a monitorização com precisão e paraa calibração. Os resultados semi-quantitativos em ng/ml sãoequivalentes à concentração do fármaco apenas quando a amostra éum padrão contendo 0 a 1000 ng/ml de metadona pura.Os resultados de METH superiores ou iguais a 300 ng/ml devem serreferidos como positivos. Os resultados de METH inferiores a300 ng/ml devem ser referidos como negativos. Os resultadosinferiores ao “cutoff” numérico indicam que não existe metadona naamostra ou que a metadona está presente em concentraçõesinferiores ao nível “cutoff” de 300 ng/ml.Limitações do procedimento:• Resultados NEGATIVOS para amostras com concentrações abaixo dointervalo do ensaio podem ser acompanhadas por uma mensagem“intervalo do ensaio” ou “abaixo do intervalo do ensaio”. Estesresultados devem ser registados como NEGATIVOS.• Resultados POSITIVOS para amostras com concentrações acima dointervalo do ensaio podem ser acompanhadas por uma mensagem“intervalo do ensaio” ou “acima do intervalo do ensaio”. Estesresultados devem ser registados como POSITIVOS.• Um resultado positivo do ensaio indica a provável presença demetadona mas não indica nem mede o nível de intoxicação.