apostila de exercícios

TubosSacarose5% emtampãoTampãopH 4,77(ml)TUBOS NO GELOSol.Enzima(ml)Conc. deSubstratoMilimolarA 540Sacarosehidrolisada pormin(µmoles/min)B - 1,5 0.5 0,00 0,000 0,001 0,05 1,45 0,52 0,1 1,40 0,53 0,3 1,20 0,54 0,5 1,0 0,55 0,7 0,8 0,56 1,0 0,5 0,5Proceder EXATAMENTE como no caso do estudo do efeito da concentração daenzima (ítem anterior).Fazer um gráfico da velocidade (µmoles de sacarose hidrolisada/min.) versusconcentração inicial do substrato (mM de sacarose). Estimar os valores de V max e K m .Fazer o gráfico de Lineweaver e Burk e calcular os valores de V max e K m .Comparar o valor de K m com o encontrado na literatura.1). Discutir curvas obtidas para:ANÁLISE DOS RESULTADOS E DISCUSSÃOa) efeito da concentração da enzimab) efeito da concentração de substrato2). Elaborar um protocolo para estudar o efeito do pH sobre a atividade enzimática.Consultar na biblioteca:1. The enzymes, Boyer (editor) (1971) vol. 5, cap. 102. Técnicas e Experimentos de Bioquímica, Villela, Bacila e Tastaldi, (1973) cap. 4, pags222 a 232.3. Asare-Brown, E. and Bullock, C., Simple Practical Investigations Using Invertase,Biochem.Educ. (1988), 16, 98-100.