apostila de exercícios

PROCEDIMENTO1. CROMATOGRAFIA EM PAPELTomar uma folha (23 x 16 cm) de papel Whatman n o 1 e fazer um traço a lápis aolongo do comprimento maior a 2 cm da borda. Evitar tocar no papel durante toda a operação.Deixar uma margem de 1,5cm de cada lado.Marcar seis pontos sobre essa linha que distem 4cm um do outro e numerá-los a lápis de 1 a 6. As amostras devem ser aplicadas nos pontosnumerados com auxílio de um capilar de tal modo que a mancha formada sobre o papel sejaa menor possível. Nos números de 1 a 4 aplicar os padrões e no número 6, a mistura depadrões. A amostra desconhecida é aplicada no número 5. Enrolar o papel de modo atransformá-lo em um cilindro e prender as extremidades superiores com clip. Colocar 25 mlde solvente de Partridge (n- butanol/ácido acético glacial/água 4:1:1) em uma placa de Petri emergulhar o cilindro de papel em seu interior de modo que este fique perfeitamente navertical. Evitar que o papel toque na parede da placa. Cobrir o sistema com um béquer de 2litros e deixar o solvente migrar 10 cm. Retirar o papel e marcar imediatamente a linha defrente do solvente. Secar o papel na capela, mergulhar em solução 0,1% de ninhidrina emacetona e levar á estufa (80 o C-100 o C) por alguns minutos. Delimitar com lápis as manchasque aparecem no papel. Determinar o Rf dos padrões e do aminoácido desconhecido.2. TITULAÇÃOColocar 50 ml da solução do aminoácido (0,10 M) em pH 1,0 em um béquer e titularcom solução 0,5 M de KOH medindo o pH após cada adição de 1 ml até atingir pH 11,0.Colocar 50 ml de ácido acético 0,15 M em outro béquer e titular com solução 0,5 Mde KOH medindo o pH após cada adição de 0,5 ml até pH 12,0.ANÁLISE DOS RESULTADOS E DISCUSSÃOCROMATOGRAFIA E TITULAÇÃO01. Comparar seus valores de Rf para os aminoácidos padrão com os valores da TABELA I.Discutir a respeito das possíveis causas de discrepâncias.02. Fazer um gráfico de titulação do aminoácido com base. Estimar os valores de pKas ecomparar estes valores obtidos para o aminoácido desconhecido com aqueles daTABELA II.Fazer o gráfico de titulação do ácido acético.Comparar as curvas de titulação do aminoácido e do ácido fraco.03. Identificar seu aminoácido desconhecido, escrever sua estrutura e suas sucessivasionizações verificadas ao se aumentar o pH.MEDIDA DO pH DE ALGUNS FLUÍDOS BIOLÓGICOS OU NÃO E COMPARAÇÃO DOSVALORES OBTIDOS COM AQUELES APRESENTADOS NA FIGURA 2-15 DO LIVRO DO RAWNOU FIGURA 4-9 DO LIVRO DO LEHNINGER