apostila de exercícios

ENZIMAS01. Segel, Biochemical Calculations, Capítulo 4, Problema 4-18. Um extrato bruto livre decélulas contém 20 mg/ml de proteína. Uma alíquota de 10 µl (microlitros) deste extratoem um volume total de reação standard de 0,5 ml catalisou a formação de 30 nmoles(nanomoles) do produto em 1 min sob condições ótimas de ensaio (força iônica e pHótimos, concentrações saturantes de todos substratos, coenzimas, ativadores, etc.)a) Expresse v em termos de nmoles x ml -1 x min -1 , nmoles x litro -1 x min -1 , µmolesx litro -1 x min -1 , M x min -1b) Qual seria o valor de v se os mesmos 10 µl do extrato fossem ensaiados em um volumetotal de 1,0 ml?c) Em termos de unidades/ml, qual é a concentração da enzima na mistura de ensaio e noextrato?d) Qual é a atividade específica da preparação?02. Rawn, Biochemistry, Capítulo 7, Problema 1. A acetilcolinesterase (uma esterase)catalisa a hidrólise da acetilcolina:acetilcolina + H O2 →colina + acido aceticoa) Escreva a reação catalisada usando fórmulas estruturais e indique na estrutura daacetilcolina a ligação que é clivada. A enzima é inativada por DFP (diisopropilfluorofosfato).b) Qual é o resíduo de aminoácido que provavelmente está no sítio ativo da esterase?c) Como poderia ser identificado o resíduo modificado?d) Qual é o provável papel deste resíduo no mecanismo da catálise?03. Wood et al., Biochemistry: A Problems Approach, Capítulo 7, Problema 7-7 (Resolvernumericamente; não graficamente). Os dados da tabela abaixo foram obtidos para umareação enzimática (volume final 10 ml), usando-se o seguinte procedimento:A fim de se estudar a dependência da velocidade de uma reação enzimática pelaconcentração de substrato, uma quantidade constante de enzima foi adicionada a umasérie de tubos contendo diferentes concentrações de substrato. As velocidades iniciais dareação foram determinadas medindo-se o número de moles (ou µmoles) de substratoconsumido (ou produto formado) por minuto. A tabela a seguir mostra as velocidadesiniciais fornecidas pelas respectivas concentrações de substrato:Pergunta-se:[S] (moles/litro)v (µmoles/min)5,0 x 10 -2 0,255,0 x 10 -3 0,255,0 x 10 -4 0,255,0 x 10 -5 0,205,0 x 10- 6 0,0715,0 x 10- 7 0,0096(a) Qual é a V max para esta concentração de enzima?(b) Qual é o K M desta enzima?(c) Verifique se esta reação segue uma cinética simples de Michaelis-Menten.(d) Quais serão as velocidades iniciais para:[S] = 1,0 x 10 -6 M e [S] = 1,0 x 10 -1 M?