Betalactamases de Espectro Ampliado (ESBL): um ... - NewsLab

aztreonam e cefalosporinas de terceirageração como cefotaxima,ceftazidima, ceftriaxona; dispostosa uma distância de 20mm de discosde amoxicilina / ác. clavulânico.É considerada sinergia positiva(e, portanto, detecta-se a produçãode ESBL), quando se observauma ampliação do halo de inibiçãoem alguma das cefalosporinas oudo aztreonam ou o aparecimentode uma terceira zona irregular deinibição (conhecida como ghostzone)entre o disco composto e odisco de uma das drogas betalactâmicas.Esta técnica é de fácil realizaçãoe acessível a qualquer laboratóriode microbiologia clínica.Este método é o mais utilizado narotina laboratorial pelo baixo custo,fácil acesso à metodologia e pelotempo de obtenção dos resultados.Para cepas isoladas que demonstramzonas de inibição grandes, odisco deve ser colocado a 30mmde distância e para cepas isoladascom zona de inibição menores, umadistância menor deve ser utilizada(20mm). A determinação desta distânciaconstitui a maior dificuldadedo método (Figuras 3 e 5).Método da adição do ácido clavulânicoao disco de ceftazidimaEste método baseia-se na comparaçãodo tamanho do halo formadoem torno dos discos de ceftazidima(30µg) com o halo do disco deácido clavulânico/ceftazidima (10µg/30µg). Um aumento maior ou iguala 5mm no halo de inibição do discocomposto em comparação com ohalo do disco sem ácido clavulânico,indica bactéria produtora de ESBL.Método automatizadoAlguns painéis de microdiluiçãoestão disponíveis, comercializadosprincipalmente para os sistemasMicroScan® (Dade Behring) e Vitek®(bioMériux). A análise fenotípicada bactéria por este métodoproporciona uma padronização erapidez, o que garante boa consistêncianos resultados em detrimentoaos testes em discos, comresultados após 18-24 horas. Todavia,o método automatizado temalgumas desvantagens quandocomparado com difusão em ágar,porque certas bactérias não crescemou o fazem pobremente após4-5 horas de incubação (Proteussp, Morganella sp, Providencia sp,Yersinia sp e outras). Outro pontoseria a dificuldade em detectar obaixo nível de expressão destemecanismo de resistência. Algunscomplexos fenotípicos resultantesde combinações destes mecanismossão pobremente diferenciadospelo método automatizado (18).Desvantagens na realizaçãodestas técnicas• A hiperprodução de betalactamasecromossômica por Proteusvulgaris, Proteus penneri ou Citrobacterkoseri (que é uma cefuroximaseinibida pelo ácido clavulânico),pode resultar em uma ampliaçãodo halo com a cefuroxima,cefotaxima e ceftriaxona. A hiperproduçãodesta enzima confereresistência a estas drogas, permanecendoa bactéria sensível à ceftazidimae ao aztreonam (6)• A hiperprodução de betalactamaseK-1 por K. oxytoca produzampliação do halo com a cefuroxima,ceftriaxona, aztreoname cefotaxima, mas nunca com aceftazidima. A hiperprodução debetalactamases confere resistênciaa estas drogas, mas não à ceftazidima.Portanto, para diferenciaruma cepa de K. oxytoca hiperprodutorade K-1 de uma produtorade ESBL deve-se realizarsempre o método de determinaçãodo MIC da ceftazidima, observandose este valor se reduz napresença de ácido clavulânico (6)• A hiperprodução de SHV-1 porK. pneumoniae, causada pela presençade múltiplas cópias do plasmídeoque as codifica, tambémpode ocasionar um fenótipo compátivelcom a produção de ESBL.Nestes casos, há uma aumento dosMICs da ceftazidima (4-8µg/mL) edo aztreonam (1-2µg/mL), afetandoescassamente os MICs da cefotaximae ceftriaxona (6)• A produção de L-2 por Stenotrophomonasmaltophila resultaem sinergia positiva com aztreonamdevido à ação hidrolítica destaenzima sobre o aztreonam, sendoinibida pelo ácido clavulânico.Portanto, não devemos confundireste tipo de resistência com a provávelprodução de ESBL (6)166NewsLab - edição 63 - 2004