2002 - Instituto de Química - USP

Suely Lopes GomesREGULAÇÃO DA EXPRESSÃOGÊNICA EM MICROORGANISMOSTemos usado como sistemas-modelo para estudosde controle de expressão gênica as bactérias gramnegativas,Caulobacter crescentus e Xylella fastidiosa,e o fungo aquático Blastocladiella emersonii.Caulobacter apresenta em seu ciclo celular mudançasmorfológicas e bioquímicas, que envolvem controlede expressão gênica temporal e espacial. O nossotrabalho enfoca o estudo de genes de choque térmicoque são regulados tanto por temperatura quantodurante o ciclo celular da bactéria. As regiõesregulatórias desses genes estão sendo analisadasutilizando fusões com genes repórteres de transcrição,assim como usando mutantes nas proteínas queregulam esses genes. Mais recentemente, iniciamosa caracterização de genes codificando fatores sigmaECF, que estão envolvidos na regulação da respostacelular a estresses extra-citoplasmáticos. A análise dasproteínas cuja síntese é afetada em mutantes nulosdesses genes está sendo feita por eletroforese bi-dimensional.Nossos estudos com a bactériafitopatogênica X.fastidiosa, que causa a doença CVCem citros, visam compreender os mecanismosmoleculares responsáveis pela patogenicidade destabactéria. O enfoque envolve a obtenção de mutantese a análise da expressão gênica global da bactériasob condições de estresse térmico e osmóticoutilizando a técnica de microarranjos de DNA.Blastocladiella apresenta em seu ciclo de vida duasfases de diferenciação celular: a germinação e aesporulação. Nosso laboratório caracterizou váriosgenes cuja expressão é induzida durante aesporulação. Presentemente estamos seqüenciandoESTs obtidos de bibliotecas construídas a partir demRNAs isolados de células de diferentes fases, paraidentificar genes envolvidos nas mudançasmorfológicas que ocorrem durante o ciclo de vidado fungo.SummaryIn our laboratory we are using as model systems,to study control of gene expression, two gram-negativebacteria, Caulobacter crescentus and Xylellafastidiosa, and the aquatic fungus Blastocladiellaemersonii. In Caulobacter, we are focussing on thestudy of genes involved in the cellular response toheat and extra-cytoplasmic stresses. Our work withXylella aims at the identification and characterizationof genes involved in pathogenicity, and includesglobal gene expression analysis using DNAmicroarrays. The study with Blastocladiella concentratesin the characterization of genes differentiallyexpressed during the life cycle of the fungus, and anEST sequencing program is presently under way.Publicações:L.G. FIETTO, L. PUGLIESE & S.L. GOMES (2002) Biochim. Biophys. Acta1576, 59 - 69.J.F. SILVA NETO, T. KOIDE, S.L. GOMES & M.V. MARQUES (2002) FEMSMicrobiol. Lett. 210, 105 - 110.M.V. MARQUES, A.M. SILVA & S.L. GOMES (2001) Plasmid 45, 184 -199.R.C.G. SIMÃO & S.L .GOMES (2001) J. Bacteriol. 183, 2280 - 2288.Departamento de Química Bioquímica Fundamental99Instituto de Química - Pesquisa 2001 - 2002