2002 - Instituto de Química - USP

Pedro Soares de AraujoTRANSPORTE DE TREALOSE EESTRESSE CELULAR EMSACCHAROMYCES CEREVISIAE.Os objetivos deste projeto de pesquisa são: 1-Determinar os aminoácidos da permease AGT1envolvidos na ligação do H + durante o transporte dea-glicosídeos por mutagênese sítio-dirigida e analisara atividade de cotransporte de prótons nas permeasesmutantes. 2-Determinar os aminoácidos e/oudomínios da(s) proteína(s) transportadora(s)envolvidos na especificidade do transporte. 3-Determinar os aminoácidos e/ou domínios da permeaseAGT1 envolvidos na regulação do transporte,analisando a inativação catabólica de permeasesmutantes em diversos sinais como fosforilação eubiquitinação, envolvidos na endocitose e degradaçãovacuolar de proteínas de membrana.Estes objetivos visam a compreensão da regulaçãodos fluxos metabólicos envolvidos na resistência dascélulas de S. cerevisiae a diversos estresses, comênfase na desidratação.SummaryThe main objectives of this project are: 1- To determinethe aminoacid residues of the AGT1 permeaseinvolved in H + binding during a-glucosidetransport using site –directed mutagenesis and toanalyze the cotransport in the mutated permeases.2- To determine the aminoacid and/or transport proteindomains involved in transport specificity. 3- Todetermine the aminoacids and/or AGT1 permeasedomains involved in transport regulation by analyzingthe catabolic inactivation of mutant permeasesin relation to signals like phosphorilation andubiquitinilation involved in membrane proteins endocytosisand vacuolar degradation. The aim of theseobjectives is to foster our understanding of the regulationof the metabolic fluxes involved in S. cerevisiaeresistance to several stresses, with emphasis in dehydration.Referencias:Stambuk, B.U., da Silva, M.A., Panek, A.D. & de Araujo, P.S. - Active “-glucoside transport in Saccharomyces cerevisiae. - FEMS Microbiol. Lett.170: 105-110, 1999Stambuk, B.U., Batista, A.S., de Araujo, P.S. - Kinetics of active sucrosetransport in Saccharomyces cerevisiae. - J. Biosci. Bioeng. 89: 213-216,2000Stambuk, B.U. & de Araujo, P.S. – Kinetics of active a-glucoside transportin Saccahromyces cerevisiae. FEMS Yeast Res. 1:73-78, 2001Zastrow, C. R., Hollatz, C., de Araujo, P. S.& Stambuk, B. U. Maltotriosefermentation by Saccharomyces cerevisiae J. Ind. Microbiol. Biotechnol.27: 34-38, 2001Costa, M.H.B., Quintilio, W., Sant’Anna, O.A., Faljoni-Alário, A. & deAraujo, P.S. The use of protein structure/activity relationships for therational design of stable particulate delivery systems. Braz. J. Med. Biol.Res. 35: 727-730, 2002Departamento de Química Bioquímica Fundamental85Instituto de Química - Pesquisa 2001 - 2002