2002 - Instituto de QuÃmica - USP
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Manuel Troyano PueyoBIOLOGIA MOLECULAR DE ALFA AMILASES: CLONAGEM,EXPRESSÃO, SECREÇÃO E ATIVIDADE EM SISTEMASHETERÓLOGOS. ISOLAMENTO, CARACTERIZAÇÃO EMECANISMO DE AÇÃO DE LIPOPEPTÍDEOS COM ATIVIDADEBIOSURFACTANTE E ANTIBIÓTICA PRODUZIDOS POR UMACEPA MODIFICADA DE BACILLUS MEGATERIUM.Áreas atuais <strong>de</strong> interesse:1 - Clonaram-se os genes <strong>de</strong> amilases <strong>de</strong> B.stearothermophilus (Bacteria) e <strong>de</strong> A. merus (Diptera).Estes, fundidos em quimeras ou individualmente foramexpressos em bactéria, levedura e em inseto.Estuda-se a influencia <strong>de</strong> modificações póstraducionais, <strong>de</strong> peptí<strong>de</strong>os sinal e <strong>de</strong> dobramento naativida<strong>de</strong> das proteínas expressas.2 - Biosurfactantes capazes <strong>de</strong> baixar a tensão superficialda água até 28 mN/ m foram isolados <strong>de</strong>uma cepa <strong>de</strong> B. megaterium isolada no laboratóriodo autor. Dados <strong>de</strong> espectrometria <strong>de</strong> massa e HPLCindicam que eles são formados por uma partepeptídica com 9-10 amino ácidos ligadosaparentemente por uma ligação lactona a ácidosgraxos saturados ou não com 9 a 18 átomos <strong>de</strong>carbono. Esses compostos apresentam ativida<strong>de</strong>antibiótica em relação a diversas espécies bacterianas,patogênicas ou não. Observou-se que a maiorsensibilida<strong>de</strong> a esses biosurfactantes é apresentadapor espécies do gênero Bacillus. B. cereus, B.megaterium tipo, B. laterosporus, B. lentus, B.polymixa, B. circulans, B. subtilis, B.stearothermophilus. Estuda-se a estrutura <strong>de</strong>talhada<strong>de</strong>sses compostos e a sua ação sobremicroorganismos do gênero bacillus.Publicações:Effio, PC, Silva, EF, Pueyo, MT. (2000) A simple and rapid method forscreening amylolytic bactéria.Biochemical Education 28, 47-49.Pedro Chimoy Effio, Aurea Valadares Folgueras-Flatschart, Wagner R.Montor, Flavia M. Pernasetti, Manuel Troyano Pueyo, Mari Clei<strong>de</strong> Sogayar.Expression of functional Anopheles merus alpha-amylase in theBaculovirus/ Spodoptera frugiperda system. Submitted, Nov. <strong>2002</strong>.Takahashi, CK, Liang, YW, Pueyo, MT. (2000) Phaseolin RFLP in bean(Phaseolus vulgaris) cultivars.Journal of Food Biochemistry 24, 129-145.<strong>Instituto</strong> <strong>de</strong> Química - Pesquisa 2001 - <strong>2002</strong> 60 Departamento Departamento <strong>de</strong> Química <strong>de</strong> FundamentalBioquímica