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Visualizar Tese - Instituto de Biociências - Unesp

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Cirilo, PDRINTRODUÇÃO19transcritas (Beheshti et al., 2002). A técnica <strong>de</strong> CGH array é extremamente útil parai<strong>de</strong>ntificar marcadores cromossômicos e permite <strong>de</strong>finir a localização precisa das bandasenvolvidas entre as aberrações estruturais, in<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ntemente da combinação com análisescariotípicas (Singh et al., 2011). O princípio metodológico é semelhante ao da CGH,entretanto, supera suas limitações <strong>de</strong> resolução pelo uso <strong>de</strong> clones imobilizados em umalâmina <strong>de</strong> vidro em posições bem <strong>de</strong>finidas, ao invés <strong>de</strong> metáfases normais. Alvos <strong>de</strong> DNApara microarray po<strong>de</strong>m ser <strong>de</strong>rivados <strong>de</strong> clones genômicos incluindo YACs (0,2 a 2 Mb emtamanho), BACs (300 Kb), P1s (~70-100 Kb), PACs (~130-150 Kb), cosmí<strong>de</strong>os (~30-45 Kb),assim como oligonucleotí<strong>de</strong>os sendo, portanto, <strong>de</strong> várias or<strong>de</strong>ns <strong>de</strong> magnitu<strong>de</strong>. Atualmente,as plataformas <strong>de</strong> oligonucleotí<strong>de</strong>os têm sido amplamente utilizadas na avaliação do número<strong>de</strong> cópias <strong>de</strong> DNA, com resoluções que permitem a cobertura quase completa do genomahumano (Przybytkowski et al., 2011). Esta diminuição no tamanho do alvo aumenta o po<strong>de</strong>r<strong>de</strong> <strong>de</strong>tecção <strong>de</strong> alterações genômicas em comparação a CGH cromossômica. Quantida<strong>de</strong>sequimolares <strong>de</strong> DNA teste e referência, marcados diferencialmente, são hibridados emlâminas contendo fragmentos genômicos clonados e fixados em posições <strong>de</strong>finidas formandoum chip. Diferenças na razão da intensida<strong>de</strong> dos sinais po<strong>de</strong>m ser interpretadas comodiferenças no número <strong>de</strong> cópias entre os genomas teste e referência. Devido a sua maiorresolução, a CGH array permite a i<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> genes que atuam nas diferentes etapas dacarcinogênese revelando seqüências que po<strong>de</strong>m estar envolvidas na gênese ou progressãotumoral. Entretanto, esta técnica não é capaz <strong>de</strong> i<strong>de</strong>ntificar mosaicismos em baixa freqüênciae rearranjos equilibrados, assim como na CGH cromossômica (para revisão Rogatto, 2000).Para o nosso conhecimento, existem cinco relatos em literatura utilizando ametodologia <strong>de</strong> CGH array (Quadro 1) e dois estudos utilizando SNP array para avaliar operfil genômico dos Leiomiomas Uterinos.

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