Karen Tereza Altieri - Faculdade de Odontologia - Unesp

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de células foram gradativamente adicionadas a um tubo de ensaio contendo 10
mL de TSB até ser obtido um valor no intervalo de 0.06 – 0.10 no display do
turbidímetro, correspondendo ao grau de turvação 0.5 da escala de McFarland.
Para o preparo da suspensão de contaminação dos corpos-deprova,
uma alíquota de 1,5 mL do inóculo em TSB foi transferida para um
epperdorf estéril, o qual foi centrifugado a 5000 rpm por 5 min e as células
sedimentadas foram lavadas duas vezes com solução PBS estéril por meio de
agitação e centrifugação. As células lavadas foram ressuspendidas em 20 mL de
TSB estéril e a densidade óptica da suspensão foi determinada e padronizada
em uma concentração aproximada de 10 7
ufc/mL 38,68,74,105 , utilizando-se
espectrofotômetro com comprimento de onda de 600 nm.
4.4.4 Procedimentos de formação de biofilme nas próteses e corpos-deprova
Para a formação de biofilme, as próteses totais foram imersas em
béqueres contendo 200 mL de TSB estéril e contaminadas com uma alíquota de
100 µL do microrganismo na concentração anteriormente obtida. Os béqueres
foram incubados sob agitação a 80 rpm a 37 °C por 24 h (Figura 14) 38,105 .